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1、授予單位代碼10089學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?2007HebeiMedicalUniversity碩士學(xué)位論文在職科學(xué)學(xué)位休克腸淋巴液對(duì)脾樹突狀細(xì)胞免疫功能的影響學(xué)位申請(qǐng)人：李建鋒導(dǎo)師：牛春雨教授趙自剛教授專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)二級(jí)學(xué)院：河北北方學(xué)院2015年3月河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組）的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果,其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)?大學(xué)所
2、、>有。否則，承擔(dān)研究生簽名:河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫,文責(zé)自負(fù)。目錄中文摘要………………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………………………3研究論文休克腸淋巴液對(duì)脾樹突狀細(xì)胞免疫功能的影響前言……………………………………………………………………6材料與方法……………………………………………………………7結(jié)果……………………………………………………
3、………………12附圖……………………………………………………………………16討論……………………………………………………………………22結(jié)論……………………………………………………………………25參考文獻(xiàn)………………………………………………………………26綜述樹突狀細(xì)胞及其調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能的作用………………………..30致謝…………………………………………………………………………41個(gè)人簡歷……………………………………………………………………42中文摘要休克腸淋巴液對(duì)脾樹突狀細(xì)胞免疫功能的影響摘要背景：免疫功能紊亂是重癥失血性休克患者出現(xiàn)全身炎癥反應(yīng)綜合征（SIRS）、以及隨之而來的多
4、器官功能障礙綜合征（MODS）、甚至引起死亡的重要原因。機(jī)體中一系列的免疫細(xì)胞，通過產(chǎn)生大量細(xì)胞因子以非特異性方式對(duì)抗外來抗原的入侵。其中，樹突狀細(xì)胞（DCs）等抗原遞呈細(xì)胞可將入侵信息遞呈給T淋巴細(xì)胞，啟動(dòng)長期特異性免疫機(jī)制，從而發(fā)揮抗感染的作用。研究表明，失血性休克發(fā)展過程中，先天免疫最先受累，并進(jìn)一步導(dǎo)致免疫功能抑制、促進(jìn)炎癥全身擴(kuò)散，是發(fā)生SIRS、MODS與膿毒癥的重要免疫學(xué)基礎(chǔ)。休克腸淋巴液回流是失血性休克后組織損傷、器官功能障礙的重要發(fā)病學(xué)基礎(chǔ)；已有的研究也發(fā)現(xiàn)，阻斷休克腸淋巴液回流可降低脾臟、胸腺等免疫器官的結(jié)構(gòu)損傷，改善細(xì)胞免疫功能。但休克腸淋巴液回流與DCs這一啟動(dòng)
5、細(xì)胞免疫功能的抗原遞呈細(xì)胞之間的關(guān)系，還不清楚。目的：本研究在建立失血性休克小鼠模型的基礎(chǔ)上，應(yīng)用脾DCs免疫磁珠分離技術(shù)，觀察腸淋巴液引流、腸淋巴液孵育對(duì)DCs在脂多糖（LPS）處理前后產(chǎn)生細(xì)胞因子能力的影響，初步揭示腸淋巴液對(duì)DCs免疫功能的調(diào)節(jié)作用。方法：健康雄性BALB/C小鼠，分為假手術(shù)組、休克組、休克+引流組。休克組與休克+引流組動(dòng)物復(fù)制失血性休克模型（40±2mmHg維持60min后行液體復(fù)蘇），休克+引流組動(dòng)物于液體復(fù)蘇結(jié)束即刻行腸淋巴液引流，3h后或假手術(shù)組于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)，取脾，應(yīng)用免疫磁珠法（抗CD11c）分選獲取脾臟DCs；離體培養(yǎng)環(huán)境狀態(tài)下，觀察三組小鼠脾DCs以
6、及在LPS孵育后產(chǎn)生TNF-α、IL-10、IL-12的能力。取健康雄性BALB/C小鼠，復(fù)制失血性休克模型，部分引流低血壓60min期間的休克期腸淋巴液（post-hemorrhagicshockmesentericlymphduringhypotenstion，PHSML-H），部分引流液體復(fù)蘇后腸淋巴液（post-hemorrhagicshcokandmesentericlymphafterresuscitation，PHSML-R），取正常小鼠引流正常腸淋巴液（normalmesentericlymph，NML）；然后取正常小鼠脾臟，應(yīng)用免1中文摘要疫磁珠法分選獲取脾臟DCs；
7、將NML、PHSML-H、PHSML-R分別與正常DCs培養(yǎng)，并以LPS做為陽性對(duì)照，同時(shí)設(shè)空白對(duì)照，觀察各組DCs在3、6、12、24h以及再次分別與LPS處理后24h產(chǎn)生TNF-α、IL-10、IL-12的能力。結(jié)果：急性分離的脾DCs，經(jīng)免疫磁珠分選、流式細(xì)胞術(shù)檢測，獲+得的CD11c細(xì)胞純度均在90%以上。假手術(shù)組、休克組和休克+引流組小鼠急性分離的脾DCs，在體外培養(yǎng)24h后，各組間培養(yǎng)上清液中TNFα、IL-10和IL-12含量未見
