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《小白菊內(nèi)酯對乳腺癌細(xì)胞自噬與凋亡作用影響的實驗研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、密級碩士學(xué)位論文小白菊內(nèi)酯對乳腺癌細(xì)胞自噬與凋亡作用影響的實驗研究作者姓名：韓言言指導(dǎo)教師：李連宏學(xué)科專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)大連醫(yī)科大學(xué)大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄一、摘要……………………………………………………..……………1（一）中文摘要……………………..…………………………………1（二）英文摘要………………………….……………………………3二、正文…………………………………….……………………………6（一）前言……………………………….……………………………6（
2、二）材料和方法………………………….………………………….8（三）結(jié)果……………………………………………………………16（四）討論……………………………………………………………24（五）結(jié)論……………………………………………………………27（六）參考文獻………………………………………………………28三、綜述…………………………………………………….…………31（一）綜述……………………………………………….…………31（二）參考文獻……………………………………………...…….…41四、攻讀攻讀學(xué)位期間
3、發(fā)表文章情況………………………………..48五、致謝……………………………………………...…….…………..49大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文小白菊內(nèi)酯對乳腺癌細(xì)胞自噬與凋亡作用影響的實驗研究摘要研究背景與目的：乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，是女性癌癥死亡的最主要的原因。目前在乳腺癌治療方面，手術(shù)治療，化學(xué)藥物治療，放射性治療及靶向治療都取得了很大的進步。但是乳腺癌仍是影響女性健康的非常重要的原因。尋找新的治療手段和作用機制仍是十分重要的。在藥物研究中，倍半萜內(nèi)酯類化合物非常的受到關(guān)注，它們呈現(xiàn)出一系列
4、的生物學(xué)活性，如抗癌，抗炎，抗菌，抗氧化等。而小白菊內(nèi)酯是從菊科植物中提取的倍半萜內(nèi)酯類化合物。許多年來，該植物主要用于治療發(fā)熱，頭痛，關(guān)節(jié)炎等疾病。近幾年，研究發(fā)現(xiàn)，從菊科植物中提取的倍半萜內(nèi)酯類化合物，小白菊內(nèi)酯對各種腫瘤都有一定的治療作用，如胰腺癌，前列腺癌，結(jié)腸癌，黑素瘤，膽管癌。同樣地，相關(guān)研究也已表明小白菊內(nèi)酯可抑制乳腺癌的進展。但具體的作用機制仍需探討。自噬是被稱為第二種細(xì)胞程序性的死亡途徑，與凋亡有所不同。自噬可以通過溶酶體消除細(xì)胞內(nèi)的器官和蛋白。通常情況下，自噬水平是比較低的，只有在受
5、到刺激或營養(yǎng)缺乏等條件下，自噬水平升高。對于維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，自噬過程是十分重要的。自噬過程如果無法發(fā)生，損傷的蛋白，器官無法消除而積累，正常的組織和器官則會處于有毒性的環(huán)境中，而影響其正常存活。細(xì)胞內(nèi)大多數(shù)蛋白都受自噬途徑的影響，是維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的一個非常重要的機制。自噬在癌癥中所扮演的角色是非常復(fù)雜的?，F(xiàn)在研究認(rèn)為自噬是一把“雙刃劍”。腫瘤細(xì)胞通過自噬以適應(yīng)各種存活壓力，如癌基因、缺氧、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、腫瘤微環(huán)境、藥物作用等。另一方面，自噬過度激活也會引起細(xì)胞發(fā)生程序性死亡?；诖松涎芯勘尘埃接懶“拙?/p>
6、內(nèi)酯是否可引起自噬以及所引起的自噬相關(guān)作用機制對于此種新型藥物對乳腺癌的影響是非常重要的。在乳腺癌細(xì)胞中，小白菊內(nèi)酯可引起乳腺癌細(xì)胞的自噬和凋亡的過程。研究指出抗癌藥物所引起的自噬過程可產(chǎn)生保護性的作用機制?；诖?，小白菊內(nèi)酯所引起的自噬過程的作用機制需要進一步驗證，對于尋找新的治療機制是非常重要的。方法:在本論文中，我們主要通過采用CCK-8實驗測定小白菊內(nèi)酯的IC50劑量。采用集落形成實驗測定小白菊內(nèi)酯對乳腺癌細(xì)胞的抑制作用。采用免疫熒光和自噬小體的形成來驗證自噬過程的產(chǎn)生。采用流式細(xì)胞儀技術(shù)來驗證
7、細(xì)胞凋1大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文亡的發(fā)生。采用westernblot技術(shù)證實小白菊內(nèi)酯所引起自噬和凋亡過程的作用機制，觀察PI3K,AKT,phosphorylationofAKT,mTOR,ATG13,ATG14的表達情況。同樣地，可以通過westernblot技術(shù)在蛋白水平上探討B(tài)cl-2,Caspase-3,P62,和Beclin1的表達情況。RT-qPCR在基因水平上觀察ATG13,ATG14的表達情況。結(jié)果：1.CCK-8實驗檢測小白菊內(nèi)酯對乳腺癌細(xì)胞的增殖影響結(jié)果如下：其24h對MCF-7細(xì)
8、胞的抑制生長率為96%，89.1%，80.1%，62.5%，47.3%，36.6%，29.5%，48h的抑制生長率為90.6%，80.0%，66.3%，45.2%，34.5%，25.4%，18.7%。相比較之下，對MDA-MB-231細(xì)胞的抑制生長率就比較弱些，24h的為96.3%，90.0%，81.3%，65.9%，50.9%，38.3%，30.1%，48h的抑制生長率為89.4%，79.8%，67.3%，49.6%，34.2%，24.6
