力學(xué)應(yīng)變對(duì)去勢(shì)骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化能力的影響

力學(xué)應(yīng)變對(duì)去勢(shì)骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化能力的影響

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1、四川大學(xué)碩士學(xué)位論文主要縮略語(yǔ)中英文對(duì)照(按字母順序排列)英文縮寫英文全稱中文名稱腳Alkalinephosphatase堿性磷酸酶CbfalCorebmdingfactoralphal核心編碼因子oCOLICollagenll型膠原DAB3,3’一diaminobenzidine3.,一二氨基聯(lián)苯胺DEPCDiethtylpyrocarbonate焦炭酸二乙脂DMEMDulbecco'smodifiedeaglemediumDMEM培養(yǎng)基EINADeoxyribonucleicacid脫氧核糖核酸EBEthidiumbromide溴化乙錠EDTAEthylen

2、ediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸F-actinF-actinmicrofilamentF-肌動(dòng)蛋白微絲R:MFIowcytometry流式細(xì)胞術(shù)FBSFetalboyineserum胎牛血清GAPDHGlyceraldehydephosphatedehydrogenase磷酸甘油醛脫氫酶HEPESHyoroxyethylpiperazineethanesulfonicacid羥乙基哌嗪乙磺酸LPLLipoproteinlipase脂蛋白脂酶MSCsMesenchymalstemcells骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞OCN0steocalcin骨鈣素

3、OPN0steopotin骨橋蛋白OVXOvariectomy卵巢切除術(shù)ORXOrchcctomy睪丸切除術(shù)PBSPhosphalebufferedsaline磷酸鹽緩沖液PcRPolymerasechainreaction聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)n’Proliferationindex增殖指數(shù)PPARP目oxisomeproliferatoractivatedreceptor過(guò)氧化物酶增殖子激活受體唧Pa珀mv∞idhormone甲狀旁腺激素RNARibonucleicacid核糖核酸RT-PCRReversetr刪ptionPCR逆轉(zhuǎn)錄PcR四川大學(xué)碩士學(xué)位論文論文摘

4、要力學(xué)應(yīng)變對(duì)去勢(shì)骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化能力的影響生物醫(yī)學(xué)工程專業(yè)研究生:井燕指導(dǎo)老師:李良力學(xué)負(fù)荷可促進(jìn)骨組織生長(zhǎng)發(fā)育,維持骨結(jié)構(gòu)的完整性和功能。長(zhǎng)期以來(lái)已經(jīng)認(rèn)識(shí)到力學(xué)負(fù)荷在骨質(zhì)疏松的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有重要的作用。大量流行病學(xué)證據(jù)提出,體育鍛煉有利于提高峰值骨量和增加骨的強(qiáng)度和彈性,延遲骨質(zhì)疏松的進(jìn)展和預(yù)防骨質(zhì)疏松性骨量丟失和骨折。骨質(zhì)疏松是一種全身性的、代謝性的骨骼系統(tǒng)疾病。由于成骨細(xì)胞的功能活性降低和破骨細(xì)胞的功能活性增高,致使骨形成和骨吸收失平衡,導(dǎo)致凈骨量丟失,易于骨折。成骨細(xì)胞來(lái)源于多潛能骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymalstemcel

5、ls。MSCs)。成骨細(xì)胞功能活性的改變除了與成骨細(xì)胞數(shù)量、成骨細(xì)胞本身存活期有關(guān)外,其前體成骨細(xì)胞數(shù)量與功能活性也起到重要作用。MSCs具有干細(xì)胞的共性,即具有自我復(fù)制和多向分化能力,體外不同誘導(dǎo)條件下,能夠向成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、肌腱細(xì)胞、脂肪細(xì)胞及基質(zhì)細(xì)胞等不同的細(xì)胞系分化。近期有研究發(fā)現(xiàn)骨質(zhì)疏松癥引起的骨量減少往往與骨髓中的脂肪組織增多相伴行,但是有關(guān)細(xì)胞學(xué)機(jī)制還不十分清楚。我們近期的研究也發(fā)現(xiàn),在大鼠骨質(zhì)疏松模型中,MSCs的成骨分化能力降低,成脂分化能力明顯增高。目前,有關(guān)骨細(xì)胞與力學(xué)作用的實(shí)驗(yàn)研究,多采用原代成骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞株等進(jìn)行。而有關(guān)力學(xué)應(yīng)

6、變對(duì)成骨細(xì)胞前體細(xì)胞一MSCs作用的研究較少,尚未見(jiàn)有關(guān)力學(xué)應(yīng)變對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠MSCs成骨分化能力影響的相關(guān)研究報(bào)道。因此,我們假設(shè)力學(xué)應(yīng)變可以促進(jìn)MSCs的成骨分化能力,抑制其成脂分化能力。本研究的目的就是觀察力學(xué)應(yīng)變對(duì)去勢(shì)骨質(zhì)疏松(去卵巢和去睪丸)大鼠與正常大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響,為骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的細(xì)胞學(xué)機(jī)制提供新的佐證。2四川I大學(xué)碩士學(xué)位論文選用健康6月齡Sprague.Dawley(SD)大鼠,采用雙側(cè)卵巢或者雙側(cè)睪丸切除術(shù),建立骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分成4組:雌性對(duì)照組(Contr01.1)、卵巢切除組(OⅥ()、雄性對(duì)照組(Cont

7、r01.2)、睪丸切除組(ogx)。手術(shù)后3個(gè)月,檢測(cè)動(dòng)物體重、子宮及睪丸重量;做骨組織形態(tài)學(xué)切片,觀察骨組織形態(tài)和骨細(xì)胞功能活性的變化,以確定模型建立成功。采用密度梯度離心法獲取大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Mcscnchymalstemcells,MSCs),用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面抗原CD44/CD45分子的表達(dá)。采用本室自制的雙軸力學(xué)應(yīng)變加載系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞旌加大小為4000/zstrain,頻率為l赫茲的力學(xué)應(yīng)變。每天加載3次,每次2小時(shí),間隔2小時(shí)。力學(xué)實(shí)驗(yàn)分為:(1)加力1天組:用該系統(tǒng)加力1天;(2)靜態(tài)培養(yǎng)I天組:不加力學(xué)應(yīng)變,與(1)培養(yǎng)相同時(shí)間;(3)加

8、力3天組:用該系統(tǒng)加力3

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