正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選夏枯草提取工藝的研究

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1、正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選夏枯草提取工藝的研究【摘要】目的優(yōu)選夏枯草的最佳提取條件。方法以齊墩果酸含量為指標(biāo),采用L3(34)正交實(shí)驗(yàn),對(duì)影響超聲提取的因素進(jìn)行優(yōu)選。結(jié)果最佳提取條件為乙醇濃度90%,用量20倍,時(shí)間40min。結(jié)論優(yōu)選夏枯草提取工藝穩(wěn)定、可行?!娟P(guān)鍵詞】夏枯草正交實(shí)驗(yàn)齊墩果酸StudiesontheOrthogonalExperimentforOptimizationofExtractionProcedureofPrunellavulgarisL.Abstract:ObjectiveTooptimizetheextractionprocessofPrunellavulgarisL..

2、MethodsTheextractionprocessofPrunellavulgarisLwasoptimizedbyL3(34)orthogonaltestwithCaryophyllinasindex,andwithconcentrationofalcohol,amountofalcoholandextractiontime.ResultsTheoptimalextractiontechnologywas0%alcohol,0timestheamountofherbmaterialwith0mins.ConclusionTheoptimalextractionprocessisst

3、eadyandreliable.Keywords:PrunellavulgarisL.;Orthogonaltest;Caryophyllin夏枯草為唇形科植物夏枯草PrunellavulgarisL.的干燥果穗,我國(guó)各地均產(chǎn),主產(chǎn)于江蘇、浙江、安徽、河南等地[1]。夏枯草臨床應(yīng)用廣泛,《中國(guó)藥典》中載有“清火,明目,散結(jié),消腫”[2]之功效,現(xiàn)代研究表明夏枯草還具有降血脂、降血糖、免疫抑制以及抗腫瘤等作用[3]。夏枯草中含有豐富的三萜類化合物,其中以齊墩果酸和熊果酸的含量最高?,F(xiàn)采用正交實(shí)驗(yàn)法,以齊墩果酸為指標(biāo),對(duì)夏枯草的提取條件進(jìn)行優(yōu)化選擇,為夏枯草的生產(chǎn)和應(yīng)用提供依據(jù)。  1儀器與

4、試藥日立高效液相色譜儀,DAD檢測(cè)器,EZChromElite色譜工作站;KQ-100A型超聲波清洗器;電子天平。夏枯草對(duì)照藥材及齊墩果酸對(duì)照品。甲醇為色譜純,其它試劑為分析純?! ?方法與結(jié)果夏枯草對(duì)照藥材粉末,60℃干燥至恒重,備用。.1提取方法選擇實(shí)驗(yàn).浸漬法取夏枯草藥材粉末1g,加95%乙醇20ml,浸漬2h,時(shí)時(shí)搖動(dòng),濾過(guò),濃縮干燥。.加熱回流法  取夏枯草藥材粉末1g,加95%乙醇20ml,加熱回流h,濾過(guò),濃縮干燥。.超聲法取夏枯草藥材粉末1g,加95%乙醇20ml,超聲30min,濾過(guò),濃縮干燥。取上述夏枯草提取物樣品,分別測(cè)定齊墩果酸含量,結(jié)果見(jiàn)表1。可見(jiàn),3種提取方法

5、中,以超聲法提取所得齊墩果酸含量最高,故選用超聲法對(duì)夏枯草藥材進(jìn)行提取。表1種提取方法的比較.2提取條件的正交實(shí)驗(yàn)以乙醇濃度、乙醇用量、提取時(shí)間為考察因素,每個(gè)因素各取3個(gè)水平。見(jiàn)表2。表2實(shí)驗(yàn)因素水平.3正交實(shí)驗(yàn)樣品中齊墩果酸的含量測(cè)定.色譜條件色譜柱為HypersilC18;流動(dòng)相為甲醇-水-冰醋酸;流速1ml/min;柱溫25℃;檢測(cè)波長(zhǎng)210nm。.對(duì)照品溶液的制備精密稱取齊墩果酸對(duì)照品適量,置10ml容量瓶中,加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度,制成含齊墩果酸mg/ml的溶液,作為對(duì)照品溶液。.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密量取齊墩果酸對(duì)照品溶液,1,2,3,4,ml分別加流動(dòng)相定容至10ml。在上

6、述色譜條件下重復(fù)進(jìn)樣3次,10μl/次,測(cè)定峰面積積分值,以峰面積積分平均值Y和濃度C進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為:Y=,r=,齊墩果酸溶液在~/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。.精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取同一份對(duì)照品溶液,連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣5次,測(cè)定結(jié)果RSD為%。.重復(fù)性實(shí)驗(yàn)按同一批夏枯草對(duì)照藥材,依法重復(fù)提取并測(cè)定5次,測(cè)定結(jié)果RSD為%。.穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)同一份供試品溶液分別于0,2,4,8,1h進(jìn)樣,測(cè)定結(jié)果RSD為%,表明供試品溶液在1h內(nèi)穩(wěn)定。.樣品含量測(cè)定  在平行操作條件下,按L3(34)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),分別測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表3。方差分析見(jiàn)表4。表3正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表4方差分析  3討論通過(guò)比較浸漬法、加熱回

7、流法、超聲法3種提取方式,以超聲法提取所得齊墩果酸含量最高,故選用超聲法作為夏枯草的提取方法。本文以乙醇為溶媒,以齊墩果酸含量為指標(biāo),通過(guò)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方法研究超聲提取法提取夏枯草的工藝條件,并對(duì)影響提取較大的乙醇濃度、乙醇用量、超聲時(shí)間等因素進(jìn)行考查,篩選出最佳的提取工藝條件為乙醇濃度90%,用量20倍,時(shí)間40min。本提取工藝方法簡(jiǎn)便,節(jié)省時(shí)間,提取率高,為夏枯草的生產(chǎn)和應(yīng)用提供了參考依據(jù)?!緟⒖嘉墨I(xiàn)】 ?。?]鄭漢臣,蔡少青.

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