灰葡萄孢代謝產(chǎn)物的除草活性及活性物質(zhì)的分離純化

灰葡萄孢代謝產(chǎn)物的除草活性及活性物質(zhì)的分離純化

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1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文灰葡萄孢代謝產(chǎn)物的除草活性及活性物質(zhì)的分離純化姓名:李春格申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物病理學(xué)指導(dǎo)教師:董金皋;張鳳國2003.5.1河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要本研究以來自不同地區(qū)不同寄主上的11個(gè)灰葡萄孢菌株為試材,研究了其代謝產(chǎn)物對(duì)番茄和辣椒的致毒活性及對(duì)反枝莧和馬唐的除草活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)灰葡萄孢代謝產(chǎn)物對(duì)供試植物種子萌發(fā)后根和芽的伸長(zhǎng)以及幼苗的生長(zhǎng)都有一定的抑制作用,但是不同菌株間差異明顯。其中BCI和BC4菌株的抑制作用最強(qiáng),BC3、BCll和BC5菌株次之,其他菌株的毒力較弱。結(jié)果還發(fā)現(xiàn),灰

2、葡萄孢代謝產(chǎn)物對(duì)供試植物種子根伸長(zhǎng)抑制作用較強(qiáng)的菌株,對(duì)其芽以及幼苗的生長(zhǎng)也有較強(qiáng)的抑制作用。另外,對(duì)番茄和辣椒致毒活性較強(qiáng)的菌株對(duì)反枝莧和馬唐的除草活性也較強(qiáng)。試驗(yàn)確定了菌株BC4代謝產(chǎn)物中除草活性物質(zhì)產(chǎn)生的適宜條件:即改良Fries培養(yǎng)基和查氏一道氏培養(yǎng)基(I):培養(yǎng)時(shí)間是35d;pH值為6:培養(yǎng)溫度為25"C;靜止培養(yǎng);培養(yǎng)基中添加一定比例的番茄、辣椒的浸出汁并末提高灰葡萄孢代謝產(chǎn)物的除草活性。通過葉片浸漬法和割莖幼苗法對(duì)灰葡萄孢代謝產(chǎn)物進(jìn)行除草譜試驗(yàn),結(jié)果表明,灰葡萄孢代謝產(chǎn)物具有較廣泛的殺草范圍。對(duì)反枝莧、裂葉牽

3、牛、田旋花、稗草、馬唐、牛筋、馬齒莧、狗尾草、黎葉片和幼苗都有較強(qiáng)的抑制作用,其中尤以反枝莧為重?;移咸焰吲囵B(yǎng)濾液經(jīng)乙酸乙酯萃取、乙酸乙酯萃取相的濃縮液即粗毒素,粗毒素經(jīng)3次柱層析分離出一個(gè)除草活性段,該活性餾分經(jīng)高效液相色譜分離得到一峰形尖銳而對(duì)稱的除草活性組分。關(guān)鍵詞:灰葡萄孢:代謝產(chǎn)物:毒素;致毒活性:除草活性:分離純化獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)r進(jìn)行的研究_L作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得!j些墮

4、些查篁或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:店蠢崧簽字日期:知s年}月;)日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解!I些壟竺±!i有關(guān)保留、使_I_H學(xué)位論文的規(guī)定,有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)!j些亟生型瑩可以將學(xué)位論文的全部戲部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后使塒本授學(xué)位論文作者簽名:鷹嘉糟

5、L導(dǎo)師簽名:簽字日期:鴻年f屬1日簽字日期:≯一1年,月卸日學(xué)位論文作者畢業(yè)去向:1:作單位:通訊地址:電話郵編河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文文獻(xiàn)綜述近年來,隨著人們生活水平的提高和環(huán)境意識(shí)的加強(qiáng),尤其是我國在加入WTO后,在農(nóng)藥品種的結(jié)構(gòu)上進(jìn)行了較大的調(diào)整,高毒高殘留農(nóng)藥的逐年淘汰為低毒高效農(nóng)藥的發(fā)展騰出了廣闊的市場(chǎng)空間。此外.由于全球人類可持續(xù)戰(zhàn)略的實(shí)施,使生物農(nóng)藥的研制與生產(chǎn)倍受重視.處于歷史上最好的發(fā)展時(shí)期。由此,符合環(huán)保、健康、持續(xù)發(fā)展理念的高效、低毒、低殘留、與環(huán)境相容的農(nóng)藥開發(fā)就成為當(dāng)今農(nóng)藥研究的主題。在合成化合物

6、中篩選農(nóng)藥活性成分命中率愈來愈低的今天,人們更加重視從天然產(chǎn)物中尋找新藥的研究途徑。隨著生物技術(shù)(特別是基因重組)、高通量篩選技術(shù)和組合化學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展及其在農(nóng)藥研究開發(fā)中的滲透和應(yīng)用,極大地推動(dòng)了農(nóng)藥研發(fā)領(lǐng)域中三個(gè)熱點(diǎn)問題(植物源農(nóng)藥、微生物農(nóng)藥和轉(zhuǎn)基因工程農(nóng)藥)的發(fā)展峨生物農(nóng)藥獲得青睞還有一個(gè)重要原因,即費(fèi)用低廉,開發(fā)費(fèi)用僅為化學(xué)農(nóng)藥的1/40,登記費(fèi)用也僅為化學(xué)農(nóng)藥的l門oo¨】。生物農(nóng)藥的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展迅速,蘇云金芽孢桿菌(B.t.)制劑在我國已進(jìn)入火規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)階段,生產(chǎn)廠家達(dá)76家,產(chǎn)量已達(dá)2-3萬噸/年;5Ⅱ

7、維菌素等抗生素生物農(nóng)藥和轉(zhuǎn)基因植物(種子)農(nóng)藥的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展迅速嘰生物源農(nóng)藥由于其廣譜、高效、安全、環(huán)境相容性好等特點(diǎn),必將成為2l世紀(jì)農(nóng)藥發(fā)展的主流,生物農(nóng)藥在農(nóng)藥中所占比重將越來越大。微生物農(nóng)藥是利用微生物及其基因產(chǎn)生或表達(dá)的各種生物活性成分,制備出用于防治植物病蟲害、環(huán)衛(wèi)昆蟲、雜草、鼠害、以及調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)的制劑的總稱。按照用途.微生物農(nóng)藥包括微生物殺蟲劑、微生物殺菌劑、微生物除草劑、微生物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、微生物殺鼠劑等”’”。1植物病原微生物除草1.1植物病原細(xì)菌黃單孢桿菌屬(Xanthomonas)作為微生物除草劑始于2

8、0世紀(jì)80年代初。住美國南部,野油菜黃單孢桿菌早熟采變種(Xcampestrispvpoannua)被JLfJ作防治草坪中的一年生早熟禾,防效可達(dá)82%pJ。日本的今泉等人從黃單孢桿菌屬中篩選出p--482菌株,用于防除草坪中的一種剪股穎雜草(日文名x戈J/力,t-7),最高防除率可達(dá)90%以上,該菌株

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