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《貴州山羊痘的病原學(xué)研究和血清學(xué)檢測》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、貴州山羊痘的病原學(xué)研究和血清學(xué)檢測摘要：2002年lO月以來貴州省8個地區(qū)養(yǎng)羊較為集中鄉(xiāng)(鎮(zhèn))相繼暴發(fā)流行一種全身皮膚、呼吸道、消化道黏膜出現(xiàn)痘疹的高度接觸性、發(fā)熱性的傳染病。通過電鏡超薄切片觀察到皮膚、黏膜痘疹：雞胚接種觀察到絨毛尿囊膜上出現(xiàn)痘斑和感染細(xì)胞可見典型痘病毒粒子。絨毛尿囊膜充血、出血、增厚及明顯痘斑等病變；感染細(xì)胞出現(xiàn)典型的細(xì)胞病變，這種病變能被山羊痘參考陽性血清抑制，由此分離出一株山羊痘野生強(qiáng)毒，命名為H—Gz。取痘疹材料接種BHK-21、Vero—E。，經(jīng)細(xì)胞傳代增殖培養(yǎng)物感染健康山羊復(fù)制出與自然病例相似的癥狀和病變．細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)硫酸銨鹽析、SephadexG-200層
2、析制各了山羊痘沉淀抗原，這種沉淀抗原能在瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)和對流免疫電泳試驗中與山羊痘參考陽性血清、山羊痘免疫血清出現(xiàn)沉淀線，所形成沉淀線能被山羊痘的參考陽性血清特異性抑制，與其他常見的動物病毒病陽性血清不發(fā)生交叉反應(yīng)。采用兔抗山羊痘高免血清提純抗體，致敏綿羊紅細(xì)胞建立反向間接血凝(RPHA)試驗，開展血清學(xué)調(diào)查，RPHA陽性檢出率為95％。通過檢測細(xì)胞培養(yǎng)物可見RPHA具有特異性，而RPHA比瓊脂擴(kuò)散試驗(AGP)敏感。關(guān)鍵詞：山羊痘病毒；電鏡觀察：細(xì)胞病變：動物感染：AGP：RPHA日l『舌山羊痘(goatpox)是由山羊痘病毒屬(capripoxvirus)山羊痘病毒(goatDoxvi
3、rus，GPV)引起的一種呈地方流行的高度接觸性傳染病。本病在世界范圍內(nèi)流行已有很長的歷史，一年四季均可發(fā)生，但春秋常見，不分性別、年齡、品種。主要分布在北非、中非、印度次大陸和西南亞?，特別是養(yǎng)羊業(yè)作為重要農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)成分的地區(qū)。山羊痘被國際獸疫局(OIE)列為A類重大傳染病，1999年中華人民共和國農(nóng)業(yè)部第96號公告將山羊痘列為國家一類動物疫病。近年來，我國的廣東Ⅲ、浙江Ⅲ湖南Ⅲ、山東㈨、四川?、廣西m、貴州Ⅲ、云南㈨、內(nèi)蒙古?1、福建?1、江蘇n21、河北m1、甘肅?3、吉林n51、江西n61、湖北m1、上?！?“、遼寧m1、黑龍江。”、安徽。o等二十多個省市相繼報導(dǎo)山羊痘發(fā)生流行
4、，給養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展造成了極大的損失，特別是對西部地區(qū)蓬勃興起的山羊養(yǎng)殖業(yè)帶來了嚴(yán)峻的威脅。本病在貴州省屬首次暴發(fā)流行，2002年10月以來，我省修文、鎮(zhèn)遠(yuǎn)、銅仁、晴隆、遵義、德江、沿河和六盤水8個地區(qū)”21養(yǎng)羊較為集中的鄉(xiāng)(鎮(zhèn))相繼暴發(fā)流行一種全身皮膚出現(xiàn)痘疹的高度接觸性、發(fā)熱性傳染病。主要表現(xiàn)為體溫升高達(dá)40℃以上，食欲減退乃至廢絕，精神萎頓，眼結(jié)膜潮紅、流淚，鼻和眼流膿性分泌物。潛伏期為1～2周，大部分病羊在眼周圍、唇、鼻、頰、腹部和尾內(nèi)側(cè)出現(xiàn)大小不等的紅疹，嚴(yán)重時波及全身皮膚和部分內(nèi)臟器官，1～4d后形成小的丘疹突出于皮膚和內(nèi)臟器官表面，并逐漸擴(kuò)大為灰白色硬結(jié)和丘疹一水皰型，后者幾天
5、后轉(zhuǎn)為水皰，水皰破潰后形成痂塊，最后痂塊脫落遺留白色的痕跡。本病從外地引入帶毒羊后，陸續(xù)發(fā)病并很快蔓延至全群。成年羊發(fā)病率和死亡率較高，孕羊大多流產(chǎn)或產(chǎn)弱羔，羔羊比成年羊易感。根據(jù)臨床癥狀和剖檢病變可對山羊痘作出假定性診斷，確診必須依賴于實驗室檢查。山羊痘病毒感染以后抗體反應(yīng)水平較低，血清學(xué)診斷的應(yīng)用受到一定限制““。通過“中文科技期刊數(shù)據(jù)庫檢索”查詢自1989年以來全國的獸醫(yī)類主要期刊，關(guān)于山羊痘的文獻(xiàn)共133篇。國內(nèi)學(xué)者主要依據(jù)臨床癥狀和剖檢病變對山羊痘進(jìn)行診斷(83／i33，62．4％)；采用電鏡觀察病毒粒子的形態(tài)特征(5／133，3．76％)；接種雞胚絨毛尿囊膜觀察形成的痘斑(4
6、／133，3．01％)。國外學(xué)者采用可溶性抗原對診斷山羊痘的瓊脂擴(kuò)散試驗(AGP)、乳膠凝集試驗(LA)和反向問4接血凝試驗(RPHA)j{￡彳于了評價”“；采用可溶性抗原制備高免山羊血清對Dot—ELISA和RPHA的檢測效果進(jìn)行了比較。?。近年來在山羊痘的研究工作中，國內(nèi)很少報導(dǎo)病毒分離與鑒定的內(nèi)容，對山羊痘研究多采用雞胚接種、犢牛睪丸原代細(xì)胞培養(yǎng)物通過電鏡觀察。本研究從以下幾個方面進(jìn)行：①分別取患病山羊皮膚和瘤胃粘膜痘疹、雞胚絨毛尿囊出現(xiàn)的痘斑、病毒感染細(xì)胞培養(yǎng)物為材料，按常規(guī)方法作超薄切片，電鏡觀察發(fā)現(xiàn)大量具有典型痘病毒形態(tài)征病毒粒子。②痘疹材料接種雞胚絨毛尿囊膜，感染雞胚可見胚
7、體充血、出血、絨毛尿囊膜增厚且在接種部位出現(xiàn)痘斑。在BHK一21、Veto—E。傳代細(xì)胞上接種痘疹材料以后觀察到感染細(xì)胞收縮、變圓、聚集成簇、形成拉網(wǎng)狀的細(xì)胞病交效應(yīng)，由中國獸藥監(jiān)察所提供的山羊痘參考血清能夠抑制這種細(xì)胞病變效應(yīng)。通過BHK：．、Vero—Ea傳代細(xì)胞從晴隆送檢的病料中分離出1株貴州山羊痘流行毒株命名H—Gz毒株?！埃簭膬?nèi)蒙古生物藥品廠的活疫苗分離出1株山羊痘疫苗毒株．③將病毒感染細(xì)胞培養(yǎng)物人工接種健康山羊，復(fù)制出與
