資源描述：
《《生物質(zhì)譜》PPT課件》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、第3講：生物質(zhì)譜Bio-massspectrometry，Bio-MS重慶醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院母昭德碩士生學(xué)位課程：蛋白質(zhì)組學(xué)1本講介紹以下內(nèi)容：Ⅰ、質(zhì)譜分析法，質(zhì)譜儀，質(zhì)譜圖Ⅱ、生物質(zhì)譜Ⅲ、基質(zhì)輔助激光解吸電離/飛行時(shí)間質(zhì)譜Ⅳ、電噴霧電離質(zhì)譜2Ⅰ、質(zhì)譜分析法，質(zhì)譜儀，質(zhì)譜圖3質(zhì)譜分析法 （massspectrometry，MS）是將化合物形成離子和碎片離子，按質(zhì)荷比（m/z）的不同進(jìn)行分離，來(lái)進(jìn)行成分和結(jié)構(gòu)分析的方法。質(zhì)譜分析中，多種離子化技術(shù)均可使物質(zhì)分子失去外層價(jià)電子形成分子離子（molecularion，M+），分子離子中的化學(xué)鍵還可以繼續(xù)發(fā)生某些有規(guī)律的斷裂而形成不同質(zhì)量的
2、碎片離子（fragmention）：M→→→M++碎片離子+中性分子4質(zhì)譜儀的構(gòu)成質(zhì)量分析器檢測(cè)器計(jì)算機(jī)控制與數(shù)據(jù)處理樣品導(dǎo)入系統(tǒng)離子源真空泵Im/z質(zhì)譜圖MassspectrumInletSystemIonsourcesMassanalyzersDetectorDatasystemVacuumPumpingsystem?Simplevacuumlock?HPLC?Electrospray(ESI)?MALDI?Quadrupole?Iontrap?Timeofflight?FTMS5質(zhì)譜圖質(zhì)譜分析中，按各離子m/z的順序及相對(duì)強(qiáng)度大小記錄分析結(jié)果的圖譜即為質(zhì)譜圖。由于圖譜中離
3、子的質(zhì)量及相對(duì)強(qiáng)度是各物質(zhì)所特有的，即反映了物質(zhì)的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，因此通過(guò)質(zhì)譜解析可以進(jìn)行物質(zhì)的成分和結(jié)構(gòu)分析。常見(jiàn)的質(zhì)譜圖是經(jīng)過(guò)計(jì)算機(jī)處理后得到的棒圖（bargraph）。6TypicalMassSpectrumaspirinRelativeIntensity(%)m/z7145014551460146514701475148014851490149515001505501001478.721462.731463.741464.741465.751479.731494.721480.741481.751495.741496.72Relativeabundance(%)m/zM
4、MSHLNHPNIIR,1462.74MMoSHLNHPNIIR,1478.74MoMoSHLNHPNIIR,1494.73高分辨質(zhì)譜圖8質(zhì)譜法的特點(diǎn)1、不受被分析試樣形態(tài)限制2、靈敏度高，試樣用量少，檢測(cè)限可達(dá)到10-11克。3、分析速度快，完成一次僅需1到幾秒，最快可達(dá)10-3秒。4、信息直觀(guān)，質(zhì)譜圖上的質(zhì)荷比與離子的質(zhì)量直接相關(guān)，質(zhì)譜圖的解釋方便易行。5、易于實(shí)現(xiàn)與色譜聯(lián)用。6、應(yīng)用范圍廣泛，適用于無(wú)機(jī)有機(jī)物質(zhì)。9Ⅱ、生物質(zhì)譜(Bio-massspectrometry,Bio-MS)※是主要用于生物大分子分析的質(zhì)譜技術(shù)?！镔|(zhì)譜要求測(cè)定上萬(wàn)甚至是幾十萬(wàn)的相對(duì)分子質(zhì)量?！?/p>
5、隨著電噴霧電離(ElectrosprayIonization，ESI)和基質(zhì)輔助激光解吸電離(Matrix-assistedLaserDesorption/ionization，MALDI)技術(shù)的完善和成熟，生物大分子的質(zhì)譜分析才得以實(shí)現(xiàn)。10TheNobelPrizeinChemistry2002"fortheirdevelopmentofsoftdesorptionionizationmethodsformassspectrometricanalysesofbiologicalmacromolecules"約翰·芬田中耕一11Softionization(軟電離)質(zhì)譜分析中
6、采用較低的能量使試樣分子電離的技術(shù)。采用軟電離技術(shù)容易獲得能指明相對(duì)分子質(zhì)量的準(zhǔn)分子離子(M+H)+、(M-H)+，適合于混合物及生物大分子的測(cè)定。在蛋白質(zhì)組質(zhì)譜分析中使用的軟電離技術(shù)主要是田中耕一所創(chuàng)立的基質(zhì)輔助激光解吸電離(MALDI)和約翰·芬所創(chuàng)立的電噴霧電離(ESI)。軟電離技術(shù)的發(fā)展不但使質(zhì)譜技術(shù)發(fā)生了突破性的革新，而且使質(zhì)譜技術(shù)在生命科學(xué)中的應(yīng)用得到了前所未有的擴(kuò)展。12生物質(zhì)譜法可以得到三類(lèi)質(zhì)譜圖測(cè)定生物大分子準(zhǔn)確相對(duì)分子質(zhì)量的質(zhì)譜圖§以MALDI-TOF獲得的準(zhǔn)確相對(duì)分子質(zhì)量的質(zhì)譜圖§以ESI-MS獲得的準(zhǔn)確相對(duì)分子質(zhì)量的質(zhì)譜圖肽質(zhì)量指紋圖（peptidema
7、ssfingerprinting,PMF）。以PMF的數(shù)據(jù)再通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)進(jìn)行數(shù)據(jù)庫(kù)搜索。串聯(lián)質(zhì)譜（TandemMS）圖（MS/MS質(zhì)譜圖或MSn質(zhì)譜圖）。以TandemMS的數(shù)據(jù)再通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)進(jìn)行數(shù)據(jù)庫(kù)搜索。13MALDI/TOFMassSpectrumofIgGRelativeAbundancem/z01000020000300004000050000100000150000200000MH+(M+2H)2+(M+3H)3+圖中，除分子離子峰[M+H]+外，還可檢測(cè)到[M+2H]2+峰和[M+
