自身抗體譜臨床解讀

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1、自身抗體譜臨床解讀1概述自身抗體:指針對自身細胞內(nèi)、細胞表面和細胞外抗原的免疫球蛋白,見于多種風濕性疾病,尤其在彌漫性結締組織病中更為常見,對臨床風濕病診斷意義重大。目前用于臨床的常見自身抗體有抗核抗體譜、抗中性粒細胞胞漿抗體、抗磷脂抗體、類風濕因子、抗線粒體抗體等。2抗核抗體譜抗DNA抗體抗核糖體P抗體抗組蛋白抗體抗ENA抗體抗Sm抗體抗U1RNP抗體抗Ro/抗SSA抗體抗La/抗SSB抗體肌炎特異性抗體(MSA)抗合成酶抗體抗SRP抗體抗Mi2抗體與系統(tǒng)性硬化相關的抗體抗拓撲異構酶1抗體抗著絲點抗體(動粒)抗核

2、仁抗原的抗體抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體C-ANCAP-ANCA抗磷脂抗體狼瘡抗凝物抗心磷脂抗體β2糖蛋白抗內(nèi)皮細胞抗體類風濕關節(jié)炎相關抗體類風濕因子(RF)抗CCP抗體抗核周因子抗體自身免疫性肝病相關抗體SMA,LKM,SLA,AMA,Sp100,gp210等3自身抗體的臨床意義自身抗體在CTD中有特殊意義疾病的篩選具有診斷意義的標記與病情及預后相關與某些臨床表現(xiàn)相關與疾病的發(fā)病機制有關評估風濕性疾病重要的參數(shù)之一研究疾病的重要方向之一4自身抗體檢測方法間接免疫熒光法(IF):不溶性成分酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA);放射

3、免疫法(RIA);對流免疫電泳法(CIE);免疫雙擴散法(ID);免疫印跡法:針對可溶性成分(如ENA、DNA、凝血因子、補體)5抗核抗體(AntinuclearAntibody,ANA)傳統(tǒng)定義:將針對細胞核內(nèi)成分的抗體稱為ANA。 現(xiàn)在對ANA靶抗原的理解已從細胞核擴大到整個細胞。 是指抗核酸(nucleicacid)和核蛋白(nucleoprotein) 抗體的總稱。6ANA測定原理和方法:間接免疫熒光法(IIF):現(xiàn)多以Hep-2細胞(人喉癌上皮細胞)為底物(Ag),其以核質(zhì)豐富而極大地提高了ANA檢測的陽

4、性率和滴度。是系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的標準篩選試驗。我們實驗室采用歐蒙熒光檢測系統(tǒng),將1:100作為血清起始稀釋度,所以如果是低滴度的1:100陽性,只能視為一個臨界可疑值,臨床意義不大。ANA作為自身免疫性結締組織病的篩選試驗必須強調(diào)高滴度。7ANA的意義ANA(+)結果的出現(xiàn)率取決于以下因素:分析系統(tǒng):由于不同廠家ANA檢測系統(tǒng)的起始稀釋度和稀釋因子不同,因而不同廠家的ANA滴度結果不能直接進行比較。區(qū)分血清(+)與(-)的選定的滴度值,未加稀釋的正常人血清可有1/3的呈陽性ANA反應。是SLE獨立的診斷條件

5、之一。滴度本身與疾病的活動度并不相關,沒有評價預后的意義。篩查風濕病,敏感性高。ANA(+)可出現(xiàn)在多種情況下,特異性差。8ANA(+)的原因風濕性疾病SLE多發(fā)性肌炎干燥綜合征硬皮病血管炎RA正常的健康人女性>男性,出現(xiàn)率隨年齡而增加風濕性疾病患者親屬?孕婦藥物誘導慢性肝臟疾病慢性肺部疾病慢性感染血液系統(tǒng)異常惡性腫瘤9SLE患者使用IIF法測定ANA陰性的一些解釋技術方面臨床方面經(jīng)皮質(zhì)激素或免疫抑制劑治療。終末期腎病。隱蔽ANA:與循環(huán)中免疫復合物結合,沉積于組織。由于大量蛋白尿而從腎臟丟失。10ANA的熒光染色

6、型別細胞核:核均質(zhì)型(DNA、組蛋白和核小體等)核顆粒型(Sm、uRNP、SS-A、SS-B、Ku、I和Ⅱ型周期蛋白)核膜型(板層素、gp120等)核仁型(SCL-70、PM-SCL、RNA多聚酶、原纖維蛋白等)核漿點型(著絲點、核多點及核少點型)細胞漿:胞漿顆粒型(線粒體、Jo-1、核糖體等)胞漿纖維型:波形蛋白、原肌球蛋白和肌動蛋白等分裂期細胞陽性:紡垂體、中間體、中心體等根據(jù)產(chǎn)生的熒光模型、靶抗原的分布部位分類如下:11核顆粒型:核粗顆粒型12抗核抗體染色類型核仁型(nucleolar)13均質(zhì)性(homog

7、eneous)14斑點型(speckled)15ANA的熒光類型ANA試驗的結果中一般會報告其分型,這些分型可能與某一特定的抗原反應活性相關。分型相關疾病核仁型硬皮病著絲點型CREST綜合征周邊型SLE斑點型/彌散型混合性結締組織?。∕CTD)16ANAs的分類:抗DNA抗體抗組蛋白抗體抗非組蛋白抗體抗著絲點抗體:抗核小體抗體17抗DNA抗體已確認出兩大類抗體特異性:天然的雙鏈DNA(dsDNA):對診斷SLE特異性高變性的單鏈DNA(ssDNA)多數(shù)實驗室采用以下方法進行測定:放射免疫分析法(RIA,F(xiàn)arr分析

8、法):定量酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA):定量間接免疫熒光法(IIF,短膜蟲法):半定量抗體水平與疾病活動度相關,隨著疾病活動的控制,抗dsDNA抗體滴度可以下降或消失??筪sDNA抗體與SLE腎損傷有關:DNA形成免疫復合物在腎小球基底膜沉積,或抗dsDNA抗體直接作用于腎小球抗原。強烈提示其致病作用。18抗核糖體P抗體(又稱為:抗rRNP抗體)針對3磷蛋白

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