體外誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化為表皮樣細(xì)胞

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1、；ｉ＜‘嬌＇；：．，評ｆ．＇－‘．；．礦…ｒ．：巧．．；．＇＂＇＇．＾＇＾ｙ＇：＼少：．：．誠＇－，－－；，＇＇巧；＇－＾！＾：遽１１１—習(xí)ｉｌｌｌｌｌｌｌＢｌ＇ｉ—Ｉ１—解放軍醫(yī)學(xué)院碩±學(xué)位論文分類號：Ｒ３４密級：公開體外誘導(dǎo)人勝帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化為表皮樣細(xì)胞Ｔｒａｎｓｄ－ｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＵｍｂｉｌｉｃａｌＣｏｒｄＤｅｒｉｖｅｄＭｅｓｅｎｃｈｍａｌＳ化ｍＣｅｌｌｓｉＷｏ

2、ｙＥｉｄｅｒｍａＫＬｉｋｅＣｅｌｌｓｉｎＶ化ｏｐ作者姓名：煉德看學(xué)科專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)導(dǎo)師：韓為東教＾答辯委員會主席；論文答辯時(shí)間二Ｏ—五占二十一曰：院校地址：北京市復(fù)興路２８號１００８郵政編碼：巧解放軍醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明＂＂秉承我院忠誠、敬業(yè)、和諧、創(chuàng)新的學(xué)風(fēng)，本人聲明，所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研巧工作機(jī)取得的研究成果，除。據(jù)我所知了文中特別加標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫

3、過的研巧成果，也不含為獲得我院或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位及證書而使用過的材料，對本文的研巧作出貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均己在文中做了明確的說明并表示謝意。一，本人承擔(dān)切相關(guān)責(zé)任申請學(xué)位論文與材料若有不實(shí)之處。：論文作者簽名：曰期姑舊身、坪／指導(dǎo)教師簽名￣曰期口方：耳誠舊氣解放軍醫(yī)學(xué)曉研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授巧書本人保證畢業(yè)離院后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院或解放軍總醫(yī)院。學(xué)院有權(quán)保留并向國家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文，可Ｗ采用影印原件、復(fù)印件和電子版本、縮

4、印、掃描或其他手段保存論文Ｗ供被查閱和借閱。學(xué)院可レッ公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容（保密內(nèi)容除外）。：論文作者簽名：皆複系曰期＞店午的泊指導(dǎo)教師簽名期：興巧年娜８．解放軍醫(yī)學(xué)院碩±學(xué)位論文目錄中文摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ３刖胃７一第部分人旅帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離１１、培養(yǎng)和鑒定材料和方法１１結(jié)果１７Ｍｉｔ１９４＾２０第二部分人脫帶間充質(zhì)干細(xì)胞在膠原－殼聚糖支架材料中培養(yǎng)２１材料和方法２１２５結(jié)果職２９

5、／、］結(jié)３０．３１第Ｈ部分模抵皮膚微環(huán)境誘導(dǎo)人脈帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化為表皮樣細(xì)胞．．．．．３１材料和方法結(jié)果３８討論４０小結(jié)４１４３第四部分表皮替代物促進(jìn)大鼠全層皮膚創(chuàng)面愈合材料和方法４３結(jié)果４５Ｍｉｔ４７?。牐樱墸矗福崳娊夥跑娽t(yī)學(xué)院碩±學(xué)位論文４８參考文獻(xiàn)５０ＳＥ５５英文縮略詞表６３發(fā)表論文情況６５致謝６６解放軍醫(yī)學(xué)院碩±學(xué)位論文作者：陳德云學(xué)科專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)導(dǎo)師：韓

6、為東教授體外誘導(dǎo)人廝帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化為表皮樣細(xì)胞中文巧要目的課題探討人擠帶間充質(zhì)干細(xì)胞（ＨｕｍａｎＵｍｂｉｌｉｃａｌＣｏｒｄ－Ｄｅｒｉｖｅｄ；本ＭｅｓｅｎｃｈｍａｌＳ化ｍＣｅｌｌｓｈＵＣ－ＭＳＣｓ）的分離、培養(yǎng)《及對其生物學(xué)特性的ｙ，鑒定－－。構(gòu)建膠原殼聚糖支架材料同時(shí)檢測其生物學(xué)特性。利用ｈＵＣ，ＭＳＣｓ的多向分化特性探索由ｈＵＣ－ＭＳＣｓ和膠原－殼聚糖支架構(gòu)建的３Ｄ環(huán)，境結(jié)合氣－－ｓ分化成表皮樣細(xì)胞液培養(yǎng)的方式是否可誘導(dǎo)ｈＵＣＭＳＣ，并構(gòu)建成表皮替代物用于

7、大鼠全層皮膚損傷的治療。，方法－１．，培養(yǎng)ＭＳＣｓ。采用相差顯微鏡；采用組巧塊培養(yǎng)法來分離原代ｈＵＣ－ＭＳＣｓ表面標(biāo)志物采用成觀察細(xì)胞形態(tài)特征，采用流式細(xì)胞儀鑒定ｈＵＣ，脂驗(yàn)檢測ｈＵＣ－ＭＳＣｓ的多向分化潛能。，成骨誘導(dǎo)實(shí)－－２、．采用冷凍干燥交聯(lián)的方法制備膠原殼聚糖支架材料，將ｈＵＣ一－Ｗ構(gòu)建富含生物活性的支架材料ＭＳＣｓ接種到膠原殼聚糖支架材料上。，次接種細(xì)胞４ｈ后待細(xì)胞進(jìn)、支架中二次將ｈＵＣ－ＭＳＣｓ接種到活性支架，，表面上２ｄ后培養(yǎng)條件轉(zhuǎn)變?yōu)闅猓Ｔ谡Ｅ囵B(yǎng)條件下，培

8、養(yǎng)，然液培養(yǎng)，分－別于氣－７ｄ１４ｄ。利ｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎ的方法檢測氣液液培養(yǎng)，用免疫組化和ｗｇ培養(yǎng)７ｄ，１４ｄ細(xì)胞角蛋白１９（ＣＩＣ１９）和外皮蛋白的表達(dá)情況。３．構(gòu)建直徑々１ｃｍ的ＳＤ大鼠全層皮膚損傷模型，分為王個(gè)不同的處理組：表皮替代物組單純支架材料組空白對照組觀察不同處理組的創(chuàng)，，，面愈合情況并進(jìn)一步通過組織學(xué)的方法（ＨＥ染色）檢測大鼠皮膚修復(fù)情，況。采用焚光染料示蹤的方法檢測移植入的細(xì)胞的去