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1、均勻設(shè)計(jì):文案分析文案:李陸劉桂友,劉媾姝,楊奕,任利妍,喬衛(wèi).基于均勻設(shè)計(jì)法對酸棗仁鎮(zhèn)靜催眠有效組分的配伍研究[J].中草藥,2011,(7).一、摘要目的優(yōu)選酸棗仁中3種具有鎮(zhèn)靜催眠作用的主要有效纟fl分(總皂廿、總黃酮、…總生物堿)最佳配伍。方法采用均勻設(shè)計(jì)法將70只小鼠隨機(jī)分為7組,分別為對照組及給藥A?F組,觀察各纟F1小鼠自主活動情況;采用閾上劑量戊巴比妥鈉(45mg/kg)協(xié)同睡眠試驗(yàn),以小鼠的睡眠潛伏期和睡眠吋間為評價指標(biāo),篩選酸棗仁鎮(zhèn)靜催眠冇效組分的最佳配伍。對所得有效組分最佳配伍的藥效進(jìn)行比較和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。結(jié)果與對照組比較,給藥A
2、、C、E組小鼠自主活動減少(PV0.05、0.01),C、D組小鼠站立次數(shù)略有減少(X0.05)。在閾上劑聚戊巴比妥鈉協(xié)同試驗(yàn)中,給藥組C?F睡眠潛伏期顯著縮短(/yo.oi),B?F組睡眠時間顯著延長(/yo.oi)。經(jīng)多元統(tǒng)計(jì)分析,酸棗仁鎮(zhèn)靜催眠有效組分的最佳配伍組合為總皂甘200mg/kg、總黃酮0mg/kg、總生物堿20mg/kgo結(jié)論丿應(yīng)用均勻設(shè)計(jì)與藥效學(xué)相結(jié)合確定屮藥有效組分配伍的方法是可行的。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明,酸棗仁有效紐分的最佳配伍組合可以達(dá)到與原藥材相同的療效。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)因素及其水平3個因素:總皂廿、總黃酮、總生物堿“以文獻(xiàn)報道的有
3、效劑量為依據(jù),分別確定劑量范圍為總生物堿5?20mg/kg、總黃酮10?50mg/kg、總皂昔20?200mg/kg?!坝捎诒菊n題組前期研究已確定酸棗仁總生物堿具有明顯的鎮(zhèn)靜催眠作用,為進(jìn)一步考察總黃酮、總皂昔與總生物堿是否存在鎮(zhèn)靜催眠的協(xié)同作用,故將總黃酮和總皂昔的初始劑量設(shè)為0mg/kgo”每個因素6個水平。表1因素水平表水平13素總生物堿(mg/kg)總黃酮(mg/kg)總皂昔(【ng/kg)15002810203112065414301105174015562050200均勻設(shè)計(jì)表t/*(64)5=3(前三列)實(shí)驗(yàn)次數(shù)達(dá)到因素?cái)?shù)口的2倍。表
4、2.1均勻設(shè)計(jì)表實(shí)驗(yàn)號1234112362246533624441535531266541表2.2使用表S列號D2130.144531230.2656412340.2990實(shí)驗(yàn)安排ICR小鼠80只,隨機(jī)分為8組,每組10只;按表3設(shè)計(jì)的劑雖ig(灌胃)給藥,同時設(shè)對照組和解郁安神顆粒(1.25g/kg)陽性對照組;給藥體積為10mL/g,每日1次,連續(xù)給藥6d。表3給藥方案組別總生物堿(mg/kg)總黃酮(irig/kg)總皂甘(nig/kg)AL51065B830200C115020D140155E17200F2040110對照組—陽性對照組解郁
5、安神顆粒l?25g/kg實(shí)驗(yàn)指標(biāo)(藥效評價)?小鼠自主活動實(shí)驗(yàn)活動次數(shù)、站"次數(shù)“各組小鼠于給藥第5天后0.5h,按標(biāo)號順序分別單獨(dú)放入隔音箱內(nèi),以自主活動測試儀自行記錄其活動情況。每只小鼠均先在自主活動儀中適應(yīng)4min,記錄隨后5min內(nèi)小鼠自主活動及站立次數(shù)?!?閾上劑雖戊巴比妥鈉協(xié)同實(shí)驗(yàn)睡眠潛伏期、睡眠時間"各組小鼠于給藥第6天,ig給藥0.3h后ip(腹腔注射)給予閾上劑量(45mg/kg)戊巴比妥鈉。注射后開始計(jì)時,記錄睡眠潛伏期及睡眠時間。以翻正反射消失時為睡眠起始時間,翻正反射恢復(fù)為睡眠結(jié)束時間。ip給藥后至睡眠起始這段時間為睡眠潛伏
6、期,潛伏期超過]5min,按15min記錄。"實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)以x±s表示,n=10表4小鼠自主活動實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別活動次數(shù)站立次數(shù)A13.00±5.3352.92±20.01B13.60土5.8742.25±26.16C12.91±4.8339.78±18.89D15.13±3.3136.25±8.24E10.89±4.8837.25+11.83F16.00±5.8339.25+14.54對照組18.29±4.3156.43+11.90陽性對照組16.00±5.1246.70±20.34表5閾上劑量戊巴比妥鈉協(xié)同實(shí)驗(yàn)組別睡眠潛伏期/S睡眠時間/minA8
7、20.08±158.0717.08±24.84B690.75±249.9936.50±26.61C562.83±166.3236.42±21.26D511.91±202.1138.54±25.56E587.91±164.3930.18±11.11F539.00±153.2036.45±22.84對照組812.40±148.788.90±12.03陽性對照組763.31±151.2431.10±13.25三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析雙樣本t檢驗(yàn)分別對各實(shí)驗(yàn)組,考察各實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的均值與對照組比較是否冇顯著差異。?對小鼠自主活動的彩響:給藥A、C、E組小鼠口主活動次數(shù)
8、與對照組比較,略有減少,差弄具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05、0.01)o給藥D、E組站立次數(shù)與對照紐比較稍有減少,差異存在統(tǒng)