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《正交設(shè)計優(yōu)選益腎壯腰片提取工藝》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、正交設(shè)計優(yōu)選益腎壯腰片提取工藝正交設(shè)計優(yōu)選益腎壯腰片提取工藝摘耍目的:篩選并優(yōu)化益腎壯腰片提取工藝。方法:以干膏得率和提取物中補骨脂索及異補骨脂索含量為考察指標(biāo),采用正交設(shè)計多指標(biāo)綜合評分法優(yōu)化提取工藝。結(jié)果:通過正交試驗優(yōu)化確定的提取條件為:藥材飲片第一次以10倍水,第二次8倍,提取2次,每次eOmino結(jié)論:優(yōu)化得到的提取工藝合理、穩(wěn)定、可行。關(guān)鍵詞正交設(shè)計補骨脂素異補骨脂素益腎壯腰片是廣東第二中醫(yī)院院內(nèi)制劑,由杜仲、桑寄生、補骨脂等十三味藥組成,具有補益肝腎,活血通絡(luò)等功效,主治腎虛所致腰膝疼痛,腰肌勞損,肢節(jié)屈伸不利。補骨脂又
2、名破故紙,為豆科植物補骨脂PsoraleacorylifoliaL?的干燥成熟果實。除東北、西北地區(qū)外全國各地均產(chǎn),生長于溫暖地帶。栽培或野生,其性溫,味辛。補骨脂作為本方君藥,具補腎助陽、固精縮尿、溫脾止瀉之功效。因此,將補骨脂中補骨脂素和異補骨脂素含量總和作為指標(biāo)性成分,結(jié)合提取工藝浸膏得率為考察指標(biāo),采用正交試驗設(shè)計對其提取條件優(yōu)選,為生產(chǎn)工藝參數(shù)的確定提供依據(jù)。1儀器與試藥Agilent1200高效液相色譜儀:G1316A檢測器、G1312A二元泵、G1329A柱溫箱、G2170A數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(Agilent,美國);XS20
3、55分析天平(梅特勒,瑞士),藥材飲片(廣州致信藥業(yè)有限公司,批號20100108),補骨脂素對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號:110738-200811),異補骨脂索對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號:110739-200812).水為超純水,甲醇為色譜純,其余試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1干膏得率的測定方法取各正交實驗號濃縮液10ml于干燥蒸發(fā)皿中水浴蒸干,照干燥失重測定法(中國藥典2010年版一部附錄IXG)測定,計算干膏得率。2.2補骨脂素和異補骨脂素含量測定2.2.1對照品制備:利用分析天平精密稱取已干燥的補骨脂素
4、對照品1.08mg和異補骨脂素對照品1.12mg置50ml容量瓶,甲醇溶解定容至50ml,即補骨脂素為0.216mg/ml,異補骨脂素為0.223mg/mlo2.2.2樣品制備及測定:取各正交實驗號濃縮液5ml,置干燥蒸發(fā)皿中80°C水浴蒸干,甲醇溶解定容至50mlo同法制備陰性樣品。2.2.3色譜條件:色譜柱:ZORBAXEclioseXDB-C18柱(4.6X150mm,5Ixm);流動相:甲醇:水(45:55);檢測波長246nm,柱溫25?C。將補骨脂素和異補骨脂素對照品分別進樣,2、3、4、5、6、8、10ul,由圖1補骨脂
5、素和異補骨脂素在該色譜條件下分離效果良好,其中補骨脂素在43.2-216ng范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,回歸方程為:Y=8.89033656X-11.978077,r=0.99987(見圖4);異補骨脂素在44?6?223ng范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,回歸方程為:Y二9.90464316X-14.750634,r=0.99981(見圖5)。將陰性樣品和待測樣品進樣檢測,結(jié)果表明,陰性樣品色譜在補骨脂素和異補骨脂素相應(yīng)的保留時間上無色譜峰(見圖3),樣品補骨脂素和異補骨脂素樣品屮色譜峰分離度良好(圖2)。2.2吸水率考察按處方稱取的紗材,加10倍量的
6、水浸泡,每隔1個小時觀察…次浸透心情況,直至藥材全部浸透,濾過,量取濾液體積,計算藥材吸水率,求得藥材吸水率為178.1%。2.3正交設(shè)計優(yōu)選提取工藝益腎壯腰片采用水煎煮提取工藝,在單因素試驗考察的基礎(chǔ)上,采用正交試驗優(yōu)化提取工藝,選取加水量(A),提取次數(shù)(E),提取時間(c),作為考察因素,各取三水平,進行L9(34)正交試驗,篩選最佳工藝條件,因素水平表見表1。補骨脂作為方中君藥,補骨脂素和異補骨脂素為其主要成分,本試驗以高效液相法測定提取液中補骨脂素和異補骨脂素的含量,作為評價指標(biāo)之一,權(quán)重系數(shù)定為0.6;而作為有效成分煎出間
7、接控制的一個指標(biāo),藥效物質(zhì)提取的多少以干膏得率為考察指標(biāo)。權(quán)重系數(shù)定為0.4,以兩指標(biāo)的結(jié)果進行綜合評分。試驗吋按處方量稱取藥材、飲片,按正交試驗設(shè)計各實驗號進行提取,濾過,濾液減壓濃縮,定容至250ml,備用。分別按2.2項下方法測定干膏得率、補骨脂素及異補骨脂素含量,采用以下公式:Y二(40/得膏率max)X得膏率+(60/(補骨脂素+異補骨脂素)max)X(補骨脂素+異補骨脂素)含量進行綜合評分,用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,對評分結(jié)果作直觀分析和方差分析,以判斷各因素對提取效果的影響程度,篩選出在該試驗條件下最優(yōu)的提
8、取條件,試驗安排及結(jié)果見表2,方差分析結(jié)果見表3。由直觀分析可知?影響提取工藝效果的因素順序為:提取吋間(B)>提取次數(shù)(c)>加水量(A),最佳工藝組合為A182C2O方差分析結(jié)果顯示,提取次數(shù)和提取吋間均對提取結(jié)果具