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1、大連理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要抗生素的耐藥性限制了傳統(tǒng)抗菌藥物藥效的發(fā)揮，從天然產(chǎn)物中尋找、開發(fā)新的抗菌藥物資源迫在眉睫。海洋微藻由于處于特殊的生長環(huán)境，含有豐富的生物活性物質(zhì)，因此成為新型抗生素藥物開發(fā)的重要潛在資源，同時微藻營養(yǎng)要求簡單、易培養(yǎng)，具有巨大的開發(fā)潛力。本研究采用瓊脂擴(kuò)散法測定了22種微藻不同溶劑提取物的抗菌活性，篩選出目標(biāo)菌株一旋鏈角毛藻，并對其抗菌活性物質(zhì)進(jìn)行了分離純化研究。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：22種微藻粗提物顯示出不同程度的抗菌活性，旋鏈角毛藻的提取物抗菌活性最強(qiáng)。旋鏈角毛藻的脂肪粗提物、多酚粗提物和萜類粗提物對供試菌株均有不同程度的生長抑制作用，開發(fā)旋鏈角毛藻中的抗菌
2、物質(zhì)具有廣泛的前景。各種提取物對細(xì)菌的生長抑制作用普遍強(qiáng)于對真菌的生長抑制作用。不同極性溶劑的脂肪粗提物中，石油醚提取物的抗菌譜最廣；通過氣相色譜法鑒定粗脂肪的脂肪酸含量與組成，發(fā)現(xiàn)只有石油醚提取物含有反式亞油酸、產(chǎn)亞麻酸和二十碳二烯酸等8種長鏈不飽和脂肪酸，因此推測脂肪粗提物中起抗菌作用的主要是這類弱極性多不飽和脂肪酸。石油醚提取物的抗菌活性普遍大于經(jīng)硅膠柱層析得到4個分離組分的抗菌活性，這可能是由于有些抗菌活性是粗提物中多種脂肪族化合物共同作用的結(jié)果，或者是由于在層析、干燥和用各種溶劑處理過程中部分抗菌化合物喪失活性。采用正交實(shí)驗(yàn)方法對粗多酚提取條件進(jìn)行了優(yōu)化，最佳提取工藝條件為：乙
3、醇體積分?jǐn)?shù)80％，超聲次數(shù)3次，料液比1：15g／mL，超聲時間40min。通過考察8種大孔吸附樹脂對多酚提取物的吸附與解吸性能，篩選了一種適合初步分離多酚提取物的大孔吸附樹脂AB．8，該樹脂的吸附容量可達(dá)80．1％。建立了大孔吸附樹脂柱層析初步分離多酚的方法，其最佳吸附條件為：料液濃度3mg／mL，上柱流速2mL／min，pH為6；最佳洗脫條件為：70％乙醇水溶液在4mL／min的流速下對AB．8大孔樹脂進(jìn)行洗脫，得到組分CP。利用硅膠柱層析和SephadexLH．20凝膠層析對CP進(jìn)一步分離純化，最后得到2個峰組分，分別命名為CPC．1和CPC．2。CPC．2具有較強(qiáng)的抗菌活性，該組
4、分在酚濃度為1mg／mL的條件下，對枯草芽胞桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑為14．0-J：0．5mm，對大腸桿菌和普通變形桿菌的抑菌圈直徑達(dá)到16．0-J：0．8ITlln，對真菌的抑制效果也有提高。CPC．2經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定，確定其為3，4，5．三羥基苯甲酸。關(guān)鍵詞：微藻；分離純化；粗脂肪；多酚；抗菌活性微藻抗菌活性物質(zhì)的分離純化IsolationandPurificationofAntimicrobialComponentsfromMicroalgaeAbstractThelimitationofantibioticresistanceontheeffectsoftraditionala
5、ntibioticsprovesthenecessityofexploitingnewantimicrobialcompoundsfromnaturalproducts．Richinbioactivesubstances，marinemicroalgaehavebecomeanimportantpotentialdrugresourceforitsspecialgrowingenvironment．Otherwise，thesemicroalgaearewithexploitationvaluefortheirsimplenutritionalneedsandeasycultured．I
6、Ilthisarticle．weinvestigatedtheantimicrobialactivitiesof22kindsofmicroalgaeusingagardiffusionmethod，andscreenedChaetoceroscurvisetusasthetargetmicroalgae．Themainexperimentalresultswereasfollows：Theextractsfrom22kindsofmicroalgaepresenteddifferentantimicrobialactivitiesagainsttestedmicroorganisms，
7、andChaetoceroscurvisetusshowedthestrongestactivity．Thecrudelipid，polyphenolsandterpenoidsofChaetoceroscurvisetusallinhibitedthemicroorganismgrowthbydifferentdegrees，whichprovingtheprimingexploitationfutureofantibacteri
