多基因轉(zhuǎn)化741楊及其基因表達(dá)的初步研究

《多基因轉(zhuǎn)化741楊及其基因表達(dá)的初步研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、摘要本文是在田穎川和鄭鈞寶等研究的轉(zhuǎn)雙抗蟲基因741楊基礎(chǔ)上，成功的轉(zhuǎn)化了Ri，質(zhì)粒15834菌株，并以轉(zhuǎn)雙抗蟲基因74l楊和741楊單轉(zhuǎn)Ri質(zhì)粒15834菌株為對照，研究多基因的轉(zhuǎn)化以及初步探討了多基因之間的基因表達(dá)。通過7DfD基因和刪s基因，坳fⅣ基因和Bfcw』爿c基因的PcR檢測和外部形態(tài)差異對轉(zhuǎn)多基因植株進(jìn)行鑒定，表明多基因共存于轉(zhuǎn)基因植株中。1．對轉(zhuǎn)多基因741楊各株系試管苗的生根率、根長、根量、高生長量及葉片及莖形態(tài)變異進(jìn)行研究，得出大多數(shù)轉(zhuǎn)多基因741楊表現(xiàn)出Ri質(zhì)粒轉(zhuǎn)化植物的典型特征，轉(zhuǎn)化植株的葉片均在Mso培養(yǎng)基上具有自發(fā)根的特性，形態(tài)表現(xiàn)為葉片皺縮、莖生長量減少，

2、試管苗生根率高，側(cè)根極為發(fā)達(dá)等特點(diǎn)。98％左右轉(zhuǎn)基因株系的生根率比對照植株都有明顯提高：轉(zhuǎn)多基因株系的根數(shù)量比對照都有增加，根發(fā)達(dá)，形成簇生根，多得幾乎無法計(jì)數(shù)；根長度大多數(shù)株系明顯高于對照，有少數(shù)的株系與對照植株相似，有部分株系的根長明顯短于對照；多基因轉(zhuǎn)化74l毛白楊后，引起轉(zhuǎn)化植株葉片增厚，葉面積明顯縮小，葉柄變短，葉面皺縮；莖節(jié)間縮短，茁高生長減少，分枝數(shù)量增加，個(gè)別株系出現(xiàn)莖彎曲生長，嚴(yán)重影響了苗木的正常生長，但是有少量株系的植株出現(xiàn)了正常生長的情況，甚至對生長有一定促進(jìn)作用。2．通過HPLC法對轉(zhuǎn)多基因741楊不同株系的植株葉片的內(nèi)源激素進(jìn)行了測定。幾乎所有轉(zhuǎn)多基因74l楊株

3、系中，植株葉片中內(nèi)源IAA含量均高于轉(zhuǎn)雙抗蟲基因741楊，植株生長表現(xiàn)越矮小的葉片中IAA含量越高，大部分株系比741楊單轉(zhuǎn)Ri質(zhì)粒15834菌株對照含量低。3．采用ELIsA技術(shù)，對轉(zhuǎn)多基因741楊不同株系轉(zhuǎn)基因苗和毛狀根中歷毒蛋白進(jìn)行測定，結(jié)果表明研毒蛋白在葉片和毛狀根中均有表達(dá)，葉片毒蛋白表達(dá)量明顯高于毛狀根的。轉(zhuǎn)多基因苗中不論是其葉片還是毛狀根，其毒蛋白含量大部分株系均比轉(zhuǎn)雙抗蟲基因741楊的毒蛋白含量低，比單轉(zhuǎn)Ri質(zhì)粒15834菌株的含量高。表明轉(zhuǎn)入發(fā)根農(nóng)桿菌后，其原來根癌農(nóng)桿菌毒蛋白表達(dá)含量降低了。發(fā)根農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)入對根癌農(nóng)桿菌中的毒蛋白含量有一定的影響，其增加和降低將會對組培

4、苗體內(nèi)的各個(gè)指標(biāo)有一定的影響，尤其會影響植物的生長發(fā)育。而植物激素含量恰恰是這一影響的一個(gè)具體表現(xiàn)，反過來又會影響植物的生長發(fā)育，進(jìn)而再影響到的毒蛋白殘留與降解的變化。關(guān)鍵詞：Ri質(zhì)粒；741楊；多基因轉(zhuǎn)化；形態(tài)變異；植物內(nèi)源激素；Br毒蛋白PreliminaryStudyonPolygenes’I'ansf0I。matiOnPopIar74landGenicExpressionAu世Ior：zhangshuj嗽Major：Fore8t仃eegeneticsandbr∞dingSupervis甜：P∞￡№IngMinsbe鷗A蜘lr8ctIntllissmdy，on齜base“Trmls

5、genicHyb僦Poplar741whichZhengJlHlbaoand聯(lián)an確ngchu嫩wD呔on，∞c∞ss鰓linf&fed■．硪拓Dg露趨露s嗽a王nl5834．Compar。畦謝也contml№genicHybridPoplar74landmetrallsgenicpIantletof也e一．m娩o_艄珂甜on74ichi鏘se聃彘主tepop王芒啦Studyonpo

6、ygenes靜鑫nsfo黝ed婭dpoly辮玨ese鞠孵ssion．飄ansfo黼ed黼li畦plegencs磚mtl硝etwaseon斑搬edby_Illesh印e穗越a磚融s重{e，pc殳赫《ysis(

7、r。≠D鑫矗d刎sge玨es，砌≠口a輪d露fc穢j么cge魏es)．1￡l醛eat尊p嵇lyge鞋es玨av棼al矧ybee箍eo擻b洳e畦i羲to瓤氌o￡e鬈e羥efatia玨疊8嫩let·1。Topolygenes乜ansfonnedsubclonesdep謝menttostintheti8sueelllturewhotake￡oot，∞otlengtkrootquanti覯啪糨嫩零andpheno螄em矗b鑫Var至at主。皴fese粼溉ofcarryingon．Resunindicatepoplar741con協(xié)iningpoly一仃ansgenescompar。d晰也co船o

8、l，碥el齠f塒lieh枉黼pl粥tisinMSomediHmh“eacha磚ct。ris氐of像espontaneous硒鴨f沁m