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1、1 材料1.1 實驗動物Wistar雄性大鼠50只,體重在220±202模型2．1分組將Wistar大鼠隨機分為:(1)空白對照組8只,余42只大鼠模型復制后通過檢測篩選合格大鼠。具體做法是:TC小于2.6mmol/L的動物被剔除,血糖小于16.7mmol/L的被剔除。(2)取造模合格大鼠30只,再隨機分為模型組、qkl組、jz組。其中正常組喂養(yǎng)普通飼料,其他組均喂養(yǎng)高脂飼料。2．2復制①高脂血癥的模型復制 大鼠飼料基本配方為:1~4%膽固醇,10%豬油,0·2%甲基硫氧嘧啶,86%~89%基礎飼料(其中面粉20%,米粉10%,玉米20%,麩皮25%,豆粉20%,骨粉2%,
2、魚粉2%)。因為大鼠對高脂肪、高膽固醇有耐受性,對外源性膽固醇的吸收率為40%,較難形成斑塊,所以飼料中除膽固醇外,另又加入了甲基硫氧嘧啶。15~20g/只·d,持續(xù)4周后檢測證實,大鼠血膽固醇是否明顯升高。②復合高糖血癥的模型復制 在高脂血癥即將形成的第4周復制高糖血癥模型,即使用鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)腹腔注射形成高糖血癥,使兩種模型同時成功復制。臨用前配制0·1mol/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。再向此溶液加入檸檬酸鈉,配制成0·5%溶液,其pH值為。另有：大鼠術前30分鐘按39/kg腹腔注射50%葡萄糖，對照組大鼠注射等容積復方氯化鈉溶液，分
3、別在葡萄糖注射前、缺血30分鐘、再灌注24小時用微量血糖分析儀測量鼠尾血血糖濃度。③方法 大鼠40只(實驗前測血糖、尿糖均正常)按隨機數(shù)字表法隨機分為5組。按體重標準50mg/kg次性腹腔注射0·5%鏈脲佐菌素溶液,正常對照組同樣按照體重標準50mg/kg予0·9%生理鹽水腹腔注射。注射5h后,予以25%葡萄糖水灌胃,每只2mL,防止造模早期大鼠出現(xiàn)嚴重的低血糖反應。正常對照組予以2mL/只蒸餾水灌胃。72h從大鼠眼眶球后靜脈叢取血測定空腹血糖水平。將血糖值≥16mmol/L者確定為高糖血癥模型大鼠,再隨機分為3組。灌胃給藥或同體積蒸餾水,每天1次,連續(xù)10天。末次給藥后腹
4、腔注射麻醉,腹主動脈取血,離心分離血清按試劑盒方法測定vWF。3腦缺血模型0.1M檸檬酸-檸檬酸三鈉配置：0.1M檸檬酸母液:2.1g檸檬酸(FW:210.14)溶于100mlddH2O0.1M檸檬酸三鈉液母液:2.94g檸檬酸三鈉(FW:294.10)溶于100mlddH2O然后將0.1M檸檬酸母液和0.1M檸檬酸三鈉母液按1:1.32配制造模時配制1％的stz的溶液。是每次配30只老鼠的量左右。0.5g的stz加入50ml的檸檬酸鈉緩沖液?；旌暇鶆驔]有固體沉淀后，用錫紙包住stz溶液的瓶子就可以注射了。按照65mg/kg的量注射的。1只200g的老鼠注入1％stz溶液的
5、量是1.3ml
