水中細菌總數(shù)的測定.ppt

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1、實驗三水中細菌總數(shù)的測定一.實驗?zāi)康模?.學(xué)習(xí)水樣的采取方法和水樣細菌總數(shù)測定的方法；2.了解水源水的平板菌落計數(shù)的原則。二.實驗原理：本實驗應(yīng)用平板菌落計數(shù)技術(shù)測定水中細菌總數(shù)。由于水中細菌種類繁多，它們對營養(yǎng)和其他生長條件的要求差別很大，不可能找到一種培養(yǎng)基在一種條件下，使水中所有的細菌均能生長繁殖，因此，以一定的培養(yǎng)基平板上生長出來的菌落，計算出水中細菌總數(shù)僅是一種近似值。目前一般是采用肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。本實驗以普通肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，采用平板菌落計數(shù)技術(shù)來分別測定自來水和河水中的細菌總數(shù)。三、實驗操作1.水體取樣：應(yīng)取距水面10～15cm的深層水樣。先將滅菌的帶玻

2、璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻轉(zhuǎn)過來，除去玻璃塞，水立即流入瓶中，盛滿后，將瓶塞蓋好，再從水中取出。2.自來水取樣：打開自來水龍頭，讓水流流出1min左右，用燒杯接取自來水。3.將河水水樣分別稀釋成10-1、10-2、10-3三個連續(xù)稀釋濃度（注意：在稀釋前后一定要充分混勻）、自來水樣不稀釋。注意：河水樣的稀釋，取1個滅菌空試管，加入9mL滅菌水。用取過滅菌水的移液管取1mL河水樣，放入試管中，振蕩試管混合均勻。4.涂布平板法：1.加熱已經(jīng)配制好的固體培養(yǎng)基（肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基），使固體培養(yǎng)基溶化。2.倒制平板：每個空平皿中倒約20mL的培養(yǎng)基，放置桌面待其凝固。3.用移液

3、管吸取0.1mL水樣，滴于平板中；將玻璃涂布棒于酒精燈的外焰上加熱，殺死表面微生物，然后耐心待其冷卻，然后用涂布棒將水滴均勻的涂滿整個平板表面，盡量將水涂干。5.倒置于37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。6.菌落計數(shù)：1.挑取無片狀菌苔生長的平板作為計數(shù)平板，若片狀菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布很均勻時，可將此一半的菌落數(shù)乘2以代表全平板的菌落數(shù)。2.選擇平均菌落數(shù)在30～300之間的平板來計算該水樣的菌落總數(shù)。如果所有的平板的菌落總數(shù)都不在30—300范圍之內(nèi)，則取最靠近30—300的平板進行計數(shù)3.如果有兩個稀釋濃度的總菌落數(shù)落在了30—300范圍之內(nèi)，則先計算兩個濃

4、度下每ml水體中細菌總數(shù)，如果兩個數(shù)值的比值大于2則取小的濃度，如若小于2則取兩值的平均值。