烏司他丁對膿毒癥大鼠肺微血管通透性及肺組織pedf表達的影響

烏司他丁對膿毒癥大鼠肺微血管通透性及肺組織pedf表達的影響

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時間:2018-11-24

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1、烏司他丁對膿毒癥大鼠肺微血管通透性及肺組織PEDF表達的影響作者:蔡施霞,鄧烈華,佟琳,孫小聰【摘要】目的觀察烏司他丁注射液對膿毒癥大鼠肺微血管通透性及肺組織色素上皮衍生因子(PEDF)表達的影響,探討烏司他丁對膿毒癥大鼠肺保護的作用機制。方法30只健康的雄性SD大鼠隨機分為3組:假手術組(A組)、陽性對照組(B組)、烏司他丁治療組(C組),每組10例。除假手術組外,其他組均施行盲腸結扎穿孔術(CLP)復制大鼠膿毒癥模型,治療組同時給予烏司他丁腹腔注射(100ku/kg),術后4h隨機處死大鼠5只取組織標本,剩余5只大鼠經頸外靜脈注射伊文思藍觀察肺微血管通透性。

2、分別采用逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法和酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測肺組織中PEDF的表達。結果B組肺微血管通透性明顯高于A、C組,C組肺微血管通透性高于A組;B組肺組織PEDF表達水平明顯低于A、C組,C組肺組織PEDF表達水平低于A組(P<0.05)。結論烏司他丁能明顯抑制膿毒癥大鼠肺微血管通透性增高,這種肺保護作用的機制可能與增加PEDF表達有關?!娟P鍵詞】烏司他丁注射液;膿毒癥;肺微血管通透性;PEDF  【Abstract】ObjectiveToobservethepermeabilityofpulmonarymicrovascular

3、andexpressionofPigmentepithelium-derivedfactorinsepticratstreatedechanismofUlinastatinininpulmonaryfunctionprotect.MethodsAtotalof30healthymaleSDratslydividedintothreegroups,andeachgrouphas10rats,GroupArecEivedshamoperationandtheothersunderalsaline(groupA,B)orUlinastatin(100ku/kg).Af

4、terfourhours,LungtissueexpressofPEDFinallratserasechainreaction(RT-PCR)andEnzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)methodsrespectivelyandthepermeabilityofpulmonaryvasculareabilityofpulmonarymicrovascularingroupBechanismofactionmaybeinvolvedintheincreaseofPEDFexpression.  【Keyonarymicrov

5、ascular;PEDF  膿毒癥(sepsis)是合并感染的全身性炎癥反應綜合征(systemicinflammationresponsesyndrome,SIRS),進一步發(fā)展可導致多器官功能障礙綜合征(MODS),其中呼吸功能障礙發(fā)生率較高,出現(xiàn)時間早,其主要的病理生理改變?yōu)榉蚊氀芡ㄍ感栽黾?。而色素上皮衍生因?PEDF)可使血管通透性降低,雖然臨床研究證實烏司他丁有明確的肺保護作用,但其作用機制仍有待研究,本研究采用盲腸結扎穿孔術(CLP)復制大鼠膿毒癥模型觀察烏司他丁對膿毒癥大鼠肺微血管通透性和PEDF影響,探討烏司他丁對膿毒癥大鼠肺微血管通透性影

6、響及其作用機制。  1材料與方法  1.1動物實驗分組SPF級SD雄性大鼠30只,體質量250~300g(由廣東醫(yī)學院動物中心提供),按隨機數(shù)字表法分為三組:假手術組(A組),無菌狀態(tài)下開腹尋找到盲腸后再將其還納腹腔,然后逐層關腹,術后立即腹腔注射生理鹽水(NS)2ml;CLP組(B組),CLP后立即腹腔注射NS2ml;烏司他丁(UTI)治療組(C組),CLP后立即腹腔注射UTI20ku/kg,加NS至2ml。術后4h隨機選取5只頸外靜脈注射伊文思藍液,剩余5只大鼠活殺取肺組織標本。為避免伊文思藍影響肺組織PEDF表達測定,隨機各取5只大鼠實驗?! ?.2CLP

7、模型制備方法[2]動物在乙醚吸入麻醉下無菌開腹手術,在距盲腸末端1cm處用7號絲線結扎盲腸,用22G針頭在被結扎盲腸上對穿3次,注意避免糞便污染,并用生理鹽水2ml濕潤腸管,按生理位置還納腸管。術畢逐層關腹,并于腹壁皮下注射林格氏液50ml/kg抗休克處理。術后自由進食水?! ?.3觀察指標及標本處理觀察大鼠術后活動、進食、豎毛、腹瀉、眼球凹陷、呼吸以及活殺后腹腔腸管擴張、充血、腹水、病灶包裹、肝腫大、肺表面充血等情況?;顨⑷吮緯r大鼠在乙醚吸入麻醉下,開腹留取右葉肺緣組織100mg,用磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗后立即置液氮凍存,置-80℃冰箱待逆轉錄-聚合酶鏈

8、反應(RT-PCR)檢測

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