樺褐孔菌袋料栽培初探

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1、萬方數(shù)據(jù)食用苗EDIBLEFUNGI2007(4)樺褐孔菌袋料栽培初探+孫勇蔣繼宏”陳鳳美(徐州師范大學(xué)省藥用植物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇徐州221116)摘要采用不同培養(yǎng)基對(duì)樺褐孔菌進(jìn)行人工馴化栽培，其中3種配方可得到其菌核，并以樺木屑培養(yǎng)基產(chǎn)量最高，平均于重為17．24g，生物學(xué)效率為3．83％，同時(shí)對(duì)人工菌核和野生菌核的體外抗肺癌細(xì)胞NcI—H460的活性進(jìn)行了測(cè)定。關(guān)鍵詞樺褐孔菌栽培技術(shù)文章編號(hào)1000-8357(2007)04—00“一02樺褐孔菌[，加·腫沁06蜘uw(Fr．)Pdat]為多孔菌科(Po咖。一rnce回褐臥孔菌屬(P0

2、r誼^印06m脅eoPe把矗)的藥用真菌，是一種具有開發(fā)前景的藥用真菌【l’2捌；由于其獨(dú)特的藥用價(jià)值，人為采集頻繁，野生樺褐孔菌菌核越來越少，為達(dá)到持續(xù)利用的目的，我們對(duì)樺褐孔菌進(jìn)行了人工袋料栽培試驗(yàn)，取得了較好的效果闈。同時(shí)我們也對(duì)人工菌核和野生菌核的體外抗肺癌細(xì)胞活性進(jìn)行了分析比較。1材料與方法1．1供試樺褐孔菌菌株和腫瘤細(xì)胞株樺褐孔菌【，抽加t凇D62幻u泌∞．)Pdat】和肺癌細(xì)胞NCI—H460均由徐州師范大學(xué)省藥用植物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。1．2培養(yǎng)基(1)樺木屑培養(yǎng)基：樺木屑83％，麩皮(玉米粉)15％，蔗糖1％，石膏粉1％；②

3、棉子殼培養(yǎng)基：棉子殼80％，麩2結(jié)果與分析皮18％，蔗糖1％，石膏粉1％；③木屑棉子殼混合培養(yǎng)基：木屑40％，棉子殼33％，麩皮25％，蔗糖l％，石膏1％；④玉米芯培養(yǎng)基：玉米芯80％，麩皮18％，蔗糖1％，石膏粉1％。1．3發(fā)菌管理將4個(gè)處理配方按比例稱取培養(yǎng)料，各處理單獨(dú)配料，麩皮先同主料混勻，糖和石膏溶于水后加入培養(yǎng)料內(nèi)，料含水量控制在60％～65％，然后堆悶1—2h即可裝袋。栽培袋(高壓聚丙烯)規(guī)格17crr·)85cⅡ·×o．05cm，每袋裝料高18cm，干料重450g，套塑料頸圈，塞上棉塞，高壓蒸汽滅菌2h，接種后移入發(fā)菌室床架上黑暗

4、條件培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25cc。待菌絲生長至半袋時(shí)翻袋，去除雜菌感染袋，培養(yǎng)期間測(cè)量菌絲的生長速度和滿袋時(shí)間。1．4出核管理將快長滿菌絲的菌袋移入出菇房，白天提供400—6001)【的光照，配合通風(fēng)處理，使晝夜溫度變化在4～15℃。10～20d即可出現(xiàn)小菌核。菌核出現(xiàn)在袋內(nèi)的，能自行脹破菌袋，接種口生長的菌核能長出袋口。此時(shí)保持空氣濕度70％～75％，不能太高，可防止露出的菌核發(fā)霉，同時(shí)，要注意通風(fēng)，控制溫度在20～26℃。菌核生長的時(shí)間很長，可達(dá)一個(gè)至一個(gè)半月。由于菌核挖出后的菌袋很易污染，只能采摘1次，因而盡可能的讓菌核生長。試驗(yàn)中，菌袋中菌核的

5、采摘以生長時(shí)間為標(biāo)準(zhǔn)，菌核形成后45d采摘，采用隨機(jī)抽樣法對(duì)各配方形成的菌核進(jìn)行抽樣稱重。1．5菌核的處理和抗腫瘤活性測(cè)定方法將獲得的菌核烘干至恒重，稱量，取19，磨碎，乙醇浸泡7d后，過濾得醇提物，干燥后稱重。用DMSO溶解，測(cè)量的最終質(zhì)量濃度為100斗咖L，以同樣處理的野生樺褐孔菌菌核純提物為對(duì)照，進(jìn)行體外抗腫瘤活性測(cè)定，抗腫瘤活性測(cè)定采用體外細(xì)胞毒測(cè)定的M1Tr(Metllyl弧i北Dlyltetrazolium)法嘲。圖1人工培養(yǎng)的菌核和野生菌核圖2菌袋中正在生長的菌核2．1菌絲生長情況不同培養(yǎng)基配方各裝50袋，經(jīng)觀察，樺褐孔菌菌絲在4種

6、配方上都能正常生長，菌絲萌發(fā)吃料時(shí)間差異不明顯，但發(fā)菌滿袋時(shí)間有一定差異：其中，菌絲在棉子殼培養(yǎng)基中發(fā)菌最快，發(fā)滿袋的平均時(shí)間為37d；菌絲在樺木屑培養(yǎng)基發(fā)滿袋需50d，相差13d。+基金項(xiàng)目：江蘇省徐州師范大學(xué)?；痦?xiàng)目，編號(hào)：06)【】上20。++通訊作者。電話：0516—83403515；e—n18il：jhji∞g@)(znu．edu．cn。一44一表1不同培養(yǎng)基對(duì)樺褐孔菌絲生長和菌核形成狀況的影響塒陲平惹警黼蝴蝴僦萬方數(shù)據(jù)食用曹EDⅡILEFUNGI2007(4)2-2菌核產(chǎn)量每個(gè)處理隨機(jī)抽取無雜菌污染的茵袋10袋，將菌核挖出后，烘干至

7、恒重，稱量，結(jié)果見表2。各培養(yǎng)基問菌核平均于重相差不大，差異不顯著，生物學(xué)效率分別為3．83％、3．68％和3．5％。表2不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的樺褐孔菌菌核產(chǎn)量倌2．3不同培養(yǎng)基產(chǎn)生的菌核醇提物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用通過姍’法測(cè)定，各不同培養(yǎng)基獲得的菌核醇提物(劑量：100斗咖L)的對(duì)肺癌細(xì)胞NCI—H460抑制率為：野生菌核75．5％，樺木屑培養(yǎng)基得到的菌核54．5％，棉子殼培養(yǎng)基木屑得到的菌核33．7％，木屑棉子殼混合培養(yǎng)基得到的菌核38．6％。由此可見，人工培養(yǎng)的菌核的腫瘤抑制活性成分比野生的菌核要差一些，但仍有較好的活性。3小結(jié)與討論3．1樺褐孔

8、菌的人工袋料栽培仍然存在一定的缺陷，例如菌核的生物學(xué)效率不高。3．2樺褐孔菌是一種藥用真菌，培養(yǎng)基種類對(duì)形成的菌核的活性成分有很大的影響