家兔的氨茶堿靜脈注射藥代動力學(xué)研究

家兔的氨茶堿靜脈注射藥代動力學(xué)研究

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1、家兔的氨茶堿靜脈注射藥代動力學(xué)研究實驗?zāi)康?、掌握紫外分光光度法測定兔血中氨茶堿2、掌握藥動學(xué)參數(shù)的計算方法【實驗原理】氨茶堿,多用于治療支氣管哮喘,為茶堿與乙二胺的復(fù)鹽。茶堿是主要的藥效成分,而乙二胺則能夠提高藥物的水溶性。由于其治療窗相對較窄(10-20微克/毫升),大約有75%的患者在血藥濃度超過25微克/毫升的時候出現(xiàn)中毒反應(yīng)。因此,加強患者的氨茶堿的血藥濃度監(jiān)控非常必要。茶堿是一種弱酸,所以可以用有機溶劑在酸性條件下將其從血清里面中提取分離,同時血清蛋白變成沉淀。隨后,茶堿可以用堿液從有機溶劑中

2、提取分離。茶堿的最大吸收波長是274nm,然而,空白血清在該波長處也有顯著的吸收,所以使用雙波長(274nm和298nm)紫外分光光度法來測定兔血中的茶堿濃度?!緦嶒灢襟E】1、參比溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線取茶堿5.0g至10容量瓶中,用10mlNaOH溶液(0.1mol/L)溶解并定容至刻度制成500ug/ml的儲備液。分別取5.0,10.0,15.0,20.0,25.0和30.0ul的儲備液加至裝有500ul空白血清樣品的試管中。最終的生物標(biāo)準(zhǔn)校正濃度范圍為5.0-30.0ug/ml。標(biāo)準(zhǔn)樣品通過下述的方法進行測

3、定。繪制以△A(A274-A298)為縱坐標(biāo),以濃度為橫坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。2、血清中茶堿濃度的測定取200ul的鹽酸(0.1mol/L)和5ml的氯仿-異丙醇(95:5)加入500ul的血清樣品中?;旌暇鶆蚝?,將混合液用離心機(3000r/min)離心10min。然后,取氯仿層(3.0ml)轉(zhuǎn)移進入另一試管中,再加入3.0ml的氫氧化鈉(0.1mol/L)混勻?;旌弦河秒x心機(3000r/min)離心10min。取上清液(約2.5ml)分別在274nm和298nm處測定其吸光度A??瞻滓簽?.0ml的蒸餾水

4、和4.0ml的氫氧化鈉(0.1mol/L)混勻制成。血液中的藥物濃度使用茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程進行計算。3、動物實驗1)注射給藥:氨茶堿(用兩倍體積的5%的葡萄糖溶液稀釋)以15mg/kg的劑量通過耳緣靜脈在2min之內(nèi)緩慢注射入家兔體內(nèi)。2)血液取樣時間:靜脈注射氨茶堿后在不同時間點取血(10,20,30,45,60,90,120,150,180,和240min)。3)血液取樣方法:切割家兔耳緣靜脈取血(2-3ml),放置20分鐘后,離心機(5000r/min)離心10min。上清液即為分析用血清樣

5、本?!緮?shù)據(jù)處理】1、通過計算與家兔血液中的茶堿濃度有關(guān)的△A來繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線2、計算血清樣品中茶堿濃度3、計算藥動學(xué)參數(shù)繪制藥物的藥時曲線和用梯形分塊法計算AUC。繪制對數(shù)曲線并選擇符合數(shù)據(jù)的隔室模型。計算消除速率常數(shù)K和半衰期【思考題】1、如何判斷與數(shù)據(jù)相匹配的隔室模型?2、血清樣品和血漿樣品有什么不同?3、AUC的重要意義是什么?Supplement:參數(shù)計算全用3p97處理,到時那個軟件會自動生成9份數(shù)據(jù),分別為1,2,3三室的三種不同算法算出的結(jié)果,大家只要選擇以1/c為權(quán)重的那三份進行比較,選擇A

6、IC最小即最佳隔室模型來作為你們實驗的結(jié)果即可。軟件生成的曲線圖截取非常麻煩,并且那個圖不美觀,所以蔡老師說直接用EXCEL來作圖即可。個人能力有限,可能存在翻譯錯誤,僅供參考,希望大家自己仔細閱讀英語原版?。(∩_∩)O~以上是從網(wǎng)上下的個人修改了一下下不知道那個蔡老師是不是我們的蔡老師可能翻譯的不好大家看看有需要改動的地方大家自己動動手咯O(∩_∩)O哈哈~↖(^ω^)↗

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