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《中藥多糖的提取、分離純化及其含量測定方法研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、中藥多糖的提取、分離純化及其含量測定方法研究摘要：中藥多糖的提取、分離純化及其測定方法的有效研究，一方面能夠憑借完善的制備流程，增強傳統(tǒng)中藥在藥效方面的制藥水準，以此完善臨床醫(yī)療體系的構(gòu)建；另一方面則能夠憑借多糖提取的措施，鞏固中藥在降血脂、降血糖、抗衰老等方面的效果。本文基于中藥多糖的提取方法分類深入研究,在明確分離純化與含量測定方法的同時，期望能為后續(xù)中藥醫(yī)療體系的構(gòu)建提供良好參照。關(guān)鍵詞：中藥多糖；提??；分離純化；含量測定；方法分析1中藥多糖的提取分析1.1溶劑提取法溶劑提取法是從植物組織中提取多糖的常見方
2、法，其中利用了多糖不容于乙醇的性質(zhì)，將多糖從植物組織中沉淀出來，以達到初步純化的目的。根據(jù)溶劑選擇的不同，可分為以下幾種方法：(1)水提純沉法水提純沉法是根據(jù)多糖大分子化合物的特性，選擇水與醇等極性強的溶劑。期間可用熱水與冷水兩種浸提方法，而后再將提取液弄錯，待加入乙醇后便能將多糖從提取液中沉淀出來。其中，多糖提取率與水用量、提取溫度、固液比、提取時間與提取次數(shù)等具備關(guān)聯(lián)性。(1)酸提法此種方法是在水提純沉法的基礎(chǔ)上，為提升多糖提取率而提供的方法。期間，酸提法應當嚴格控制酸度，以便在酸性較強的環(huán)境中避免多糖中糖昔
3、鍵斷裂，所以除弱酸外，一般強酸不適用于酸提法。另外，此種方法的提取時間宜短，且溫度最好保持在50度以下。(2)堿提法部分多糖在堿液中具備更優(yōu)異的提取率，為避免在酸性溶液中造成多糖損失，通常堿提法會防止多糖降解，并加入氮氣或硼氫化鈉等藥品，以此控制堿性濃度，避免堿性較強發(fā)生多糖水解狀況。1.2酶解法提取(1)單一酶解法單一酶解法是指使用單種酶對多糖進行提取，以確保提取率有效提升，同時排除多余元素干擾的狀況。其中，經(jīng)常使用的試劑有蛋白酶與纖維素酶等。(2)復合酶解法復合酶解法是通過一定比例的纖維素酶、蛋白酶與果膠酶混
4、合提供的溶劑，在此種溶劑使用期間，能夠使植物組織細胞的細胞壁劈裂，釋放出細胞壁內(nèi)活性多糖，而后再與復合酶溶液反應，確保多糖被有效提取。此種酶解法與溶劑含量、酶解溫度、酶解時間、PH值等數(shù)據(jù)有直接影響。1.3物理強化法(1)微波提取法微波提取法是根據(jù)不同物質(zhì)吸收微波能力差異性，促使植物萃取體系中某些組分被加入，以此從物質(zhì)體系中被分離，融入萃取劑環(huán)境中，以此實現(xiàn)多糖提取的目的。比較溶劑與酶解法而言，微波提取法不宜造成多糖損失，且環(huán)境影響干擾較低。(2)超聲提取法超聲波是通過機械效能增加介質(zhì)運動，促使生物細胞組織破碎，
5、從而將多糖成分融入溶劑內(nèi)，再利用空化效應將多糖析溶出，以此確保多糖提取有效，且生物活性能夠保持不變。此種方法在提取時間方面具備效率性優(yōu)勢，且多糖提取率較高。2中藥多糖的分離純化分析2.1除蛋白分析中藥多糖中除蛋白的分離純化方法中包括三氟三氯乙烷法、酶解法、三氯乙酸法與具備氯仿有機溶劑變性特點的Sevage法。其中，Sevage法除蛋白效果良，且實驗方法簡單便捷，但無法有效去除多糖中的脂蛋白。期間，有實驗以三氯乙酸法與Sevage法進行比照分析，可知三氯乙酸法在脫蛋白質(zhì)方面的效果優(yōu)于Sevage法，且多糖損失率較低
6、。2.2脫色分析脫色反應是指在重要多糖提取過程中，由于氧化反應會導致有色素生成，從而依據(jù)有色素的含量會影響多糖色譜分析與性質(zhì)測定的準確性。故而，在分離純化過程中，脫色工藝流程是非常重要的處理步驟。2.3多糖分解多糖分解在現(xiàn)階段實驗環(huán)境中，有分級沉淀法、金屬鹽沉淀法、色譜分離法、膜分離法、電滲析法、超濾法等多種分解方法。目前在中藥多糖分離純化過程中，多采用凝膠柱層或離子交換色譜法兩種形式。3中藥多糖的含量測定方法3.1比色法比色法包括咔哩一硫酸法、恵酮-硫酸法和苯酚一硫酸法測定多糖含量。目前比色法已廣泛應用于多糖含
7、量測定，特別是苯酚-硫酸法和蔥酮-硫酸法應用最廣。其原理是根據(jù)多糖在硫酸的作用下水解成單糖分子，并迅速脫水生成糖醛衍生物，再將其與苯酚或恵酮縮合成有色化合物，在適當波長下和一定濃度范圍內(nèi)，吸收值與糖濃度呈線性關(guān)系，從而可比色測定其含量。3.2滴定法滴定法是多糖經(jīng)乙醇沉淀分離后，加酸、加熱水解成單糖,以次甲基蘭等做指示劑，滴定經(jīng)標定過的堿性酒石酸銅溶液，根據(jù)樣液消耗的體積，計算其含量。本方法需在沸騰狀態(tài)下滴定，溫度和滴定速度對結(jié)果影響較大，且本法是一種還原滴定法，不能排除還原糖的干擾。后來陸續(xù)有人報道采用間接碘量法
8、測定多糖的含量。間接碘量法可消除樣品中還原性雜質(zhì)對多糖含量測定的干擾，所測結(jié)果更接近實際多糖含量。如某實驗中采用高猛酸鉀滴定法測定多糖含量，還原劑為斐林試劑，滴定劑為0.02mol/L高猛酸鉀，并進行方法專屬性考察。結(jié)果為陰性對照試驗相對標準差為4.6%,精密度試驗相對標準差為3.9%,平均回收率為102.8%。得出結(jié)論本方法簡單、準確，精密高、重現(xiàn)性好，可用于肝速康膠囊
