骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究

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1、廣州醫(yī)學院碩士學位論文骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究廣州醫(yī)學院碩士學位論文骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究TheStudyofBoneMarrowMesenchymalStemCellsRemedytheOsteoporosisoftheOvariectomizedRats碩士研究生：余博臣導師：高梁斌教授專業(yè)：脊柱外科廣州醫(yī)學院2012年5月2廣州醫(yī)學院碩士學位論文骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究目錄中文摘要…………………………………………………………

2、……………………1英文摘要………………………………………………………………………………3前言……………………………………………………………………………………5第一部分大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)與誘導成骨分化及鑒定………………..8材料與方法…………………………………………………………………………9結(jié)果………………………………………………………………………………..12討論………………………………………………………………………………..14結(jié)論…………………………………………………………………………

3、……..18第二部分骨髓間充質(zhì)干細胞治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究……………………19材料與方法………………………………………………………………………..20結(jié)果………………………………………………………………………………..24討論………………………………………………………………………………..29結(jié)論………………………………………………………………………………..34參考文獻……………………………………………………………………………..36文獻綜述…………………………………………………………………

4、…………..39攻讀學位期間主要研究成果………………………………………………………..52致謝…………………………………………………………………………………..53學位論文原創(chuàng)性聲明………………………………………………………………..54學位論文知識產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明………………………………………………………..54關于學位論文使用授權(quán)的說明……………………………………………………..543廣州醫(yī)學院碩士學位論文骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究縮略語簡表BMSCsBonemarrowmes

5、enchymalstemcells骨髓間充質(zhì)干細胞BMDBonemineraldensity骨密度OPOsteoporosis骨質(zhì)疏松癥POPPrimaryosteoporosis原發(fā)性骨質(zhì)疏松SOPSecondaryosteoporosis繼發(fā)性骨質(zhì)疏松MMAMethylmethacrylate甲基丙烯酸甲酯DBPDibutylphthalate鄰苯二甲酸二丁酯BPOBenzoylperoxide無水過氧化苯甲酰4廣州醫(yī)學院碩士學位論文骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究骨髓間充質(zhì)干細

6、胞移植治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究碩士研究生：余博臣導師：高梁斌教授專業(yè)：脊柱外科中文摘要第一部分大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)與誘導成骨分化及鑒定摘要背景：骨髓間充質(zhì)干細胞具有多向分化潛能，但在骨髓中含量極低，收集足夠數(shù)量的骨髓間充質(zhì)干細胞，對組織工程及細胞的體內(nèi)、外實驗至關重要。目的：通過體外獲取和培養(yǎng)純度高、生物特性均一的骨髓間充質(zhì)干細胞，并向成骨誘導分化，為后續(xù)實驗做準備。方法：通過全骨髓貼壁法分離、培養(yǎng)、純化大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞，進行形態(tài)學觀察，流式細胞儀檢測細胞表面標記物，鑒定后將所有骨髓間

7、充質(zhì)干細胞向成骨誘導分化。結(jié)果：大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞生長以梭形細胞為主，呈放射狀排列的細胞集落，可連續(xù)穩(wěn)定傳代6代以上。第3代骨髓間充質(zhì)干細胞CD44呈陽性表達，而CD45呈陰性。成骨誘導后，經(jīng)茜素紅染色8結(jié)果為陽性。所得細胞總數(shù)為2.0×10個，純度達99.27%。結(jié)論：全骨髓貼壁培養(yǎng)法操作簡單，可大量分離、純化、擴增骨髓間充質(zhì)干細胞，所獲細胞具有間充質(zhì)干細胞的一般生物學特性，經(jīng)誘導培養(yǎng)后向成骨誘導分化，可為后續(xù)實驗提供基礎。關鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細胞；培養(yǎng)；形態(tài)學；成骨分化5廣州醫(yī)學院碩士學位論

8、文骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究第二部分骨髓間充質(zhì)干細胞治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究摘要目的：探討去勢骨質(zhì)疏松大鼠股骨骨髓腔注入骨髓間充質(zhì)干細胞對股骨骨密度、生物力學及骨微結(jié)構(gòu)的影響。方法：將32只六月齡雌性SD大鼠隨機分為：假切（Sham）對照組12只和骨質(zhì)疏松組20只，雙側(cè)卵巢切除術(shù)后3個月兩組各隨機取4只大鼠處死后測股骨骨密度，再將骨質(zhì)疏松組隨機分成單純?nèi)荩∣VX）組及去勢+骨髓間充質(zhì)干細胞組（OVX+MSC）組各8只，OVX+MSC組大鼠雙側(cè)股骨骨髓腔注入誘