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《通絡益腎湯對DN模型大鼠腎組織αSMA表達影響的實驗研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、通絡益腎湯對DN模型大鼠腎組織α-SMA表達影響的實驗研究作者：董正華,楊薪博,應小平，宋春光，范麗，李小會【摘要】 目的觀察通絡益腎湯對糖尿病腎?。―N）大鼠腎小管上皮及間質平滑肌肌動蛋白（α-SMA）表達的影響，探討本方對DN模型大鼠腎保護作用的可能機制。方法采用單側腎切除+STZ誘導DN大鼠模型，大鼠隨機分為正常組、病理組、通絡益腎湯治療組、西藥治療組。觀察各組大鼠治療后腎功能（BUN、Scr）、24h尿蛋白定量（24hUpr）、尿β2微球蛋白（β2-MG）含量、腎臟肥大指數及腎組織α-SM
2、A的表達等指標的變化。結果與病理組比較，通絡益腎湯治療組大鼠腎臟肥大指數、BUN、Scr顯著改善（P<0.01），24hUpr、尿β2-MG明顯下降（P<0.01），腎小管上皮及間質α-SMA陽性表達率明顯下降（P<0.01），與西藥組比較，各項指標無顯著性差異（P﹥0.05）。結論通絡益腎湯可能通過降低腎小管上皮α-SMA的表達，抑制腎小管上皮-間質細胞轉分化，延緩腎小管間質纖維化，從而達到保護腎臟，改善腎功能的目的?！娟P鍵詞】通絡益腎湯 糖尿病腎病 α-平滑肌肌動蛋白8 糖尿
3、病腎?。―N）是糖尿病（DM）發(fā)展到一定階段而出現的主要并發(fā)癥之一。DN持續(xù)、進行性發(fā)展，將導致終末期腎臟病(ESRD)。腎間質纖維化是導致ESRD的主要原因和共同病理過程，腎小管上皮-間質細胞轉分化（EMT）則是腎間質纖維化的重要發(fā)病機制之一［1］，腎小管間質α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）又是EMT的標志因子［2］。此前我們針對DN腎虧陰陽兩虛、血絡瘀阻的病機，使用通絡益腎湯治療DN，臨床取得較好療效［3］。本實驗通過觀察通絡益腎湯對DN模型大鼠腎小管上皮-間質細胞轉分化中α-SMA表達的影響，
4、探討其對DN腎間質纖維化的影響，揭示其腎保護作用的可能機制?！ ?材料 1.1動物SD雄性大鼠，60只，體質量(180±20)g，由第四軍醫(yī)大學實驗動物中心提供，動物合格證號：SCXK(軍)2007-007（08034）?！ ?.2用藥及試劑通絡益腎湯由桃仁、水蛭、生地、酒大黃、山萸肉、山藥、黃芪等組成，大鼠用量按文獻折算［4］。藥物經常規(guī)煎煮、過濾，水浴蒸發(fā)至每毫升含生藥2.23g，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｂ逋⌒拢罕本┲Z華制藥有限公司生產，批號X1036；糖適平：北京萬輝雙鶴藥業(yè)有限責任公司生產，
5、批號070822。鏈脲佐菌素（STZ）：購自sigma公司，批號S8050。α-SMA試劑盒，購自武漢博士德生物工程有限公司。8 2方法 2.1模型復制及分組給藥大鼠購回后適應性喂養(yǎng)1周，稱體重，經尿糖、尿蛋白定性檢測為陰性后，隨機抽取9只作為正常對照組（A組）。所有大鼠以10%水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉、備皮、常規(guī)消毒，在背部左腎區(qū)做1～1.5cm切口，A組僅暴露出左腎，用玻棒撥動后，縫合切口。模型組大鼠暴露左腎，剝離腎臟脂肪及腎上腺，結扎左腎門血管，切除左腎，縫合切口。碘伏消毒，紅
6、霉素軟膏涂抹創(chuàng)口。術后1周，模型組按50mg/kg體重腹腔內注射2%STZ溶液，A組腹腔注射等量的枸櫞酸鈉緩沖液。72h后經尾靜脈取血，測空腹血糖高于16.7mmol/L為DM模型成功。1周后，隨機抽取兩只測尿微量白蛋白﹥15μg/ml，確定DN模型形成［5,6］。將造模成功后的43只大鼠隨機分為病理組15只（B組），通絡益腎湯治療組14只（C組），西藥治療組14只（D組）。A、B組分別給蒸餾水2ml灌胃，C組給通絡益腎湯煎液灌胃（22.3g/kg）,D組給洛汀新（1.5mg/kg）＋糖適平（10m
7、g/kg）蒸餾水混懸液灌胃。以上給藥均1次/d，共持續(xù)10周?！ ?.2觀測指標及方法24hUpr、尿β2-MG測定：治療結束后于處死前1d，代謝籠收集尿液，檢測24hUpr、尿β2-MG含量；治療結束后，腹腔麻醉下心臟采血，全自動生化分析儀檢測BUN，Scr；大鼠處死后取腎臟稱重，計算腎臟肥大指數（腎重KW/體重BW）；摘取右腎，腎組織常規(guī)石蠟包埋，切片，按α8-SMA試劑盒操作說明，免疫組化法測定α-SMA表達。 2.3資料統(tǒng)計與分析各組數據以±s表示，組間比較采用t檢驗。所有數據統(tǒng)計學處理運
8、用SPSS13.0進行分析?！ ?結果 3.1治療后各組大鼠腎功能、腎臟肥大指數的比較結果見表1。表1各組模型大鼠腎功能、腎臟肥大指數的比較（略）B組大鼠BUN、Scr、腎臟肥大指數較A組明顯增高，均有極顯著性差異（P<0.01）；與B組比較，C組、D組大鼠BUN、Scr、腎臟肥大指數明顯降低，具有極顯著性差異（P<0.01）。C、D兩組比較，上述指標無明顯差異（P＞0.05）。說明通絡益腎湯和西藥治療在改善DN大鼠腎臟肥大指數、腎功能方面有都有比較理想
