牡丹花衰老相關基因的篩選與功能研究

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1、＠滿？考博ｉ學位論文牡丹花衰老相關基因的篩選與功能研究研究生姓名劉薦英指導教師盧向陽教授＿＿學科專業(yè)化物化學分廣化物學‘研究方向怕物發(fā)臺化物學分ｆ生物學—－：〇五年分類號％％．ｌｌ密級公開ＵＤＣ６３５單位代碼１０５３７顯南祭巫丈＃尊±學位論文牡丹花衰老相關基因的篩選與功能研究ＳｃｒｅｅｎｉｎａｎｄＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＧｅｎｅｓＡｓｓｏｃｉａｔｅｄｇｗｉｔｈｔｈｅＦｌｏｗｅｒＳｅｎｅｓｃｅｎｃｅｉｎＴｒｅｅＰｅｏｎｙＰ＇ａｅｏｎｉａｓｕｎｉｔｉｃｏｓ

2、ａＡｈＡｙ．（斯）硏究生姓名劉春英指導教師盧向陽教授鄭國生教授學科專業(yè)生物化學與分子生物學硏究方向植物發(fā)育生物學與分子生物學論文答辯日期２０１５年月日答辯委員會主席膝信波論文評閱人楊洪強徐吉臣周立剛王賢純范燕萍二〇—五年四月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在指導老師指導下進行的研巧工作及取得的研究。盡我所知ｉ成果，除了文中特別加＾ｌ，論＾標注和致謝的地方外文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得湖南農(nóng)業(yè)大學或其它教育機構的學位或化一書而使用過的材料。與我巧工作的同志對

3、本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名：時間；年＜＾月作／關于論文使用授權的說明、本人完全了解湖南農(nóng)業(yè)大學有關保留使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權保留送交論文的復印件和電子稿，允許論文被查閱和借閱，可Ｗ采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意湖南農(nóng)業(yè)大學可Ｗ用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內(nèi)容，并同意將由此產(chǎn)生的收益捐贈給學校教育基金會用于發(fā)展研巧生教育。（保密的學位論文在解密后應遵守此協(xié)巧）研究生簽名：時間：年＾月石導師簽名：時間：己ｗ；Ｔ年

4、＾月曰ｄｆｉ摘要—摘要Ｐｆｌ＇’牡丹ＣｅｏｎｚａｓＭ方ｈ／ｎｃｏｓａＡｎｄｒ．）是我國的十大名花之首，是美好、幸福、吉祥、富貴的象征－５，深受世界各國人民的喜愛。牡丹的正?；ㄆ谠诿磕辏丛路荩M管現(xiàn)在己通過牡丹春節(jié)催花技術實現(xiàn)了人們春節(jié)賞花的愿望，但由于牡丹的自然花期比較短，一般僅為７天左右，因此仍不能滿足人們賞花的愿望。牡丹的花期長短，直接影響到牡丹的觀賞質量和牡丹產(chǎn)區(qū)的經(jīng)濟效益，延長牡丹花期對促進旅游。延緩牡丹花衰老業(yè)的發(fā)展具有積極意義一，已成為當前急需解決的重要課題之。＇＇本研究Ｗ牡丹魯荷紅為試

5、驗材料，通過觀察自然條件下牡丹花衰老過程中形態(tài)、顯微結構的變化，確定了牡丹花的衰老時期。利用抑制性消減雜交技術，構建了牡丹花衰老相關基因的抑制消減雜交文庫。通過ＲＡＣＥ擴增得到３個牡丹花衰老相關ｃＤＮＡＩ１１－４公騎的超表達基因的全長，并對其進行生物信息學分析Ｂ２ＡＭ。構建了Ｐ，利用花序侵染法轉化野生型擬南芥，觀察轉基因擬南芥的表型特征載體。其主要研究結果如下：１．通過對自然條件下牡丹花衰老過程中花的外形和石蠟組織切片的觀察，發(fā)現(xiàn)花一瓣的組織結構變化趨勢和花發(fā)育不同時期的形態(tài)學變化趨勢基本致，并最終確定牡丹花的衰老時期。

6、２．分別盛開花瓣和衰老花瓣作為化ｓｔｅｒ（ｄｒｉｖｅｒ）和ｄｒｉｖｅｒ（ｔｅｓｔｅｒ），構建杜丹花衰老相關的正向和反向抑制消減雜交文庫，最終分離得到２１１個有效表達序列標簽（ＥＳＴ）序列。根據(jù)ＫＥＧＧ數(shù)據(jù)庫的ＢＬＡＳＴ結果，有４８個ＥＳＴ序列得到功能注釋。將所得２１１條ＥＳＴ使用ＣＯＧ數(shù)據(jù)庫進行直系同源聚類分析，發(fā)現(xiàn)其中４４條ＥＳＴ序列被分成１４類：未知功能預測，；碳水化合物轉運和代謝；蛋白質周轉翻譯后修飾和分子伴侶翻譯，核糖體結構和生物轉化脂質轉運和代謝無機離子轉運和代謝細；；；；胞骨架；轉錄；細胞壁和細胞膜的生物合成；

7、胞內(nèi)運輸，分泌和囊泡轉運；防御機制；氨基酸轉運與代謝次生代謝物的合成，轉運和分解代謝復制，重組和修復。為進；；一，從２１步分析差異表達基因在不同花衰老時期的表達情況１條ＥＳＴ序列中隨機選?。崳姡校茫曳治觯玻硹lＥＳＴ進行ｑＲＴ，結果表明，ｑＲＴＰＣ民結果與花衰老相關的抑制消減雜交結果相一致。３．根據(jù)消減文庫中獲得的長鏈脂醜輔酶Ａ基因的ＥＳＴ序列設計引物，利用ＲＡＣＥ擴增得到２３７７ｂｐ的全長ｃＤＮＡ，其中包含１８３０ｂｐ的編碼區(qū)，共編碼６０９個氨基酸，分子量為６７，．９４ＫＤ等電點為６．１９１。ＰｓＬＡＣＳ包括３０個可能的

8、稱酸化位點，Ｉ湖南農(nóng)業(yè)大學博±學位論文－這可能與酶活性的調節(jié)有