布魯氏菌病原學(xué)血清學(xué)診斷課件

布魯氏菌病原學(xué)血清學(xué)診斷課件

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1、布魯氏菌病原學(xué)、血清學(xué)診斷麗水市疾病預(yù)防控制中心蘭進(jìn)權(quán)主要內(nèi)容:1、布魯氏菌病原學(xué);2、布魯氏菌診斷標(biāo)準(zhǔn);3、布魯氏菌血清學(xué)實(shí)驗的幾種方法。(一)布氏菌概述1887年英國醫(yī)生布魯氏首先從死于“馬爾他熱”的英國士兵脾臟中分離出羊種布氏菌后,布魯氏菌屬(Brucella),包括6個種19個生物型。羊種布氏菌(Brmelitensis)牛種布氏菌(Brabortus)豬種布氏菌(Brsuis)沙漠森林野鼠種布氏菌(Brneotomae)綿羊附睪種布氏菌(Brovis)犬種布氏菌(Brcanis)布魯氏菌

2、的發(fā)展史年份菌名發(fā)現(xiàn)人國家宿主1887羊種菌Bruce馬爾他羊1897牛種菌Bang丹麥牛1914豬種菌Traun美國豬1953綿羊附睪種菌Buadle新西蘭公綿羊1956沙漠森林鼠種菌Stoennen美國沙漠森林野鼠1966犬種菌Carmichael美國小獵犬(一)病原學(xué)概述布魯氏菌屬(Brucella)包括6個種19個生物型。牛種布氏菌(Brabortus):1、2、3、4、5、6、7、9型羊種布氏菌(Brmelitensis):1、2、3型豬種布氏菌(Brsuis):1、2、3、4、5型沙漠森林野鼠種布氏菌(Br

3、neotomae)綿羊附睪種布氏菌(Brovis)犬種布氏菌(Brcanis)1、形態(tài)布魯氏菌是一組微小的球狀、球桿狀、短桿狀細(xì)菌;寬約0.3—0.5微米、長0.6—1.5微米。電鏡下見到的羊種菌為明顯的球桿狀、牛種菌和豬種菌為短桿狀;6種布魯氏菌靠形態(tài)很難區(qū)分,一般來說,羊種菌最小,牛種菌產(chǎn)次之,豬種菌較大;布魯氏菌沒有鞭毛,不形成芽胞和夾膜。2、染色涂片染色檢查多為單個排列,少見成對短鏈排列。布魯氏菌可被堿性染料著色;革蘭染色陰性;柯茲羅夫斯基提出用0.5%沙黃水溶液染色,加熱出現(xiàn)氣泡,水洗后用0.5%孔雀綠或1%

4、美蘭復(fù)染,布魯氏菌呈紅色,其它細(xì)菌呈綠色和蘭色。布魯氏菌:革蘭陰性,長約0.6-1.5μm,寬約0.3-0.6μm,用柯氏染色染成紅色,無鞭毛、不形成芽胞和莢膜。3、培養(yǎng)特性1.布魯氏菌培養(yǎng)營養(yǎng)要求高:需要各種氨基酸和各種金屬離子,有的菌種需要血清才能生長。2.生長緩慢:一般需經(jīng)4—6天,有的甚至21—30天才能長出菌落。3.生長所需溫度:20—40℃,最適為37℃,超過42℃則不生長。4.C02:綿羊附睪種菌和牛種菌的某些生物型菌需嚴(yán)格的C02(5~10%)。(4)細(xì)菌變異布氏菌在各種理化因素作用下易發(fā)生變異;即從光

5、滑型(S)變?yōu)榉枪饣汀植?R)或粘液(M)狀。變異菌落常比光滑型稍長,表面有顆粒。菌落顏色為灰白色或褐色,(5)抵抗力布氏菌在合適條件下能生存很長時間,有較高的抗滅活能力。對濕熱、紫外線和各種射線以及常用的消毒劑、抗生素、化學(xué)藥物比較敏感;對低溫和干燥有較強(qiáng)的抵抗力,故可用冷凍真空干燥法保存菌種。布氏菌在自然條件下的生存能力自然條件生存時間(天)自然條件生存時間(天)水50—120奶油25—65塵4—120奶酪21—90糞21—72凍肉14—47畜舍墻棚4—150腌肉20—45地面4—150培養(yǎng)基60—318衣

6、服30—80干燥胎膜120皮毛45—120腐敗臟器死亡鮮牛乳2—550人工胃液20—50(1)對物理因子的抵抗力物理因子對布氏菌的影響物理因子生存時間物理因子生存時間濕熱56℃60分鐘以上干熱80℃60分鐘以上濕熱63℃60分鐘以上干熱90℃60分鐘以上濕熱80℃30分鐘以上干熱100℃7分鐘以上濕熱90℃10分鐘以上直射陽光1~4小時濕熱100℃半分鐘死亡散射陽光7~8天(2)對化學(xué)因子的抵抗力化學(xué)因子對布氏菌的影響藥物名稱濃度(%)生存時間藥物名稱濃度(%)生存時間新潔爾滅0.130秒

7、鐘漂白粉0.2~2.52分鐘以內(nèi)石炭酸1~21~5分鐘紅汞27分鐘來蘇兒21~3分鐘過錳酸鉀0.1~0.27~15分鐘來蘇兒31分鐘以內(nèi)甲醛0.220分鐘以上氯亞明0.25~7分鐘乳酸0.51分鐘以內(nèi)氯亞明0.53~5分鐘氫氧化鉀23分鐘升汞0.051分鐘以內(nèi)肥皂220分鐘以上主要化學(xué)藥品對三型菌的影響──────────────────濃度布魯氏菌生存時間(分鐘)化學(xué)藥品名稱──────────────(%)羊型牛型豬型─────────────────

8、─石碳酸1≤5≤3≤5石碳酸2121來蘇兒2≤3≤1≤3來蘇兒3瞬間瞬間瞬間漂白粉澄清液0.21-2瞬間瞬間漂白粉乳劑2.51-2瞬間瞬間肥皂水2≥20≥20≥20─────────────────────────────(二)布魯氏菌分離培養(yǎng)采用何種方法、取何種材料、何種培養(yǎng)基實(shí)驗室條件布氏菌的分離培養(yǎng)一、從可疑病人分離布氏菌血

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