正交設(shè)計(jì)優(yōu)選蜂膠提取工藝研究

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1、陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)Journalof5haanxiCollegeofTraditionalChineseMedicineVol.28.No.1.2005.1正交設(shè)計(jì)優(yōu)選蜂膠提取工藝研究王萍1張寧1白智華1指導(dǎo):趙海2王昌利2(1.陜西中醫(yī)學(xué)院研究生，陜西咸陽(yáng)712083;2.陜西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系，陜西咸陽(yáng)712083)摘要:目的考察蜂膠最佳提取工藝。方掛以總黃酮含量、浸膏得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選蜂膠最佳提取工藝?？莨易碛昧繉?duì)蜂膠總黃酮的提取有顯著性影響;提取時(shí)間對(duì)浸青得率有顯著性影響。祛格蜂膠最佳提取工藝條件為8倍量70%乙醇，溫浸2次，每次1小時(shí)。關(guān)鍵詞:蜂膠

2、;總黃酮;正交設(shè)計(jì)中圖分類號(hào):R284.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1002一168X(2005)O1一0034一02蜂膠是蜜蜂采集植物芽抱和樹干上的樹脂，并根據(jù)蜂膠理化性質(zhì)知水提取效果差，適用乙醇混人其上顆腺分泌物及蜂蠟等的一種膠狀天然活為溶劑提取，選擇乙醇濃度、提取時(shí)間、提取次數(shù)、性物質(zhì)。臨床上具有抗菌、消炎、抑制病毒、鎮(zhèn)痛、乙醇用量作為考察因素，以蜂膠總黃酮含量，浸膏促進(jìn)組織再生、抗癌、增強(qiáng)肌體免疫功能等作用，還得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)。因素水平安排見表to可以作為食品天然防腐劑，被廣泛應(yīng)用于藥品、食表1因素水平表品和化妝品等領(lǐng)域?！病?。蜂膠的主要功能成分為A乙醉B提取C

3、提取D乙醉水平濃度(%)時(shí)iii](h)次數(shù)(次)用量(倍)總黃酮，故本文以總黃酮含量、浸膏得率為評(píng)價(jià)指弓土了0011jl8標(biāo)，對(duì)蜂膠提取工藝進(jìn)行優(yōu)選。，70，一、勺10曰人-葉‘1.儀器與試藥八只02內(nèi)120﹂U1.1儀器751型分光光度計(jì)(上海分析儀器廠)2.2總黃酮測(cè)定1.2試藥2.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:[2l蘆丁對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所);蜂膠精密稱取干燥至恒重蘆丁對(duì)照品43.5mg于(經(jīng)本院生藥教研室雷國(guó)蓮教授鑒定為真品);以下50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。精密移取試劑均用分析純配制:2.5%三氯化鋁溶液、1%醋10m1于100ml量瓶中，用水

4、稀釋至刻度。此溶液酸鉀溶液、60%乙醇溶液。每毫升含蘆丁871Ltg.2.方法與結(jié)果分別精密吸取87[cg"ml-1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0.012.1正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.Oml于7個(gè)25ml量瓶2.4.1處方土貝母皂昔0.5克、二甲基亞礬貝母皂昔注射液的副作用，研制了土貝母皂昔乳14毫升、三乙醇胺1.6克、甘油4.0克、蒸餾水54劑，并對(duì)乳劑的影響因素進(jìn)行了試驗(yàn)研究。毫升、羊毛脂2.0克、白凡士林10克、硬脂酸163.2通過(guò)試驗(yàn)研究得到較理想的處方配制用克。經(jīng)試驗(yàn)結(jié)果確定上述配方。量，為推廣應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。2.4.2配制方法稱取土貝母皂昔溶

5、于熱的3.3本品為一個(gè)穩(wěn)定的乳劑，在配制過(guò)程應(yīng)注蒸餾水中，加人二甲基亞諷、三乙醇胺、甘油等水相意溫度和攪拌速度，其速度對(duì)乳劑的均勻、外觀有部分，攪勻，加熱至70℃加人防腐劑，另將羊毛脂，較大的影響。白凡士林，硬脂酸加熱至70r-，然后在攪拌下將水參考文獻(xiàn):相加人油相中，攪拌，放冷，即得。Ill傅章才，趙更生，房益蘭，土貝母皂普的藥理學(xué)研究3.討論lil.陜西醫(yī)藥,1985,14(4):49-50.3.1土貝母皂昔具有抗病毒作用，對(duì)各種病毒【幻傅章才，徐漢卿，馮捷，等.消疵靈制劑治療各種沈的療效觀察〔1l.中草藥，1984,15(3):24.引起的慶類疾病有較強(qiáng)的治療效

6、果。為了消除土(收稿日期:2004-09-28)萬(wàn)方數(shù)據(jù)陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2005年第28卷第1期中，各加乙醇5ml,2.5%三氯化鋁溶液3m1,1%醋進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表3、表40酸鉀溶液5ml用水稀釋至刻度，搖勻，放置30min,表3總黃酮含童方差分析表以空白溶液作對(duì)照，于751型分光光度計(jì)415nm方差來(lái)源F值顯著性O(shè)D處測(cè)定吸收度，繪制濃度一吸收度曲線，得回歸方總變異7291A，3.9683~11.6509程A=0.03631+0.03362X(X為總黃酮微克數(shù))rB，6.︸17.6806C，=0.9999,0--21I.g"ml-1范圍內(nèi)線性良好。0.‘D2

7、2.2.2供試品溶液的制備:7.23.3064誤差(e=C)稱取蜂膠粉末約4g，精密稱定，共9份，按正F(2,2)0.05=19，表示P<0.05.交實(shí)驗(yàn)表(見表2)于70'C溫浸，過(guò)濾于100m1量瓶表4浸青得率方差分析表中，用乙醇洗滌殘?jiān)?，定容，吸?ml溶液置50m1方差來(lái)源SSF值顯著性量瓶，加乙醇溶液至刻度，搖勻，作為供試品溶液。00總變異6.6454A，2.2.3供試品含量的測(cè)定:1.2544山16.4181B，吸取供試品溶液5m12份，分別置于25m1量瓶4.4602︸58.8650C，0.0758︸中，1份加人2.5%三氯化鋁溶液3m