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《胎盤異鐵蛋白在受精卵著床和早期胚胎發(fā)育過程中的免疫作用機(jī)制探討》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院2000級(jí)博_I-學(xué)位論文胎盤異鐵蛋白在受精卵著床和早期胚胎發(fā)育過程中的免疫作用機(jī)制探討華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院婦產(chǎn)科博士研究生朱穎指導(dǎo)老師孫永玉教授王澤華教授摘要交二十世紀(jì)5。年代早期，Medawar(1953)首先提出‘胎兒是一種同種異體移植物’的概念，認(rèn)為在妊娠期間胎兒與母體的關(guān)系和移植物與受體的關(guān)系類似。但是胎兒明顯不同于通常的異體移植物，他能夠成功地逃避母體免疫系統(tǒng)的排斥并形成免疫耐受。母體免疫系統(tǒng)與胎兒胎盤單位間的免疫學(xué)相互作用不僅貫穿于正常妊娠的全過程，而且是多因素綜合作用的結(jié)果。過去主要從系統(tǒng)免疫狀態(tài)對(duì)母胎免疫耐受加以解釋
2、，如母胎間存在解剖屏障;胚胎組織表面不存在經(jīng)典的主要組織相容性抗原復(fù)合物〔MHC)一I類和MHC一II類抗原;孕婦保護(hù)性抑制免疫反應(yīng)增強(qiáng):外周血出現(xiàn)抗淋巴細(xì)胞抗體、封閉抗體、血清抑制因子，以及出現(xiàn)T細(xì)胞亞群變化。目前，隨著生殖醫(yī)學(xué)和免疫學(xué)的發(fā)展，母胎界面局部的特殊免疫狀態(tài)日益成為生殖免疫學(xué)研究的重點(diǎn)。在從受精開始到胚泡種植以及早期胚華中科技大學(xué)同濟(jì)K.學(xué)院2000級(jí)博士學(xué)位論文胎發(fā)育的整個(gè)圍著床期，子宮內(nèi)環(huán)境發(fā)生了一系列變化，使胚泡的發(fā)育與子宮的分化達(dá)到同步，以利于建立和維持正常妊娠，因此在圍著床期母胎之間免疫相互作用時(shí)發(fā)生的任何異常變化都會(huì)對(duì)妊娠早、中、晚期造成不同程
3、度的影響，甚至造成反復(fù)自然流產(chǎn)、妊娠高血壓綜合征、胎兒生長(zhǎng)受限、死胎等病理性妊娠結(jié)局。這些病理性妊娠不僅嚴(yán)重威脅母胎健康，而且產(chǎn)生沉重的社會(huì)負(fù)擔(dān)。因此，探討圍著床期母胎免疫耐受機(jī)制、J尸戶診對(duì)提高圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)水平具有極其重要的理論價(jià)值和臨床意義。夕近年來發(fā)現(xiàn)一種新的具有免疫調(diào)節(jié)作用的標(biāo)志物一胎盤異鐵蛋白(Placentalisoferritin>PLF?，不僅在母胎組織界面具有獨(dú)特的分布表達(dá)模式，而且其表達(dá)水平的異常與多種病理性妊娠結(jié)局有關(guān)。己有大量的臨床研究發(fā)現(xiàn)血清PLF在正至常妊娠的第”天就呈現(xiàn)高水平并隨孕周增加逐漸升高血足月時(shí)開始下降;而不全流產(chǎn)和妊娠高血壓綜合征的孕
4、婦，清PLF水平較正常妊娠者顯著降低;在體外受精一胚泡移植的孕婦中，發(fā)生早期胚胎丟失者血清PLF水平較胚胎持續(xù)存活者顯著降低，而且PLF水平降低的時(shí)間要早于0-hCG水平的下降;同時(shí)孕婦血清PLF的濃度與嬰兒出生體重、出生體重的百分?jǐn)?shù)具有很強(qiáng)的相關(guān)性。小于胎齡)L即出生體重在相同胎齡兒平均體重的第10百分位以下，或低于平均體重2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差的新生兒。根據(jù)成熟度可分為早產(chǎn)、足月產(chǎn)、過期產(chǎn)小于胎齡兒。這些孕婦的血清PLF水平較生育正常體重新生兒者顯著降低。、_少/一-華中科技大學(xué)fl'li3FrkM,2000級(jí)博f:學(xué)位論文目前，國內(nèi)外關(guān)于圍著床期PLF在母胎組織界面發(fā)揮免疫耐
5、受的確切機(jī)制和途徑尚未見報(bào)道。山于影響受精卵著床的關(guān)弄入從廠鍵因素是子宮內(nèi)膜容受性和胚胎發(fā)育質(zhì)量，因此，本從以下4個(gè)方面開展了一些創(chuàng)新性研究:，1、首次探討PLF作用下母胎組織界面免疫微環(huán)境的變化;，乙、首次探討PLF作用下子宮內(nèi)膜容受性的變化:首次探討PLF對(duì)早期胚胎發(fā)育的影響;首次探討PLF對(duì)受精卵著床的影響。第材、習(xí)扮之戶7目的一、人早孕期滋養(yǎng)層細(xì)胞對(duì)蛻膜源性巨噬細(xì)胞分泌TNF-。的作用及其與PLF的關(guān)系，了解PLF作用下的母胎界面免疫微環(huán)境的變化;二、PLF對(duì)人早孕蛻膜細(xì)胞分泌前列腺素的影響，了解PLF作用下子宮內(nèi)膜容受性的變化;三、PLF對(duì)受精卵著床和早期胚胎
6、發(fā)育過程的影響。方法一、建立正常人早孕期蛻膜巨噬細(xì)胞培養(yǎng)體系(單獨(dú)培養(yǎng)組)，分別用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法和放射免疫法(RIA)>檢測(cè)培養(yǎng)液中PLF和TNF-a水平;再將蛻膜巨噬細(xì)胞和人早孕期滋養(yǎng)層細(xì)胞共培養(yǎng)(共培養(yǎng)組)，比較培養(yǎng)液中PLF和TNF-。水平的變化:兩組細(xì)胞在PLF華中科技人學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院2000級(jí)博士學(xué)位論文單克隆抗體作用下繼續(xù)培養(yǎng)，比較培養(yǎng)液中PLF和TNF-。水平的變化;二、建立正常人早孕期蛻膜細(xì)胞體外培養(yǎng)體系，利用免疫組織細(xì)胞化學(xué)技術(shù)鑒定培養(yǎng)細(xì)胞的類型和純度;然后將其與蛻膜巨噬細(xì)胞置于不同濃度PLF培養(yǎng)基中共培養(yǎng)，利用逆轉(zhuǎn)錄酶鏈聚合反應(yīng)
7、(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR降落法)和聚丙烯凝膠電泳檢測(cè)共培養(yǎng)細(xì)胞TNF-amRNA的表達(dá)水平;利用放射免疫法(RIA)檢測(cè)培養(yǎng)液中PGF2。和PGE2水平;三、建立體外無血清小鼠胚胎種植模型，置于不同濃度PLF的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，倒置顯微鏡下觀察攝影，記錄胚胎數(shù)目并分級(jí);在大鼠雙側(cè)子宮角分別注入生理盆水和PLF或其單克隆抗體，記錄雙側(cè)著床的胚胎數(shù)和卵巢黃體數(shù)，比較胚胎著床率:結(jié)果一、共培養(yǎng)組:I培養(yǎng)液中PLF水平(48.3213.24ug/mL)較單獨(dú)培養(yǎng)組(5.2
