化學(xué)發(fā)光適體傳感器在食品污染物檢測中的應(yīng)用研究

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1、分類號：密級：ＵＤＣ：學(xué)號：４０７４３１３１５０２２南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文化學(xué)發(fā)光適體傳感器在食品污染物檢測中的應(yīng)用研究ＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＡｌｉｃａｔｉｏｎｉｎＣｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔＡｔａｓｅｎｓｏｒｓｉｎＦｏｏｄｐｐｐＣｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎＤｅｔｅｃｔｉｏｎ李素培養(yǎng)單位（院、系）：資源環(huán)境與化工學(xué)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：嚴(yán)喜鸞副教授＾申請學(xué)位的學(xué)科門類：工學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：化學(xué)工程與技術(shù)論文答辯日期：２０１８年月日答辯委員會(huì)主席＿評閱人：２０１８年月日

2、摘要摘要食品污染物嚴(yán)重的威脅著人類的身體健康，同時(shí)食品安全問題也引起了越來越多的關(guān)注，對食品污染物的檢測是十分必要的，尋找更靈敏、更快捷、更方便的食品污染物檢測方法是迫在眉睫的事情。本文構(gòu)建適體傳感器利用化學(xué)發(fā)光法檢測食品中的污染物。主要檢測的物質(zhì)是食品中的真菌毒素赭曲霉毒素A(OchratoxinA，OTA)、食品中殘留的抗生素氯霉素(Chloramphenicol，CAP)以及食品中污染細(xì)菌體內(nèi)的三磷酸腺苷(Adenosinetriphosphate，ATP)。(1)高效液相色譜法結(jié)合熒光檢測器檢測OTA主要利用高效液相色譜法結(jié)合熒光檢測器(HPL

3、C-FLD)檢測OTA，首先用HPLC面積歸一化法對OTA的標(biāo)準(zhǔn)品建立峰面積（μV）與OTA濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過C18固相萃取小柱對經(jīng)過前處理啤酒中加標(biāo)OTA樣品進(jìn)行純化提取，進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明：峰面積和OTA濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，最低檢測限為0.1ng/mL，平均的回收率在98.3%~102.1%之間，具有良好的精密度和靈敏度。(2)金標(biāo)記羥胺放大化學(xué)發(fā)光檢測OTA利用納米金催化魯米諾化學(xué)發(fā)光體系起到增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光信號的作用，建立納米金-適體生物傳感器，以及NH2OH/HAuCl4對傳感器具有放大作用，從而對OTA進(jìn)行間接的定量檢測。在優(yōu)化的條件

4、下，建立化學(xué)發(fā)光值和OTA濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，同時(shí)對生物傳感器進(jìn)行了特異性考察，最后將生物傳感器用來檢測加標(biāo)啤酒和谷物玉米中的OTA。結(jié)果表明：化學(xué)發(fā)光值(△CL)和OTA濃度呈現(xiàn)良-3好的線性關(guān)系，最低檢測限為1.58×10ng/mL，而且生物傳感器的特異性強(qiáng)，平均的回收率在95.9%~107.7%之間。相比第二章的HPLC法檢測OTA，本實(shí)驗(yàn)方法的線性范圍和最低檢測限都優(yōu)于HPLC，且本實(shí)驗(yàn)方法中實(shí)際的食品樣品前處理比較簡單，節(jié)約了大量的時(shí)間和成本。(3)基于適體傳感器無標(biāo)記化學(xué)發(fā)光同時(shí)檢測ATP和CAP本實(shí)驗(yàn)利用羧基磁性微球和羧基聚苯乙烯微球建立ATP

5、/CAP適體傳感器，用于ATP/CAP混合物的檢測。同時(shí)對ATP/CAP適體傳感器進(jìn)行了特異性考察，最后將ATP/CAP適體傳感器應(yīng)用于加標(biāo)牛奶和啤酒中的ATP和CAP檢測。結(jié)果表明：化學(xué)發(fā)光值(△CL)和ATP和CAP濃度都呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，ATP和I摘要-8-8CAP的最低檢測限為3.76×10mol/L和2.48×10mol/L。本方法對ATP和CAP具有較強(qiáng)的特異性，平均加標(biāo)回收率在95.1%~106.3%之間。關(guān)鍵詞：食品污染物；納米金；適體傳感器；化學(xué)發(fā)光IIAbstractAbstractThefoodcontaminantshavese

6、riousthreatentohumanhealth,atthesametime,foodsafetyissueshavegotmoreandmoreattention.Itisnecessarytodetectthefoodcontaminants.Findingmoresensitive,faster,andmoreconvenientdetectionmethodsoffoodcontaminantsisanimminenttask.Wedesignedtheaptasensorsfordetectionoffoodcontaminantsbych

7、emiluminescence(CL).ThemaindetectedsubstanceisOchratoxinA(OTA)whichisamycotoxininfood,Chloramphenicol(CAP),whichisaresidualantibioticinfood,andAdenosinetriphosphate(ATP)whichisinthevivoofcontaminatedbacteriainfood.(1)HighPerformanceLiquidChromatographywithFluorescenceDetectorford

8、etectingOTAInthispart,wedetectedOTAbyHig