高脂高膽固醇飲食喂養(yǎng)的apoELDLR小鼠肝臟脂代謝相關(guān)基因的表達(dá)研究

高脂高膽固醇飲食喂養(yǎng)的apoELDLR小鼠肝臟脂代謝相關(guān)基因的表達(dá)研究

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1、山東師范人學(xué)碩十學(xué)位論文摘要隨著人們的飲食條件和飲食結(jié)構(gòu)不斷發(fā)生變化,飲食中動物性油脂及膽固醇等脂類物質(zhì)對人體健康的影響越來越受到人們的關(guān)注。肝臟是研究脂代謝的重要靶器官,它是內(nèi)源性和外源性脂代謝途徑的交匯點(diǎn)及調(diào)節(jié)中心,能夠合成、釋放各種脂蛋白及脂代謝酶類,在維持脂代謝平衡中發(fā)揮著重要作用。飲食中的動物性油脂及膽固醇可通過對體內(nèi)脂代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響進(jìn)一步影響血脂代謝及肝臟中的脂質(zhì)代謝,從而引起體內(nèi)的脂質(zhì)代謝紊亂。脂代謝紊亂會導(dǎo)致體內(nèi)出現(xiàn)高脂血癥,例如高膽固醇血癥和高甘油三酯血癥等,對心血管疾病的發(fā)生起到一

2、定的促進(jìn)作用。心血管疾病嚴(yán)重威脅著人類的健康,由其導(dǎo)致的死亡率呈逐年上升且年輕化的趨勢,動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是其病理生理基礎(chǔ)。關(guān)于AS的發(fā)病機(jī)制存在多種學(xué)說,主要是由多種因素引起脂代謝紊亂學(xué)說,而在機(jī)體內(nèi)與脂代謝相關(guān)的基因、外界環(huán)境調(diào)節(jié)的刺激以及內(nèi)外因素的相互影響共同參與并促進(jìn)了AS發(fā)生發(fā)展,因此闡明飲食尤其是富含高脂高膽固醇的飲食對影響血脂代謝及肝臟脂代謝的相關(guān)基因以及研究這些基因之間的相互作用機(jī)理,將有助于人們真正弄清脂代謝紊亂引起的AS的發(fā)生機(jī)制和病理生理特點(diǎn),為預(yù)防和治

3、療用藥物的開發(fā)、飲食防治與治療策略的制定提供理論依據(jù)。目前,國內(nèi)外對AS發(fā)病前期和早期的脂代謝相關(guān)基因表達(dá)變化報道不多,多局限在脂代謝相關(guān)基因的敲除、抑制或過表達(dá)后對AS的影響上,對幼齡載脂蛋白E(apolipoproteinE,apoE)和低密度脂蛋白受體(10wdensitylipoproteinreceptor,LDLR)缺失(apoE一。/LDLR一。)小鼠輔以不同飲食來研究其肝臟脂代謝相關(guān)基因變化的研究報道更為有限。本實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)典的AS小鼠模型,研究了在apoE、LDLR雙基因缺失及高脂高膽固醇飲食

4、條件下,基因與基因及基因與環(huán)境間的相互作用對血脂變化、主動脈根部和肝組織病理形態(tài)改變,以及對肝臟組織重要基因表達(dá)變化規(guī)律的影響,并分析了上述變化與高脂血癥乃至AS發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,為AS發(fā)病機(jī)制的研究及AS飲食防治、藥物開發(fā)提供理論依據(jù)和研究平臺。本實(shí)驗(yàn)利用半定量RT-PCR和熒光實(shí)時定量RT-PCR技術(shù),分析3、4、8和12周齡不同飲食(高脂高膽固醇飲食或普通飲食)喂養(yǎng)的apoE一-/LDLR√。小鼠與相同遺傳背景的同齡野生型(widetype,WT)小鼠肝臟脂代謝相關(guān)基因PPARa、LXRa以及這些基因的靶

5、基因的表達(dá)特征,并進(jìn)行血生化指標(biāo)及主動脈和肝臟病理形態(tài)學(xué)檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文1)脂蛋白脂酶(1ipoproteinlipase,LPL)是水解甘油三酯(triglyceride,TG)的關(guān)鍵酶,血管生成素樣蛋白3(angiopoietin.1ikeprotein3,Angptl3)和載脂蛋白AV(apolipoproteinAV,apoAV)對LPL的活性分別起到抑制和激活作用。從4周齡開始,高脂高膽固醇飲食條件下的apoE√-/LDLR^小鼠肝臟Angptl3的表達(dá)量明顯高于普通飲食

6、下的表達(dá)量(尸

7、rclassBI,SR.BI)、載脂蛋白AI(apolipoproteinAI,apoAI)和載脂蛋白AIV(apolipoproteinAIV,印oAIV)在膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)過程中發(fā)揮重要作用。從4周齡開始,高脂高膽固醇飲食喂養(yǎng)的apoE'/'/LDLR4小鼠apoF表達(dá)量顯著低于普通飲食喂養(yǎng)的雙基因缺失小鼠(尸

8、gerreceptorclassBI,SR.BI)的表達(dá)量在12周齡時顯著低于普通飲食的雙基因缺失小鼠(P

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