海蜇膠原蛋白理化性質(zhì)及其膠原肽的護(hù)膚活性研究

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1、中國(guó)海洋大學(xué)博士學(xué)位論文海蜇膠原蛋白理化性質(zhì)及其膠原肽的護(hù)膚活性研究姓名：莊永亮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：食品科學(xué)指導(dǎo)教師：李八方20090601海蜇膠原蛋白理化性質(zhì)及其膠原肽的護(hù)膚活性研究為71．87％，水解度為14．69％；堿性蛋白酶properaseE水解條件為pH9．1，水解溫度為47．3℃、酶與底物比為2．8％，此條件下，水解產(chǎn)物的羥自由基抑制率為79．07％，水解度為17．89％。復(fù)合酶水解顯著提高水解液清除羥自由基的能力和水解度，復(fù)合酶的最佳水解條件為堿性蛋白酶和胰蛋白酶混合水解，溫度48．0℃，酶與底物的比值分別為2．8％和3．5％，pH9．

2、1，水解時(shí)間3h，此條件下，水解產(chǎn)物的羥自由基抑制率為94．24％，水解度為24．32％。從三種水解產(chǎn)物的分子量大小和氨基酸組成來看，單酶水解的平均分子量主要集中在2000Da左右，復(fù)合酶水解的平均分子量在700Da左右；三種水解產(chǎn)物氨基酸組成沒有明顯不同，富含Gly和Pro，總疏水性氨基酸含量在35％左右。4．以海蜇膠原蛋白復(fù)合酶水解液為原料，超濾獲取三個(gè)不同分子量組分JCHl：Mw>3000Da；JCH2：1000Da

3、和脂質(zhì)氧化抑制能力，并對(duì)超氧陰離子具有較高的清除能力，三種體系與濃度均呈正相關(guān)性，其中對(duì)超氧陰離子的抑制率與濃度呈線性關(guān)系；JCH2對(duì)羥自由基和過氧化氫活性氧清除效果明顯，并體現(xiàn)出較好的銅螯合能力，量效關(guān)系明顯。水解液中氨基酸的組成和分子量的大小直接影響其抗氧化能力的大小。5．通過體外培養(yǎng)小鼠B16黑素瘤細(xì)胞株，探討了不同分子量膠原肽組分(JCHl，JCH2，JCH3)對(duì)細(xì)胞內(nèi)黑色素合成的影響及作用機(jī)制。結(jié)果顯示，三種膠原肽對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)無任何影響(P>0．05)，體現(xiàn)了膠原肽無細(xì)胞毒性。膠原肽能夠有效的降低B16黑素瘤細(xì)胞黑素含量(P<0．05，P<0．01

4、)，劑量效應(yīng)關(guān)系明顯，其中JCH2抑制能力高于JCHl和JCH3，濃度在1001．tg／ml時(shí)，黑色素含量降低了38．8％。從作用機(jī)制來看，相對(duì)于其它兩組分，JCH2表現(xiàn)出較高的抑制酪氨酸酶活性(P<0．01)，濃度為50rt∥rra時(shí)，抑制率為40．5％；同時(shí)有效的增加細(xì)胞內(nèi)GSH含量，降低GSSG含量，繼而提高兩者的比例(P<0．05，P<0．01)，保證細(xì)胞內(nèi)的還原能力；另外，JCH2能夠顯著降低細(xì)胞內(nèi)cAMP含量(P<0．01)，從而抑制酪氨酸酶的表達(dá)。6．通過紫外線誘發(fā)小鼠皮膚光老化模型，研究膠原蛋白和膠原肽對(duì)紫外線損傷的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果顯示，兩者

5、能有效地緩解紫外線照射引起的光老化程度，膠原肽表現(xiàn)的生理活性高于膠原蛋白。膠原蛋白和膠原肽顯著提高光老化模型的ll海蜇膠原蛋白理化性質(zhì)及其膠原肽的護(hù)膚活性研究胸腺指數(shù)和脾指數(shù)，防止免疫器官的萎縮，延緩衰老。膠原蛋白和膠原肽能夠提高小鼠皮膚及血清中SOD、GSH．Px、CAT等抗氧化酶活性及GSH的含量，同時(shí)降低MDA含量(P

6、的受損程度，保持I／III型膠原蛋白比例，改善彈性纖維排列與分布，促使皮膚富有彈性。關(guān)鍵詞：海蜇；膠原蛋白；抗氧化；光老化；B16黑色素瘤細(xì)胞III海蜇膠原蛋白理化性質(zhì)及其膠原肽的護(hù)膚活性研究StudyontheBiochemicalCharacterizationofCollagenandSkin．careActivityofCollagenpeptidesExtractedfromJellyfishRhopilemaesculentumAbstractJellyfish(Rhopilemaesculentum)isoneofthemostimporta

7、ntfisheryresourceinChina,whichhasthehigheconomic，nutritionalandmedicinalvalue．Inthispaper,collagenwithouttelopeptideswaspreparedfromtheumbrellaofjellyfshRhopilemaesculentumandthephsicochemicalcharacteristicswerestudied．TheappropriateproteaseandconditionofhydrolysisWasselectedtopro

8、ducecollagenpolypeptides．Theantio