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1、·3766·廣東醫(yī)學(xué)2015年12月第36卷第24期GuangdongMedicalJournalDec．2015，Vol．36，No．24小劑量胰島素對膿毒癥急性肺損傷大鼠肺組織*血紅素加氧酶－1表達(dá)的影響及肺保護(hù)作用12111彭登高，卿國忠，張晶，王宏川，王歡12廣東省深圳市第三人民醫(yī)院急診科(518116);南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院急診教研室(湖南衡陽421001)【摘要】目的觀察小劑量胰島素對膿毒癥急性肺損傷(ALI)大鼠肺組織血紅素加氧酶－1(HO－1)表達(dá)的影響，探討胰島素的肺保護(hù)作用。方法30只雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、膿
2、毒癥組、胰島素治療組3組，每組10只。膿毒癥組和胰島素治療組采用盲腸結(jié)扎穿孔法建立膿毒癥模型，假手術(shù)組開腹后未行盲腸結(jié)扎穿孔即關(guān)腹;胰島素治療組造模后即予皮下注射胰島素0.5IU/kg，假手術(shù)組和膿毒癥組皮下注射等量生理鹽水。各組于建模后12h處死，分別測定血氧分壓(PaO2)、肺濕干質(zhì)量比、超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力(T－AOC)、肺組織NF－κB/p65含量及HO－1表達(dá)量、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中性粒細(xì)胞計數(shù)及髓過氧化物酶(MPO)活性，并在光鏡下觀察肺組織病理表現(xiàn)。結(jié)果胰島素治療組、膿毒癥組PaO2、SOD、T
3、－AOC均明顯低于假手術(shù)組(P＜0.05)，而胰島素治療組較膿毒癥組明顯升高(P＜0.05);胰島素治療組、膿毒癥組肺濕干質(zhì)量比明顯大于假手術(shù)組(P＜0.05)，而胰島素治療組較膿毒癥組明顯降低(P＜0.05)。胰島素治療組、膿毒癥組BALF中性粒細(xì)胞計數(shù)、MPO活性及肺組織NF－κB/p65含量均明顯高于假手術(shù)組(P＜0.05)，而胰島素治療組較膿毒癥組明顯降低(P＜0.05)。胰島素治療組、膿毒癥組肺組織HO－1表達(dá)量均明顯高于假手術(shù)組(P＜0.05)，且胰島素治療組較膿毒癥組明顯升高(P＜0.05)。膿毒癥組肺組織病理學(xué)損傷程度高
4、于假手術(shù)組，而胰島素治療組肺組織炎性病變較膿毒癥組明顯減輕。結(jié)論小劑量胰島素可能通過抑制NF－κB活化上調(diào)HO－1的表達(dá)對膿毒癥ALI大鼠發(fā)揮肺保護(hù)作用?！娟P(guān)鍵詞】胰島素;膿毒癥;急性肺損傷;血紅素加氧酶－1DOI:10.13820/j.cnki.gdyx.2015.24.005膿毒癥急性肺損傷(acutelunginjury，ALI)本質(zhì)上組、膿毒癥組、胰島素治療組3組，每組10只。膿毒癥是多種效應(yīng)細(xì)胞及炎性介質(zhì)共同參與，并呈級聯(lián)放大組和胰島素治療組采用盲腸結(jié)扎穿孔法建立膿毒癥模的瀑布樣炎癥反應(yīng)與繼發(fā)性肺損傷，是目前的研究熱型，假手術(shù)
5、組開腹后未行盲腸結(jié)扎穿孔即關(guān)腹;胰島素［1］點(diǎn)，其具體發(fā)病機(jī)制尚未完全明確。血紅素加氧酶－治療組造模后即予皮下注射胰島素0.5IU/kg，假手術(shù)1(hemeoxygenase－1，HO－1)又名熱休克蛋白32，作組和膿毒癥組皮下注射等量生理鹽水。3組分別在造為應(yīng)激蛋白的重要一員，在組織和器官受到損傷時起模后0.5、1、2、6h監(jiān)測血糖。［2－3］重要的保護(hù)作用。我們前期研究發(fā)現(xiàn)胰島素通過各組造模后12h全部處死。100g/L水合氯醛麻［4］抗炎、抗氧化應(yīng)激對膿毒癥ALI具有保護(hù)作用，但是醉打開胸腔主動脈取血，用于血氧分壓(PaO2)測定
6、。胰島素對HO－1表達(dá)的影響以及兩者之間的具體關(guān)結(jié)扎左側(cè)肺門，氣管切開，插入0.2cm硅膠管，生理鹽系尚不清楚，國內(nèi)外文獻(xiàn)亦未見任何報道。2012年1水2mL反復(fù)灌洗左肺3次，記錄灌洗液回收量，每次月至2014年1月，本研究觀察胰島素對膿毒癥大鼠肺回收量無明顯差異。收集支氣管肺泡灌洗液(BALF)，組織HO－1表達(dá)的影響，探討胰島素的肺保護(hù)作用機(jī)離心取上清液測定MPO活性。將沉淀用培養(yǎng)液懸浮，制，現(xiàn)報告如下。進(jìn)行中性粒細(xì)胞計數(shù)。分離左上肺，吸水紙吸凈后稱1材料與方法濕質(zhì)量，然后置80℃烘箱烘干，48h后再稱干質(zhì)量，計1．1動物和試劑雄性
7、SD大鼠30只，體重200～250算出肺濕干質(zhì)量比。另取左下肺組織100mg制成勻g，由南華大學(xué)動物實驗中心提供并飼養(yǎng)。考馬斯亮藍(lán)漿，離心，留取上清液，于－70℃冰箱保存，備生化指標(biāo)及超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力(T－AOC)、統(tǒng)一測定。40g/L多聚甲醛溶液心室灌流，取右肺甲髓過氧化物酶(MPO)試劑盒均購自南京建成生物公醛固定以備病理切片。司，核轉(zhuǎn)錄因子－κB(NF－κB)/p65試劑盒和HO－11．3觀察指標(biāo)及檢測方法抗體購自武漢博士德生物工程有限公司。1．3．1肺組織勻漿SOD、T－AOC按試劑盒說明書1．2動物分組及
8、處理30只大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)步驟先用考馬斯亮藍(lán)定蛋白，然后通過免疫比濁法經(jīng)全自動生化分析儀測定。*湖南省2011年第四批省級科技計劃(應(yīng)用基礎(chǔ)研究、科技專項)1．3．2肺組織NF－κB/p65的含量按試劑盒
