秦皮甲素提取純化工藝及降尿酸作用研究

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1、中圖分類號R94UDC61O碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q5三3密級公玨秦皮甲素提取純化工藝及降尿酸作用研究ExtractionandpurificationofAesculinanditseffectOilreducingthelevelofuricacid作者姓名：向小四學(xué)科專業(yè)：制藥工程研究方向：天然藥物研究與開發(fā)學(xué)院(系、所)：中南大學(xué)藥學(xué)院指導(dǎo)教師：向大雄教授答辯委員會主席刁幽中南大學(xué)二O一三年五月原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含獲得中

2、南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在本論文中作了明確的說明。作者簽名：囪。i、∑丑：日期：墊f三年—L月立一日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)說明本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。作者簽名：魚乳蛆導(dǎo)師簽名：匈么迸日期：蹲年—丘月互秦皮甲素提取純化工藝及降尿酸作用研究

3、摘要一、目的探索秦皮甲素的提取、分離和純化工藝，并研究其對慢性高尿酸血癥模型小鼠尿酸水平和腎功能的影響。二、方法1．秦皮甲素?zé)峤峁に囇芯客ㄟ^單因素實驗和正交實驗探討從秦皮中浸提秦皮甲素的最佳工藝，考察乙醇浸提過程中乙醇濃度、料液比、浸提時問、浸提次數(shù)以及浸提溫度對秦皮甲素轉(zhuǎn)移率的影響。2．秦皮甲素純化工藝研究采用大孔樹脂和重結(jié)晶相結(jié)合的方法分離純化秦皮提取液中的秦皮甲素。通過HPDl00、HPD400、HPD500、D101、ADS一7、ADS一17、AB一8這七種大孔吸附樹脂對秦皮甲素的純化效果進(jìn)行靜態(tài)實驗和動態(tài)實驗考查，探索純化秦皮甲素最適合的樹脂和最佳的上樣條件。3．秦皮甲素對慢性高尿

4、酸血癥模型小鼠尿酸水平的影響研究36只昆明種雄性小鼠飼養(yǎng)一周后，隨機(jī)平均分為6組，依次為空白組、模型組、秦皮甲素高(200mg／kg)、中(100mg／kg)、低(50mg／kg)劑量組以及陽性藥物別嘌醇對照組(50mg／kg)。模型組、陽性對照組、秦皮甲素高中低劑量組給予黃嘌呤600mg／kg(ig。)+氧嗪酸鉀100mg／kg(ip．)造模，空白組給予同等劑量生理鹽水。秦皮甲素高、中、低劑量組采用秦皮甲素混懸液進(jìn)行灌胃給藥，陽性對照組灌胃給予別嘌醇混懸液50mg／kg，模型組和空白組則灌胃給予同等體積的生理鹽水，連續(xù)7日。于第七日下午給藥1h后，摘眼球取各組動物的血樣，離心吸取血清采用全自

5、動生化分析儀檢測血中尿酸(BUA)、肌酐(CR)和尿素氮(BUN)值，考察秦皮甲素對慢性高尿酸血癥模型小鼠BUA、CR、BUN的影響以及對小鼠腎功能的影響。三、結(jié)果1．秦皮甲素乙醇浸提工藝研究通過比較各因素對秦皮甲素轉(zhuǎn)移率的影響，秦皮甲素最佳的浸提工藝條件為：乙醇濃度75％，料液比為1：10，浸提溫度為65℃，浸提次數(shù)為2次，浸提時間為2h／次。2．秦皮甲素純化工藝研究根據(jù)實驗結(jié)果，本課題選用樹脂ADS一7為分離純化秦皮甲素的最佳分離樹脂。最佳上樣條件為：上樣濃度為0．192mg／mL，最大上樣量為4．02mg／g，先以3倍柱體積(3BV)的水洗去雜質(zhì)，再用30％的乙醇進(jìn)行洗脫，收集30％乙醇

6、洗脫液的前半部分，放入冰箱中冷藏保存24小時，重結(jié)晶后過濾，室溫下放置干燥，秦皮甲素純度可達(dá)到97％以上。3．秦皮甲素對慢性高尿酸血癥模型小鼠尿酸水平的影響研究結(jié)果顯示模型組和空白組相比，小鼠的BUA明顯升高，差異具有顯著性(P

7、白組相比，BUN差異均無顯著性。陽性對照別嘌醇組小鼠的CR和BUN均明顯高于空白組和模型組以及秦皮甲素高、中、低劑量組，差異具有顯著性(P<0．01)。四、結(jié)論本課題所優(yōu)化的秦皮甲素提取純化工藝提取效果好，制備工藝簡單，分離純度高，為秦皮甲素的工業(yè)化生產(chǎn)提供了實驗依據(jù)。藥效學(xué)研究表明秦皮甲素具有顯著的降尿酸作用，對小鼠腎功能無影響，其用藥安全性顯著高于別嘌醇。圖20幅，表12個，參考文獻(xiàn)54篇。關(guān)