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《畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）PPT答辯-核桃多酚氧化酶(PPO)特性的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、核桃多酚氧化酶（PPO）特性的研究專業(yè)：07生物科學(xué)學(xué)生導(dǎo)師：青皮核桃目錄一、選題的目的和意義二、選題的依據(jù)三、國內(nèi)外研究概況四、材料與方法五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果六、結(jié)論七、主要參考文獻(xiàn)八、致謝一、選題的目的和意義多酚氧化酶(Polyphenoloxidase，PPO)是一種含銅酶，廣泛存在于各種果蔬中，是引起果蔬酶促褐變的重要因素之一。為了保持桃核產(chǎn)品的風(fēng)味、色澤，提高產(chǎn)品的食用價(jià)值，延長產(chǎn)品的保存期，故進(jìn)行桃核PPO特性的研究。研究核桃PPO的性質(zhì)對核桃的科學(xué)保鮮和貯藏，提高核桃在市場上的競爭力，合理開發(fā)利用核桃資源具有重要意義。二、選題的依據(jù)根據(jù)多酚氧化酶的酶學(xué)性質(zhì)
2、，以PPO的活性為指標(biāo)，研究抑制PPO作用的最適條件以及一些化學(xué)試劑對酶活性的影響，并得到有效抑制酶促褐變的條件。三、國內(nèi)外研究概況在國外，PPO首先由Yoghid于1883年在日本漆樹研究過程中發(fā)現(xiàn)。由于其與食品加工等有著密切的關(guān)系，之后一直是研究的熱點(diǎn)，尤其在PPO生化、生理學(xué)性質(zhì)方面取得了較大的進(jìn)展。在國內(nèi)，曾從各種果品和蔬菜中，及微生物及動(dòng)物體內(nèi)分離出來。近年來，人們從生物學(xué)本身多方位地對PPO開展了研究，雖有研究表明PPO是促使酶促褐變的主要原因，但是其生理功能及特性，還需要進(jìn)一步的研究。四、材料與方法1.材料與儀器1.1供試材料當(dāng)年生核桃（產(chǎn)地：商洛
3、市丹鳳縣）。1.2主要試劑磷酸鹽緩沖液（磷酸二氫鈉，磷酸氫二鈉）、鄰苯二酚溶液、抗壞血酸(Vc)、檸檬酸溶液、亞硫酸氫鈉、醋酸等。1.3主要儀器高速組織搗碎機(jī)、高速冷凍離心機(jī)、分光光度計(jì)、電子天平、冰箱等。2.技術(shù)路線PPO粗酶液的提取單因子試驗(yàn)不同抑制劑pH值加熱時(shí)間溫度正交試驗(yàn)（三因子：溫度、加熱時(shí)間、抑制劑濃度）分析討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定核桃PPO活性抑制的最佳條件樣品的采集及處理PPO粗酶液的提取單因子試驗(yàn)不同抑制劑pH值加熱時(shí)間溫度正交試驗(yàn)（三因子：溫度、加熱時(shí)間、抑制劑濃度）分析討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定核桃PPO活性抑制的最佳條件3.方法3.1多酚氧化酶粗酶液的提
4、取稱取組織完整、無損傷、無色變核桃仁20g，迅速加入預(yù)冷的磷酸鹽緩沖液（0.02M,pH6.0）100mL，高速組織搗碎機(jī)勻漿5min，4層紗布過濾后在高速冷凍離心機(jī)上進(jìn)行離心（8000r/min，4℃）10min，離心后將上清液放入冰箱中（4℃）保存?zhèn)溆谩?.2PPO活性的檢測采用分光光度法。吸取冷磷酸鹽緩沖液1.5mL、0.2M鄰苯二酚溶液1.0mL于比色皿中，先30℃保溫5min，再加PPO酶液1.0mL，混勻后于420nm波長處比色，以吸光度A值表示PPO的相對活性。3.3單因子試驗(yàn)⑴溫度對PPO活性的影響；⑵加熱時(shí)間對PPO活性的影響；⑶pH值對PPO
5、活性的影響；⑷不同抑制劑對PPO活性的影響。3.4正交試驗(yàn)根據(jù)單因子試驗(yàn)結(jié)果，擬定方案進(jìn)行正交試驗(yàn)。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果5.1溫度對PPO活性的影響升溫初期PPO活性隨溫度升高而增強(qiáng)，當(dāng)溫度達(dá)到30℃時(shí)，其活性最大，當(dāng)溫度繼續(xù)上升時(shí)，活性開始減弱。PPO的反應(yīng)適宜溫度為25-35℃。5.2加熱時(shí)間對PPO活性的影響在不同溫度下，隨著加熱時(shí)間的延長，PPO活性迅速下降，之后隨加熱時(shí)間延長而下降的趨勢明顯減慢。在同一溫度下，隨著加熱時(shí)間的延長，PPO活性迅速降低，經(jīng)處理12min時(shí)，PPO活性基本喪失。5.3pH值對PPO活性的影響PPO活性隨pH值的升高而下降，pH值為6
6、.0時(shí)，PPO的活性最強(qiáng)，繼續(xù)升高pH值，其活性急劇下降。在偏堿性條件下，PPO活性易受到抑制。5.4不同抑制劑對PPO活性的影響5.4.1不同濃度檸檬酸對PPO活性的影響隨著檸檬酸用量的增加，PPO活性呈下降趨勢。當(dāng)檸檬酸濃度在0.09-0.17mol/L時(shí)，能較好的抑制PPO的活性。5.4.2不同濃度抗壞血酸對PPO活性的影響隨著抗壞血酸用量的增加，PPO活性呈下降趨勢。當(dāng)抗壞血酸的濃度大于0.56mol/L時(shí)，吸光值明顯下降，其A值為0.045。5.4.3不同濃度亞硫酸氫鈉對PPO活性的影響隨著亞硫酸氫鈉濃度的不斷增加，總體上抑制效果越來越好，但是當(dāng)亞硫酸
7、氫鈉的濃度在0.10-0.20mol/L時(shí)，吸光值A(chǔ)的變化并不明顯。5.4.4不同濃度醋酸對PPO活性的影響不同濃度醋酸條件下，其吸光值呈拋物線變化?？傮w上看，吸光值A(chǔ)的變化幅度很小，介于0.947-1.036之間。由此可知，醋酸對PPO活性的抑制效果相對較差。5.4.5分析不同的抑制劑對PPO抑制效果不同，且同一種抑制劑的不同濃度其抑制效果也各不相同。綜上可知，醋酸對PPO活性的抑制效果相對較差，檸檬酸、抗壞血酸（Vc）、亞硫酸氫鈉（NaHSO3）對核桃PPO活性有很好的抑制作用。其中，抗壞血酸（Vc）、亞硫酸氫鈉（NaHSO3）的抑制效果要好于檸檬酸，但亞硫
8、酸鹽在生產(chǎn)中會(huì)造成食品含
