靜脈注射加替沙星在家兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)

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1、呂文婷侯婷黑紅亞姚海巖侯碧玉肖飛燕靜脈注射加替沙星在家兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)會(huì)測定家兔血藥濃度的方法2.掌握HPLC的使用3.掌握藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的計(jì)算實(shí)驗(yàn)原理加替沙星為第三代喹諾酮類藥物。喹諾酮類藥物是一種DNA旋轉(zhuǎn)酶抑制劑,它作用于細(xì)菌DNA旋轉(zhuǎn)酶,干擾DNA超螺旋結(jié)構(gòu)的解旋,從而阻礙DNA的復(fù)制,而呈現(xiàn)殺菌作用。該類藥物的共同特點(diǎn)是:抗菌作用強(qiáng)大,抗菌譜較廣,主要對抗革蘭陰性菌,對革蘭陽性菌也有相當(dāng)作用。在體內(nèi)的分布較廣,可進(jìn)入大多數(shù)藥物不能進(jìn)入的骨、關(guān)節(jié)和前列腺組織等。加替沙星在體內(nèi)符合二房室模型實(shí)驗(yàn)材料與儀器1.1藥物與試劑鹽酸加替沙星。甲醇(色譜純),醋酸銨,10%

2、高氯酸溶液,重蒸水，均為分析純試劑。實(shí)驗(yàn)材料與儀器1.2動(dòng)物健康家兔1只實(shí)驗(yàn)材料與儀器1.3儀器高效液相色譜儀旋渦混合器離心機(jī)手術(shù)器械2.1色譜條件2.2樣品的制備2.3測定方法2.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.5討論實(shí)驗(yàn)方法2.1色譜條件色譜柱為ODS柱,流動(dòng)相：水相為15mmol/L醋酸銨，醋酸調(diào)pH為3.0,有機(jī)相為乙腈。水相-有機(jī)相(78:22),流速1.0ml/min,檢測波長為293nm,柱溫為40℃。實(shí)驗(yàn)方法2.2樣品的采集取健康家兔進(jìn)行稱重,麻醉,股動(dòng)脈插管作取血用。將加替沙星注射液按每30mg/kg從耳緣靜脈給藥停止給藥后分別于2,5,10,15,30,45,60,90,120min

3、時(shí)進(jìn)行血液采集,裝入無菌微量離心管中。每次取血o.5ml，每管血液中加入1滴肝素抗凝。離心(4000r/min)15min.取血漿0.2ml，備用。實(shí)驗(yàn)方法2.3.1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制稱取100mg加替沙星標(biāo)準(zhǔn)品，加入100ml甲醇，配成1mg/L母液;用母液加甲醇。分別稀釋成500，250，125，62.5，31.2，15.6，7.8，3.9ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液實(shí)驗(yàn)方法2.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線取10ul標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入90ul空白血漿，分別稀釋成50，25，12.5，6.25，3.12，1.56，0.78，0.39ug/ml加10%高氯酸溶液0.1ml,混勻,渦旋震蕩3min，12000rpm離心

4、10min取上清液120ul轉(zhuǎn)移至另一離心管內(nèi)，取20μl進(jìn)樣以加替沙星濃度C(μg/ml)對相應(yīng)峰面積A回歸,得回歸方程。實(shí)驗(yàn)方法2.3.3樣品處理取兔血漿0.1ml,加10%高氯酸溶液0.1ml,混勻,渦旋震蕩3min，12000rpm離心10min取上清液120ul轉(zhuǎn)移至另一離心管內(nèi)，取20μl進(jìn)樣。計(jì)算加替沙星峰面積A,代入標(biāo)準(zhǔn)曲線求得各時(shí)間點(diǎn)的血藥濃度。實(shí)驗(yàn)方法2.3.4用Kinetica4.4計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.4.1.標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.4.2血藥濃度-時(shí)間曲線實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.4.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.4.4c-t圖像（kinetica4.4自動(dòng)生成，權(quán)重：1/c2

5、,c為計(jì)算值）實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.5.5藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得加替沙星在體內(nèi)消除符合二房室模型，與文獻(xiàn)相符。但求出的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)和文獻(xiàn)有較大差異，原因可能是：1.給藥劑量不一樣，導(dǎo)致與劑量有關(guān)的參數(shù)不一樣，如AUC，C0等。2.文獻(xiàn)用的軟件是3p87，我們用的是kinetica4.4.不同軟件計(jì)算方法不一樣，可能算出來的結(jié)果也不一樣。3.擬合時(shí)可以選擇不同的權(quán)重系數(shù)，權(quán)重系數(shù)有1,1/c,1/c2等。常用的有1和1/c2(kinetica還有測量值和計(jì)算值之分)，不同權(quán)重系數(shù)的結(jié)果差異很大，沒有可比性。因此可能有更合適的方法可以用來擬合。討論此外，實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng)有：1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)取血

6、時(shí)要防止凝血，取血時(shí)間點(diǎn)要準(zhǔn)確。2.用HPLC測定時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品要在同一臺儀器上測。3.每次進(jìn)樣量要固定。平行操作減少誤差。4.色譜柱使用前要活化，更換流動(dòng)相后要平衡30min-1h。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后要用甲醇沖柱子。Thankyou！