基于適體技術(shù)化學(xué)發(fā)光檢測生物小分子腺苷

《基于適體技術(shù)化學(xué)發(fā)光檢測生物小分子腺苷》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、--學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明一、學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南昌大學(xué)或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名（手寫）：簽字日期：年月日二、學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交

2、論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時授權(quán)北京萬方數(shù)據(jù)股份有限公司和中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)，同意按“章程”規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。學(xué)位論文作者簽名（手寫）：導(dǎo)師簽名（手寫）：簽字日期：年月日簽字日期：年月日論文題目姓名學(xué)號論文級別博士□碩士■院/系/所專業(yè)

3、聯(lián)系電話E_mail通信地址(郵編)：備注：□公開□保密（向校學(xué)位辦申請獲批準為“保密”，年月后公開）-----萬方數(shù)據(jù)-----摘要摘要本論文是基于適體技術(shù)化學(xué)發(fā)光檢測生物小分子腺苷的研究，主要以腺苷為研究對象，羧基修飾的磁性微球作為分離載體，通過氨羧反應(yīng)將適體連接于磁性微球上，再通過堿基配對原則連接上報告序列，由于配體腺苷的競爭作用，導(dǎo)致連接于磁性微球上的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)減少，信號減弱，從而間接實現(xiàn)腺苷的檢測。論文通過實驗構(gòu)建了三種檢測方法，具體實驗方法如下:第一種檢測方法是使用辣根過氧化物酶化學(xué)發(fā)光體系檢測。實驗優(yōu)

4、化了羧基修飾的磁性微球、氨基適體、和鏈霉親和素修飾辣根過氧化物酶的量、考察了尿苷、胞苷及鳥苷對腺苷適體的選擇性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)腺苷濃度在1×10-9mol/L～10?4mol/L范圍內(nèi)，化學(xué)發(fā)光信號和腺苷濃度線性關(guān)系良好，腺苷的最低檢測濃度達到1pmol/L；并對實際尿樣也進行了檢測和回收率實驗，結(jié)果表明該法具有一定的可行性；第二種檢測方法采用液溴-金納米粒子化學(xué)發(fā)光體系檢測，建立了基于適體-金納米粒子化學(xué)發(fā)光檢測腺苷的新技術(shù)，實驗優(yōu)化了羧基修飾的磁性微球、氨基適體、報告序列和金納米粒子標記鏈霉親和素金的量，最后在進行了選

5、擇性實驗后對實際尿樣中的腺苷進行了檢測，此外論文中的金納米粒子是通過檸檬酸鈉還原氯金酸制備的，通過螯合反應(yīng)制備鏈霉親和素標記金納米粒子。實現(xiàn)化學(xué)發(fā)光間接檢測生物小分子腺苷；第三種檢測方法是在上部分研究的基礎(chǔ)上，建立了金納米粒子經(jīng)羥胺-氯金酸體系放大，使魯米諾化學(xué)發(fā)光體系發(fā)光的催化能力顯著增大，從而達到提高靈敏度的作用。同樣對實驗中所需反應(yīng)條件進行了優(yōu)化考察和選擇性實驗。同時在最優(yōu)實驗條件下實現(xiàn)了對腺苷的檢測，其最低檢測限高達到了100fmol/L；并通過特異性實驗、回收率實驗證明這一檢測方法的選擇性良好，穩(wěn)定性和重復(fù)

6、性都符合要求。也實現(xiàn)了腫瘤患者實際尿樣中腺苷的檢測，獲得滿意結(jié)果。因此本方法操作簡單、靈敏度高有望為臨床診斷疾病提供有利分析數(shù)據(jù)。關(guān)鍵詞：腺苷；適體；金納米粒子；化學(xué)發(fā)光I-----萬方數(shù)據(jù)-----ABSTRACTABSTRACTThispaperreportadetectionofbiologicalsmallmoleculeadenoisinewhichbasedonaptamerchemiluminescence(CL),theobjectoftheresearchisadenosine,carboxylmo

7、difiedmagneticmicrospheresasseparatecarrier.Aptamerconnectedtomagneticmicrospherethroughaminoxatylreaction,thenreportthesequencethroughbase-pairingprinciple.Duetotheeffectofcompetitionoftheadenosine,leadingthedecreaseofCLmatterwhichconnectedtomagneticmicrospher

8、es,causingtheweakenofsignal.Thusindirectlyachievethedetectionofadenosine.Theseexperimentsconstructthreedetectionmethods,whichshowsbelow:Thefirstdetectionmethodisusingahorser