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1、性傳播疾病及其實驗室診斷梅毒梅毒螺旋體銀染色梅毒螺旋體感染后人體的免疫體液免疫:特異性抗體:二期梅毒病人血清中產(chǎn)生特異性抗梅毒螺旋體抗體,主要是IgM和IgG,早期為IgM和IgG,晚期為IgG,可終生存在。梅毒螺旋體制動抗體也是一種特異性抗體(IgM),可終生存在,它在厭氧有補(bǔ)體存在時,此抗體能抑制活的梅毒螺旋體運(yùn)動,并能殺死梅毒螺旋體??剐牧字贵w,針對心磷脂的VDRL抗體主要是IgM,也有少量IgG,引起心磷脂抗體反應(yīng)的抗原可能是感染組織損傷使細(xì)胞的線粒體膜釋放出來.抗梅毒螺旋體粘多糖抗體,可以抑制梅毒螺旋體繁殖,促使病灶愈合的重
2、要因素。血清中和因子,實驗性梅毒免疫血清中含有一種能滅活梅毒螺旋體毒性的血清中和因子。梅毒螺旋體多肽抗體,有16種抗梅毒螺旋體多肽的抗體,而當(dāng)疾病進(jìn)入隱伏晚期或晚期時,又特異地丟失其中4-5種抗體,這種特異性抗體丟失,可能是造成疾病發(fā)展到晚期的條件。免疫復(fù)合物及IgE和梅毒螺旋體結(jié)合。研究證明,梅毒病人血清中有免疫復(fù)合物,其中含螺旋體抗原,梅毒病理中有循環(huán)免疫復(fù)合物的參與,梅毒治療中的吉海反應(yīng),先天性梅毒和二期梅毒中腎損害均和免疫復(fù)合物有關(guān)。一期梅毒一期梅毒一期梅毒主要癥狀為硬下疳硬下疳發(fā)生后1-2周梅毒血清試驗變?yōu)殛栃?-8周時全部病
3、例均為陽性血清試驗陰性并不能排除一期梅毒,特別是病期不足兩周者。二期梅毒二期梅毒的皮膚粘膜損害二期梅毒骨關(guān)節(jié)損害二期梅毒眼損害二期神經(jīng)梅毒二期復(fù)發(fā)梅毒二期梅毒玫瑰疹二期梅毒玫瑰疹二期梅毒玫瑰疹二期梅毒玫瑰疹二期梅毒疹二期梅毒疹二期梅毒肛周扁平濕疣二期梅毒扁平濕疣二期梅毒疹黏膜白斑二期梅毒疹黏膜白斑晚期梅毒(tertiarysyphilis)三期梅毒皮膚損害三期梅毒粘膜損害晚期骨梅毒晚期眼梅毒晚期心血管梅毒晚期神經(jīng)梅毒晚期內(nèi)臟梅毒三期梅毒樹膠腫三期梅毒軟腭陳舊性樹膠腫形成上腭穿孔胎傳梅毒早期胎傳梅毒2歲以內(nèi)發(fā)病者為早期胎傳梅毒皮損與后天二
4、期梅毒大致相似口周有放射狀瘢痕為其特征肛周及外生殖器部位亦可發(fā)生扁平濕疣骨骼系統(tǒng)82%被損害可出現(xiàn)內(nèi)臟損害皮膚粘膜梅毒晚期胎傳梅毒眼梅毒骨梅毒神經(jīng)梅毒先天潛伏梅毒梅毒的實驗室檢查一、梅毒螺旋體檢查暗視野顯微鏡檢查:穿刺液,見有活動的梅毒螺旋體。在皮損處,用玻片刮取組織滲出液或淋巴結(jié)免疫熒光染色:在熒光顯微鏡下可見綠色的梅毒螺旋體?;铙w組織檢查梅毒螺旋體,如用銀染色法(Warthin-starry)法或(Levoaditis法)或熒光抗體染色,可查見梅毒螺旋體,呈黑褐色,有螺旋結(jié)構(gòu),位于真皮毛細(xì)血管周圍。銀染色的陽性結(jié)果需謹(jǐn)慎解釋,因為類
5、似梅毒螺旋體的其他物質(zhì)易混淆。而特異性熒光檢查則更為可靠。梅毒血清試驗(一)非梅毒螺旋體抗原血清試驗,用心磷脂作抗原,測定血清中抗心磷脂抗體,亦稱反應(yīng)素。性病研究實驗室試驗(VenerealDiseaseResearchLaboratorytest,VDRL);用心磷脂、卵磷脂及膽固醇為抗原,可作定量及定性試驗。不加熱血清反應(yīng)素玻片試驗(UnheatedSerumReaginUSR)是VDRL抗原的改良,敏感性及特異性與VDRL相似??焖傺獫{反應(yīng)素試驗(RapidPlasmareagintest,RPR):是VDRL抗原的改良,敏感性及
6、特異性與VDRL相似,優(yōu)點是肉眼即可讀出結(jié)果。RPR(二)梅毒螺旋體抗原血清試驗:用活的或死的梅毒螺旋體或其成分來作抗原測定抗螺旋體抗體。熒光梅毒螺旋抗體吸收試驗(FTA-ABSTest):此法是較敏感和較特異的螺旋體試驗。梅毒螺旋體血凝試驗(TPHA):敏感性和特異性均高,操作簡便,但對一期梅毒不如FTA-ABS試驗敏感。梅毒螺旋體制動試驗(TreponemaPallidumimmobilization,TPI);用Nichol株螺旋體(活的)加病人血清(含抗體)后,在補(bǔ)體的參與下可抑制螺旋體的活動。如≥50%梅毒螺旋體停止活動,則為
7、陽性。此試驗特異性、敏感性均高,但設(shè)備要求高,操作難,僅供研究用。TPHA三、基因診斷技術(shù)檢測梅毒螺旋體(一)PCR引物的設(shè)計部位與序列:目前有四套擴(kuò)增梅毒螺旋體DNA的系統(tǒng):擴(kuò)增47KDa膜抗原基因(tpp47基因),擴(kuò)增39KDa堿性膜蛋白基因(bmp基因),擴(kuò)增TpF1蛋白基因(tpf-1)或TyF1蛋白基因(tyf-1)和擴(kuò)增tmpA基因。47-1CACAATGCTCACTGAGGATAGT???648-66947-2????????????ACGCACAGAACCGAATTCCTTG???1284-1035Tpp47-3?TT
8、GTGGTAGACACGGTGGGTAC????713-73447-4????TGATCGCTGACAAGCTTAGGCT???1187-1208TP3?????CAGGTAACGGATGCTGAGT???