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1、肝素鈉效價檢測方法試劑：羊血漿（冰凍保存）、0.9%生理鹽水、0.25%CaCl2（用生理鹽水配置）、8%檸檬酸鈉溶液、8IU∕mg肝素鈉標準溶液。4.2.2.2待檢樣品溶液的配置：精確稱取肝素鈉固體待檢樣品Mmg，溶解并用0.9%生理鹽水定容至100ml，再取Vml定容至25ml即得待檢樣品溶液，冷藏保存。估計M及V的計算公式為：樣品估計效價×MV∕100=25×8估算時V只盡量小于10且取整數(shù)，從而計算出M值。4.2.2.3檢測方法：將恒溫水域調(diào)制37℃恒溫，取出冰凍羊血漿，融化，并過濾，待用。取2組10只試管，分別加入標樣110ul
2、、120ul……200ul，然后每管加入8%檸檬酸鈉溶液20ul、0.25%CaCl20.8ml及過濾后的羊血漿1ml，另一組加入待檢樣品溶液110ul、120ul……200ul，同樣每管加入8%檸檬酸鈉溶液20ul、0.25%CaCl20.8ml及過濾后的羊血漿1ml。并將每只試管蓋好管蓋，倒轉(zhuǎn)3—4次混勻，使內(nèi)壁濕潤，垂直放入37℃水域1h。1h后取出各管，檢查各管的凝固程度，并記錄確定標樣及待檢樣的1∕2凝固點及體積。凝固程度標準：①完全凝固：溶液完全凝固，倒轉(zhuǎn)試管并猛敲一下時，凝塊不從管壁脫落。②3∕4凝固：溶液完全凝固，但當猛敲
3、一下時，凝塊能從管壁脫落。③1∕2凝固：大約一半體積的溶液凝固。④1∕4凝固：少量溶液凝固。⑤0凝固：溶液悟凝固現(xiàn)象。若相鄰兩管跳過1∕2凝固點則1∕2凝固點的計算公式為V=V2-（V2-V1）×（0.5-S1）∕(S2-S1)(S1：小凝固度；S2：大凝固度；V1：相鄰兩管大凝固度加入的微升數(shù)；V2：相鄰兩管小凝固度加入的微升數(shù)。)待檢樣品效價計算公式：4.2.2.4F=待檢樣品估計效價×標品1∕2凝固點微升數(shù)÷樣品1∕2凝固點微升數(shù)4.2.2.5注意事項：4.2.2.6.1實驗室操作環(huán)境必須控制在30℃以下。4.2.2.6.2在使用新
4、開啟羊血漿前，需檢測羊血漿是否能夠正常使用。取試管一只，加入0.8ml0.25%CaCl2及過濾后的羊血漿1ml，蓋好管蓋，倒轉(zhuǎn)3—4次混勻，使內(nèi)壁濕潤，垂直放入37℃水域5min，5min后檢查血漿是否凝固，如血漿凝固則可使用，未凝固則不能使用。4.2.2.6.3如在檢測過程中，標樣的1∕2凝固點高于200ul，則需重新調(diào)整羊血漿的1∕2凝固點。方法如下：取3組各10只試管組一：12345678910標樣110120130140150160170180190200ul8%檸檬酸鈉20202020202020202020ul0.25%Ca
5、Cl20.80.80.80.80.80.80.80.80.80.8ml羊血漿1111111111ml組二：12345678910標樣110120130140150160170180190200ul8%檸檬酸鈉30303030303030303030ul0.25%CaCl20.80.80.80.80.80.80.80.80.80.8ml羊血漿1111111111ml組三：12345678910標樣110120130140150160170180190200ul8%檸檬酸鈉40404040404040404040ul0.25%CaCl20.8
6、0.80.80.80.80.80.80.80.80.8ml羊血漿1111111111ml將每只試管蓋好管蓋，倒轉(zhuǎn)3—4次混勻，使內(nèi)壁濕潤，垂直放入37℃水域1h。1h后取出各管，檢查各管的凝固程度，并記錄確定標樣的1∕2凝固點及體積。如1∕2凝固點在110ul—200ul的，即可使用。選值最好在130ul—170ul范圍內(nèi)。8%檸檬酸鈉需用生理鹽水配置。4.2.2效價（羊血漿法）4.2.2.1、試劑：羊血漿（冰凍保存）、0.9%生理鹽水、0.25%CaCl2（用生理鹽水配置）、8%檸檬酸鈉溶液、8IU∕mg肝素鈉標準溶液。4.2.2.2待
7、檢樣品溶液的配置：精確稱取肝素鈉固體待檢樣品Mmg，溶解并用0.9%生理鹽水定容至100ml，再取Vml定容至25ml即得待檢樣品溶液，冷藏保存。估計M及V的計算公式為：樣品估計效價×MV∕100=25×8估算時V只盡量小于10且取整數(shù)，從而計算出M值。4.2.2.3檢測方法：將恒溫水域調(diào)制37℃恒溫，取出冰凍羊血漿，融化，并過濾，待用。取2組10只試管，分別加入標樣110ul、120ul……200ul，然后每管加入8%檸檬酸鈉溶液20ul、0.25%CaCl20.8ml及過濾后的羊血漿1ml，另一組加入待檢樣品溶液110ul、120ul
8、……200ul，同樣每管加入8%檸檬酸鈉溶液20ul、0.25%CaCl20.8ml及過濾后的羊血漿1ml。并將每只試管蓋好管蓋，倒轉(zhuǎn)3—4次混勻，使內(nèi)壁濕潤，垂直放入37℃水域1h。1h后取
