槐米中蕓香苷提取分離及檢識

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1、槐米中蕓香苷提取分離及檢識實(shí)驗(yàn)原理：1.蕓香苷分子中含具有酚羥基，能與堿成鹽而溶于堿液中，加酸酸化后又可沉淀析出，可用堿溶酸沉法提取蕓香苷。2.在熱水中溶解度大,冷水中溶解度小，采用沸水提取法。蕓香苷的精制可根據(jù)其在冷、熱水（或冷、熱乙醇）中溶解度相差懸殊的性質(zhì)進(jìn)行。3.蕓香苷可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，并可通過色譜及化學(xué)反應(yīng)鑒定。冷熱溶解度差別大，可在酸水中發(fā)生水解。含有糖，極性大。冷、熱水中均不溶解，不含有糖，極性小于蕓香苷。蕓香苷的提取稱取槐米粗粉20g（壓碎），置于500ml燒杯中，加0.4%硼砂水溶液200ml，在攪拌下加入石灰乳調(diào)至pH8～9

2、，加熱微沸30min，隨時(shí)補(bǔ)充失去的水分和保持pH8～9，趁熱用棉花濾過，殘?jiān)?50ml0.4%硼砂水溶液同法操作再提取20min，合并兩次濾液，用濃鹽酸調(diào)pH3～4，攪拌，靜置過夜（沉淀下來的是什么？）。蕓香苷的精制將上次實(shí)驗(yàn)靜置液減壓抽濾，在60～70℃烘干，得粗品蕓香苷，稱重，計(jì)算得率。將粗制蕓香苷懸浮于300ml蒸餾水中，煮沸至蕓香苷全部溶解，趁熱抽濾，濾液放冷析晶。蕓香苷冷熱溶解度差別大蕓香苷的水解將上次實(shí)驗(yàn)所得溶液抽濾，在60～70℃烘干，得精制蕓香苷。取精制蕓香苷1g，置250ml圓底燒瓶中，加入2%硫酸80ml，加幾粒沸石，加熱回流1h，瓶中渾濁液

3、逐漸變?yōu)槌吻宓淖攸S色液體，最后生成鮮黃色沉淀（為什么出現(xiàn)如此現(xiàn)象？）。放冷，抽濾，丟棄濾液（應(yīng)為澄清無色液體），沉淀物為蕓香苷苷元（槲皮素），用蒸餾水洗至中性，抽干水分，烘干，稱重。得槲皮素。蕓香苷槲皮素葡萄糖鼠李糖蕓香苷蕓香苷的水解將上次實(shí)驗(yàn)所得溶液抽濾，在60～70℃烘干，得精制蕓香苷。取精制蕓香苷1g，置250ml圓底燒瓶中，加入2%硫酸80ml，加幾粒沸石，加熱回流1h，瓶中渾濁液逐漸變?yōu)槌吻宓淖攸S色液體，最后生成鮮黃色沉淀。放冷，抽濾，丟棄濾液（應(yīng)為澄清無色液體），沉淀物為蕓香苷苷元（槲皮素），用蒸餾水洗至中性，抽干水分，烘干，稱重。得槲皮素。槲皮素葡萄糖

4、和鼠李糖蕓香苷槲皮素葡萄糖鼠李糖蕓香苷和槲皮素的檢識色譜檢識：聚酰胺色譜化學(xué)檢識1.鹽酸-鎂粉反應(yīng)：黃酮2.三氯化鋁反應(yīng)：黃酮3.三氯化鐵反應(yīng)：酚羥基4.Molisch反應(yīng)：糖、苷類蕓香苷和槲皮素的色譜檢識樣品：自制1%蕓香苷乙醇溶液自制1%槲皮素乙醇溶液對照品：1%蕓香苷對照品乙醇溶液1%槲皮素對照品乙醇溶液色譜方法：聚酰胺色譜展開劑：乙醇:水:乙酸乙酯（3:1:0.5）約4ml，上行展開。展距：6cm。顯色劑：①在可見光下觀察斑點(diǎn)顏色，再在紫外燈下觀察斑點(diǎn)顏色。②用氨水熏，記錄斑點(diǎn)顏色和位置。結(jié)果：記錄圖譜，斑點(diǎn)顏色，并計(jì)算蕓香苷和槲皮素的Rf值。聚酰胺色譜法是

5、利用作為固定相的聚酰胺分子內(nèi)存在的許多酰胺基，能與酚類的羥基、酸類的羧基及醌類的醌基形成氫鍵而產(chǎn)生吸附，是混合物中各成分得到相互分離的方法。聚酰胺與各種化合物形成氫鍵的能力不同，決定了聚酰胺對其吸附力的強(qiáng)弱。形成氫鍵的能力首先與溶劑的種類有關(guān)，在水中最強(qiáng)，在有機(jī)溶劑中較弱，在堿性溶劑中最弱。在聚酰胺色譜中常用作洗脫劑的各種洗脫能力順序如下：水<甲醇或乙醇<丙酮<稀氫氧化鈉溶液或稀氨溶液<甲酰胺或二甲基甲酰胺<尿素水溶液與在含水溶劑中，化合物分子結(jié)構(gòu)對氫鍵締合的影響有關(guān)，大致如下：化合物分子中能形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目越多，被聚酰胺吸附越強(qiáng)。形成氫鍵的基團(tuán)所處位置不同，被吸

6、附的強(qiáng)度也不同。分子中芳香核、共軛雙鍵越多，被吸附強(qiáng)度越大?；衔锶裟苄纬煞肿觾?nèi)氫鍵，則被吸附強(qiáng)度減小。薄層色譜play