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1、第一章血液一般檢驗緒論一、臨床檢驗(clinicallaboratorytechnologyorscience)又稱實驗診斷學,就是通過實驗室的各種檢查方法,包括感官檢查、理學檢查、化學檢查、顯微鏡檢查以及自動化儀器檢查等,對病人的血液、體液、分泌物和排泄物等標本進行檢查、分析,以獲得病原、病理變化及臟器功能狀態(tài)等資料。二、臨床檢驗在醫(yī)學中的作用1、為準確診斷、及時治療提供依據(jù)臨床檢驗的結(jié)果是支持診斷、鑒別診斷、甚至確定診斷的主要依據(jù)。例:anemia依據(jù):血中紅細胞和血紅蛋白量減少leukemia依據(jù):血象和骨髓象腎臟有實質(zhì)性損傷的依據(jù)尿液中出現(xiàn)蛋白、細胞管型問:tumo
2、r?2、為分析病情、觀察療效、判斷預后提供依據(jù)在疾病過程中,血液、體液、分泌物和排泄物也會隨之發(fā)生相應的變化3、為預防疾病提供資料如血象和腫瘤細胞學的普查等三、臨床檢驗的一般方法1、目視檢查直接觀察標本:顏色、透明度、性狀,有無凝塊或寄生蟲2、理學檢查液體的相對密度、血液比粘度、紅細胞沉降率、紅細胞比積等病理變化3、化學檢查定性和定量檢測標本化學成分的病理變化4、顯微鏡檢查觀察有型成分的數(shù)量和形態(tài)5、自動化儀器檢查電子技術、程序控制的發(fā)展四、學習臨床檢驗的目的和要求1、理論聯(lián)系實踐2、操作要求3、檢驗結(jié)果必須和臨床表現(xiàn)結(jié)合4、檢驗人員的醫(yī)德血液標本采集和血涂片制備血液學檢查
3、:反應造血系統(tǒng)本身、機體全身或局部病變有助于疾病的診斷及療效、預后的觀察只能反應疾病某一方面的情況,不能認為是病程的全部反應;不同個體,對同一影響有不同的反應,或也可對不同影響產(chǎn)生相同的反應一、血液標本的采集1、毛細血管采血法部位:中指或無名指尖內(nèi)側(cè),半歲以下拇指或足部,特殊人員視情況而定。b.所用器材:采血針、吸管c.采血步驟及注意事項2、靜脈采血法部位:主要是肘靜脈。還可以在:手背部手腕部等幼兒可采用頸外靜脈采血。采血器材:一次性注射器,檢驗用真空定量采血裝置c.采血步驟及注意事項兩種采血方法的優(yōu)缺點比較毛細血管靜脈血缺點限制了重復實驗和追加實驗,標本量少,局部炎癥可得
4、假結(jié)果,組織液可混入不同抗凝劑的使用,改變血液性質(zhì),影響有形成分的形態(tài)優(yōu)點價廉、快速、操作簡便,標本可直接測定標本代表性大,無組織液影響,適于臨床研究,可重復實驗和追加其他實驗常用血液標本抗凝劑及其使用選擇1、檸檬酸鈉(枸櫞酸鈉)a.抗凝原理:螯合鈣離子使用方法配成109mmol/L的濃度和血液1:9106mmol/L的濃度和血液1:4化學名:3-羥基-3-羧基戊二酸(三鈉鹽)c.適用范圍:止血學檢驗、血沉、輸血保養(yǎng)液(毒性?。?.草酸鈉(乙二酸的鈉鹽)a.抗凝原理:草酸鈣沉淀b.使用方法草酸鈉0.1mol/L和血液1:9c.適用范圍:止血學檢驗3.雙草酸鹽抗凝劑a.抗凝
5、原理:草酸鈣沉淀使用方法:草酸鉀0.8g,草酸銨1.2g(100ml)與血液1:10(80°C以下烘干)適用范圍:紅細胞檢驗(紅細胞比積、計數(shù))不適于血小板計數(shù)和白細胞分類計數(shù)4.肝素(含硫酸基團的粘多糖)抗凝原理:低濃度時抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之間的作用,加強抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶,從而阻止凝血酶形成,還能抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用;高濃度時阻斷凝血酶和纖維蛋白的反應。b.適用方法:1g/L濃度的肝素鈉與血液1:10優(yōu)點:抗凝能力強、不影響血細胞體積、不易溶血、能耐高溫。適用范圍:紅細胞檢驗(紅細胞計數(shù)、血紅蛋白測定、紅細胞比積)和多種生化分析5.乙二胺
6、四乙酸(EDTA)鹽a.抗凝原理:螯合鈣離子b.使用方法:15g/L濃度EDTA和血液1:10適用范圍:對血細胞形態(tài)影響小---血小板計數(shù);影響血小板聚集和白細胞吞噬功能---不易做止血學檢驗及血小板功能檢驗。物理方法抗凝:脫纖維蛋白:將血液注入有玻璃珠的器皿中,轉(zhuǎn)動,纖維蛋白纏繞凝固于玻璃球,從而防止血成凝塊。適用于免疫學檢驗和紅斑性狼瘡細胞檢查。血涂片的制備技術血涂片的用途:血細胞形態(tài)學檢驗、網(wǎng)織紅、異常寄生蟲檢驗。2.血涂片制備步驟:(手工推片法)將推玻片向1的方向稍抽回,當血液充滿推玻片的寬度后,以一定均勻的速度向2的方向滑動。3.血涂片質(zhì)量評價:均勻、厚薄、頭體尾
7、、邊緣、兩側(cè)注意:血滴大,速度快、角度大----血膜厚細胞染色技術染料---生物學染色劑:將生物組織細胞和病原體染色,在顯微鏡下觀察結(jié)構(gòu)。(一)、染料(天然染料和人工染料)發(fā)色基團和助色基團使生物學染色劑產(chǎn)生顏色和被染組織親合。堿性染料:為陽離子染料,能接受質(zhì)子,染細胞核的染料。如亞甲藍、天青。酸性染料:為陰離子染料,能釋放質(zhì)子。主要有熒烷-氧雜蒽染料和偶氮染料兩類,能結(jié)合細胞的堿性成分并染色,如血紅蛋白、嗜酸性顆粒成分等。3.復合染料:同時具有陰、陽離子型的染料如瑞氏染料(二)、細胞染色原理:一般以它們的物理現(xiàn)象