實驗十一水中細菌總數(shù)的測定

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1、實驗十一水中細菌總數(shù)的測定一、實驗目的1.學習水樣的采取方法和水樣細菌總數(shù)測定的方法。2.了解水源水的平板菌落計數(shù)的原理。二、實驗原理本實驗應用平板計數(shù)技術測定水中細菌總數(shù)。由于水中細菌種類繁多，它們對營養(yǎng)和其他生長條件的要求差別很大，不可能找到一種培養(yǎng)基在一種條件下，使水中所有的細菌均能生長繁殖，因此，以一定的培養(yǎng)基平板上生長出來的菌落，計算出來的水中細菌總數(shù)僅是一種近似值。目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。三、試劑與器材1.試劑：牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，滅菌水。2.器材：滅菌三角瓶，滅菌的帶玻璃塞瓶，滅菌培養(yǎng)皿，滅菌吸管，滅菌試管等。四、實驗內容1.水樣的采

2、取自來水：自來水龍頭灼燒3分鐘，放開水龍頭流5分鐘后接取水樣。桶裝水:待水流一段時間后接取水樣。湖水:取距水面10-15厘米出水樣。2細菌總數(shù)測定（1）自來水和桶裝水取1毫升注入無菌培養(yǎng)皿中做兩皿；倒入15毫升45的左右的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基后混合均勻；另取一空白培養(yǎng)皿做成空白對照；培養(yǎng)基凝固后倒置于37的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48小時后計數(shù)。（2）湖水或池水稀釋水樣:4.5毫升無菌水+0.5毫升水樣做梯度稀釋至10-3；取最后三個稀釋度的水樣1毫升注入2個無菌培養(yǎng)皿，然后倒入15毫升45的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基混合均勻；37恒溫培養(yǎng)24-48小時后計數(shù)。3菌落計數(shù)方法菌苔不

3、計數(shù)；首先選取菌落數(shù)在30-300之間稀釋度計數(shù)，平均菌落數(shù)乘于稀釋倍數(shù)即可；若有兩個稀釋度的平均菌落數(shù)均在30-300之間，按兩者比值決定：如小于2，取兩者平均數(shù)；如大于2，取其中菌落較小者；如都大于300，取稀釋度較高的平均菌落乘于稀釋倍數(shù)；如都小于30，取稀釋度最小的平均菌落乘于稀釋倍數(shù)；如都不在30-300之間，取最接近300或30的平均菌落乘于稀釋倍數(shù)。五實驗報告1結果P1832思考題P184（3）