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《FAK反義寡核苷酸對卵巢癌細(xì)胞凋亡、黏附和侵襲性的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、FAK反義寡核苷酸對卵巢癌細(xì)胞凋亡、黏附和侵襲性的影響【摘要】目的 觀察黏著斑激酶的反義寡核苷酸對卵巢腺癌細(xì)胞株OVCAR-3凋亡、黏附和侵襲性的影響。方法 實驗分4組，反義寡核苷酸組、正義寡核苷酸組、脂質(zhì)體組、空白對照組。用脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法，將黏著斑激酶的反義寡核苷酸轉(zhuǎn)入OVCAR-3卵巢癌細(xì)胞株，應(yīng)用流式細(xì)胞儀AnnexinV/PI雙染色法檢測細(xì)胞的凋亡率，應(yīng)用基質(zhì)膠細(xì)胞黏附實驗和Boyden小室法檢測卵巢癌細(xì)胞的體外黏附和侵襲能力。結(jié)果 ASODN組卵巢癌細(xì)胞的凋亡率與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);ASODN組癌細(xì)胞與基質(zhì)膠的粘附率
2、與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);ASODN組癌細(xì)胞穿透Matrigel膠的細(xì)胞數(shù)目與對照組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 抑制黏著斑激酶的表達能增加卵巢癌細(xì)胞株OVCAR-3的凋亡，并降低其黏附和侵襲轉(zhuǎn)移能力?！娟P(guān)鍵詞】黏著斑激酶;卵巢癌;侵襲;凋亡;粘附【Abstract】 Objective Toinvestigatetheinhibitoryeffectsofantisenseoligodeoxynucleotides(ASODN)offocaladhesionkinase(FAK)ontheapoptosis，adh
3、esionandinvasionofovariancarcinomacellline-OVCAR-3.Methods TheASODNwastransfectedintoOVCAR-3cellswithlipofectamineTM2000intheformofliposome-ODNcomplexes.ThecellapoptosiswasobservedbyflowcytometrywithAnnexin-V/PIdualstaining.Thecellattachmentassaywascarriedoutinaculturewellpre-co
4、atedwithmatrigel.TheadhesionandinvasionofovariancancerinvitroweredetectedbymatrigelcelladhesiontestingandBoydenchambermethod.Results TheapoptosisrateofOVCAR-3cellstreatedwithASODNwasincreasedsignificantly，ascomparedwiththatincontrolgroup(P<0.05).TheadhesionrateofOVCAR-3cellsinma
5、trigeltreatedwithASODNwasdecreasedsignificantly，ascomparedwiththatincontrolgroup(P<0.05).ThenumberofOVCAR-3cellsthatpenetratedthematrigelwasdecreasedsignificantly，ascomparedwiththatincontrolgroup(P<0.05).Conclusion TheinhibitionofFAKexpressioncanincreasetheapoptosisofovarycarcin
6、omacellline-OVCAR-3，andcandecreaseitsadhesionandinvasionability.【Keywords】 FAK;ovariancarcinoma;invasion;apoptosis;adhesion卵巢癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，主要的死亡原因是轉(zhuǎn)移，但是目前發(fā)生轉(zhuǎn)移的機制尚不完全明了。黏著斑激酶(focaladhesionkinase，F(xiàn)AK)是一種新近發(fā)現(xiàn)的酶類，臨床研究顯示其在多種人類腫瘤中均有表達，與腫瘤的生長、侵襲與轉(zhuǎn)移特性關(guān)系密切[1-4]。我們嘗試以FAK的反義寡核苷酸(antisenseo
7、ligonucleotide，ASODN)體外轉(zhuǎn)染卵巢癌細(xì)胞系OVCAR3，觀察其對癌細(xì)胞凋亡、黏附和侵襲能力的影響。1 材料與方法1.1 實驗材料脂質(zhì)體lipofectin2000購自美國Invitrogen公司。Transwell小室購于美國ComingCostar公司。Matrigel膠購于BDBiosciences公司。1.2 細(xì)胞培養(yǎng)人卵巢癌細(xì)胞系OVCAR-3購自上海細(xì)胞所，于含有10%小牛血清，100U/ml青霉素，100μg/ml鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)液中，37℃、95%濕度及5%CO2的培養(yǎng)箱中連續(xù)培養(yǎng)。1.3 寡核苷酸的
8、轉(zhuǎn)染FAK反義寡核苷酸5’-ATAATCCAGCTTGAACCAAG-3&rsqu
