肺癌細胞總RNA轉染的DC疫苗體外誘導肺癌患者

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1、·244·中國免疫學雜志2004年第20卷肺癌細胞總RNA轉染的DC疫苗體外誘導肺癌患者①特異性抗腫瘤免疫的實驗研究任秀寶 李   于津浦 劉 虹 郝希山 (天津醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院免疫室,天津300060)  中國圖書分類號 R39219  文獻標識碼 A  文章編號 10002484X(2004)0420244205[摘 要] 目的:為了探討肺癌細胞總RNA轉染的DC疫苗體外誘導特異性抗腫瘤免疫的能力。方法:采用分離肺癌患者外周血單核細胞體外誘導DC細胞,Trizol法提取肺癌細胞系Calu2

2、6總RNA,用脂質(zhì)體包裹總RNA轉染DC并誘導特異性CTL的擴增,LDH法和ELISA法檢測CTL的殺傷活性和IFN2γ分泌。結果:經(jīng)肺癌細胞總RNA轉染的DC特異性表面標志及功能相關分子表達均上調(diào),轉染后的DC可顯著刺激異體P自體T淋巴細胞增殖,誘導的特異性CTL對攜帶Calu26抗原的靶細胞的殺傷率顯著高于LAK細胞,再次接觸相同抗原時其IFN2γ分泌量顯著增高。結論:肺癌細胞總RNA轉染的DC疫苗可在體外誘導出特異性抗腫瘤免疫。[關鍵詞]樹突狀細胞;肺癌;RNA;腫瘤免疫;疫苗Experim

3、entalstudyofspecificantitumorimmunityinducedbydendriticcellvaccinetransfectedwithtumorcelltotalRNAinlungcancerpatientsRENXiu2Bao,LIZheng,YUJin2Pu,LIUHong,HAOXi2Shan.ImmunologyDepartment,TianjinCancerInstituteandHospital,Tianjin300060,China[Abstract]Ob

4、jective:ToobserveabilityofDCvaccinetransfectedwithtumorcelltotalRNAtoinducespecificantitumorimmunityinlungcancerpatientsinvitro.Methods:DCsweregeneratedfromlungcancerpatients’peripheralbloodmononuclearcells(PBMC).TotalRNAwasisolatedfromlungcancertumor

5、celllineCalu26byTrizol.AutologousDCstransfectedwithCalu26totalRNAbyliposomewereusedtoin2ducespecificCTLproliferation.SpecificcytotoxicityandIFN2γsecretionweremeasuredbyLDHassayandELISAmethod.Results:TransfectedDCsexhibiteddramaticallyincreasedexpressi

6、onofspecificmembranemarkersandfunction2associatedmolecules,andweremorepotentinstim2ulatingallogenousorautologousTcellproliferationthanthatofcontrolDCs.SpecificCTLsinducedbytransfectedDCsshowedhighercytotoxici2tythanLAKagainstCalu26antigenspositivetarg

7、etcells.WhensensitizedlymphocyteswererestimulatedbytransfectedDCsagain,IFN2γsecre2tionenhancedsignificantly.Conclusion:Lungcancerpatient’sautologousDCstransfectedwithtumortotalRNAareeffectivevaccinesinstimu2latingspecificantitumorT2cellimmunityinvitro

8、.[Keywords]Dendriticcell;Lungcancer;RNA;Antitumorimmunity;Vaccine  肺癌,尤其是非小細胞肺癌術后對于放療和化1 材料與方法療的敏感性較差,應用生物治療方法是近幾年來異軍突起的重要輔助治療手段。樹突狀細胞(Dendritic111 試劑和細胞系 RPMI1640完全培養(yǎng)基、DM2cells,DC)是人體內(nèi)功能最強大的抗原呈遞細胞,對RIE2C脂質(zhì)體、TricolReagent均購自GIBCOBRL,鼠啟動初次免疫應答有

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