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《99mtc示蹤法初步研究注射ngf家兔藥代動力學(xué)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、99mTc示蹤法初步研究注射NGF家兔藥代動力學(xué)作者：付昌文，呂天潤，曹小建，劉軍【摘要】目的使用99mTc示蹤初步研究注射用NGF在家兔體內(nèi)藥代動力學(xué)。方法將NGF用99mTc標記，利用同位素示蹤法和TCA沉淀法測得NGF含量與放射性計數(shù)的線性關(guān)系，并由靜脈注射至家兔體內(nèi)，通過上述檢測方法得到不同時段血漿中微量NGF濃度，使用3P87軟件分析藥代動力學(xué)參數(shù)并初步分析組織分布。結(jié)果NGF靜脈注射后的家兔體內(nèi)代謝符合二隔室分布模型；按劑量40μg/kg靜注后，測得T1/2α=0.077h、T1/2β=0.88
2、h、AUC=98.6514ng·h·ml－１。結(jié)論99mTc具有較好的示蹤效果，適用于體內(nèi)藥代動力學(xué)研究?！娟P(guān)鍵詞】99mTc-NGF；藥代動力學(xué)；TCA沉淀法【Abstract】ObjectiveTostudythepharmacokiicsofNGFinrabbitbyisotopictracing.MethodsNGFTc，anditsγ-raycountsethod.Fromcpmofγ-rayandNGFcontentofsamples，thestandardcurveTc-NGFvenaauri
3、s.Samplesofrabbitbloode(0.00833，0.0166，0.05，0.0833，0.166，0.25，0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5，4h).Thetechniquesaboveacokiicparameterbysoftetabolisminvivoconformsthedouble-partmentsmodel.ontalcini于1986年獲得諾貝爾醫(yī)學(xué)獎［5］。有關(guān)NGF的血藥濃度檢測已有很多報道，但都比較復(fù)雜。本文將NGF用99mTc標記，利用同位素示蹤法和TCA
4、沉淀法測得NGF含量，從而初步研究NGF脂質(zhì)體在家兔體內(nèi)藥代動力學(xué)，以期為其他相關(guān)試驗及今后的臨床應(yīng)用提供必要的參考資料。1材料與方法1.1儀器與試劑1.1.1儀器 GC-911γ射線計數(shù)儀（中國科技大學(xué)儀器廠）；Ultrospec2000紫外分光光度儀(Pharmacia公司)；DFM-96多排放射免疫計數(shù)儀（眾成電機技術(shù)公司）；FJ-391A1型活度儀（北京放射性儀表廠）；3P97軟件(江蘇省人民醫(yī)院藥劑科合作提供)；FA1004電子天平（上海精科天平）。1.1.2試劑 小鼠頜下腺2.5SNGF（南
5、京軍事醫(yī)學(xué)研究所提純，純度>98%，文章另發(fā)）；99mTcO4(北京原子高科核技術(shù)應(yīng)用股份有限公司)；亞錫（上?；瘜W(xué)試劑三廠）；Kieselgel60F254硅膠板（德國EMscience）；檸檬酸緩沖液（南京森科醫(yī)藥公司）；三氯乙酸（南京生興生物技術(shù)公司分裝）；SephadexG-25(南京森科醫(yī)藥公司提供)。1.3實驗動物實驗用新西蘭兔(雌雄各半、2.5kg，南京愛立默動物實驗有限公司)。1.4方法1.4.1同位素示蹤法與TCA沉淀法檢測血漿中微量NGF用放射性元素99mTc標記NGF，對99mT
6、c-NGF用TCA沉淀［6］，然后對沉淀物進行γ計數(shù)儀計數(shù)，數(shù)值與NGF的含量存在線性關(guān)系，從而測定在血漿中微量NGF的濃度。1.4.1.1標準曲線的制備99mTc－NGF的制備：配制0.5％亞錫（Sn2＋）－檸檬酸緩沖液（cit）。取NGF20ml（含20mgNGF）、cit溶液100ml及配制的0.5％Sn2＋-cit溶液20ml，將其置于小瓶中，充入氮氣3～5min，即制備完藥箱置于4℃冰箱待標記時取出。加10mgVitC于cit溶液中，制備成10mg/mlVitC溶液；取出制備的藥箱，在其小瓶中加0
7、.3ml高锝酸（99mTcO4）(具體放射量根據(jù)需要)，然后加入配制的10mg/mlVitC溶液0.1ml，混勻。即制備完99mTc－NGF。樣品經(jīng)SephadexG-25凝膠柱分離純化，收集各組分，測量每管的γ計數(shù)，合并各峰收集組分并取出60μl，加考馬斯亮藍R-250染色，用紫外分光光度儀測定595nm處的吸光度，計算NGF的化學(xué)量。以收集99mTc-NGF峰的總放射性除以上樣層析時的總放射性，即得99mTc-NGF的標記率。99mTc-NGF峰的總放射性除以該峰的總蛋白質(zhì)量，即得比活度。紙層析法測定9
8、9mTc-NGF的放化純度。配制10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、500ng/ml及1000ng/ml99mTc-NGF溶液各1份，各吸取20ml于試管中，加150μl生理鹽水及30μl兔血清，加20％三氯乙酸200μl，5000rpm離心3min。去上清，測定各試管中沉淀物放射性計數(shù)，繪制標準曲線，求回歸方程及回歸系數(shù)。1.4.1.2測定方法的確證通過檢測回收率及重復(fù)性試驗研究證明該方法的可行性
