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《免疫膠體金層析技術(shù)應(yīng)用及發(fā)展趨勢》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、免疫膠體金層析技術(shù)應(yīng)用及發(fā)展趨勢【摘要】免疫膠體金免疫層析技術(shù)是20世紀(jì)90年代出現(xiàn)的一種快速免疫檢測技術(shù)。本文概述了免疫膠體金層析技術(shù)的原理、特點和應(yīng)用，并對其發(fā)展趨勢提出展望?！娟P(guān)鍵詞】膠體金免疫層析技術(shù)應(yīng)用免疫膠體金技術(shù)是繼三大標(biāo)記技術(shù)（熒光素、放射性同位素和酶）之后發(fā)展起來的固相標(biāo)記免疫測定技術(shù)。該方法最大特點是簡單快速、特異靈敏、不需儀器設(shè)備，幾分鐘內(nèi)就可用肉眼觀察到顏色鮮明的檢測結(jié)果，并可保持其檢測結(jié)果。近年來，免疫膠體金技術(shù)已成為當(dāng)今最快速的免疫學(xué)檢測技術(shù)之一，特別適用于殘留監(jiān)控中現(xiàn)場的快速篩選監(jiān)測分析口］。一、膠體
2、金的性質(zhì)和特點膠體金是由金離子還原而成的許多單個金顆粒組成的懸浮液，膠體金溶液是分散相粒子直徑在1-150nm之間的金溶膠，顏色呈桔紅到紫紅色。膠體金溶液在可見光范圍內(nèi)有一單一吸收峰，最大吸收峰主峰寬度越小，顆粒越均勻，因此可以用分光光度計鑒定膠體金的質(zhì)量。膠體金顆?？膳c牛血清白蛋白、免疫球蛋白、毒素、抗生素、激素、核酸等多種生物大分子物質(zhì)非共價結(jié)合，且對膠體金有保護(hù)、加強(qiáng)穩(wěn)定性的作用[2],因而在基礎(chǔ)研究和臨床實驗中成為非常有用的工具。二、膠體金免疫層析技術(shù)的原理膠體金免疫層析技術(shù)(GoldImmunochromatograph
3、yAssay,GICA)是20世紀(jì)90年代出現(xiàn)的一種快速免疫檢測技術(shù)，是一種將膠體金標(biāo)記技術(shù)、免疫檢測技術(shù)和層析分析技術(shù)等多種方法有機(jī)結(jié)合在一起的固相標(biāo)記免疫檢測技術(shù)卜」。以膜為固相載體的膠體金免疫層析技術(shù)的基本原理是：以微孔膜為固相載體，包被已知抗原或抗體，加入待測樣本后，經(jīng)微孔膜的滲濾作用或毛細(xì)管虹吸作用使標(biāo)本中的抗體或抗原與膜上包被的抗原或抗體結(jié)合，通過膠體金標(biāo)記物與之反應(yīng)形成紅色的可見條帶或斑點。三、免疫膠體金層析技術(shù)的優(yōu)點1?快速準(zhǔn)確。整個反應(yīng)過程的時間都在幾分鐘之內(nèi)，而其他如儀器檢測法出結(jié)果要數(shù)小時。免疫膠體金快速檢測
4、方法并不因為其快速而犧牲了它的特異性和靈敏度。靈敏度可達(dá)1ng/mLo2?操作簡便，不需任何儀器和設(shè)備。只需將制備好的試紙條插進(jìn)待測溶液中，通過目測直接判斷結(jié)果，更適合于野外或床邊的現(xiàn)場應(yīng)用。3?試劑穩(wěn)定，外界因素影響較小。并且膠體金試劑非常穩(wěn)定，金顆粒與蛋白分子之間的結(jié)合屬于物理吸附過程，整個標(biāo)記過程對蛋白質(zhì)生物活性影響很小。4?成本低廉，所需試劑和樣本量少。因為“免疫濃縮”,樣本量可低至10-20pL;且無需儀器設(shè)備，使成本大幅下降。免疫膠體金技術(shù)的研究歷程及應(yīng)用1962年，F(xiàn)eldorr等首次介紹了膠體金作為電鏡下的示蹤標(biāo)記
5、物。1971年Faulk和Taylor利用膠體金溶膠與兔抗沙門氏血清結(jié)合，作為標(biāo)記探針，用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測沙門氏細(xì)菌的表面抗原，開創(chuàng)了膠體金在免疫分析領(lǐng)域應(yīng)用的先河。1983年，Holgate等人創(chuàng)立了免疫金銀染色法（IGSS）,極大地增強(qiáng)了檢測的靈敏度。而免疫層析快速診斷試紙條是由Beggs等最先用于人絨毛膜促性腺激素（HCG）的測定。1990年Beggs和Osikowicz相繼建立了人類絨毛腺激素HCG定性檢測的膠體金免疫層析技術(shù)，帶動了診斷試劑的一次革命，從而也掀起膠體金免疫技術(shù)研究與應(yīng)用的熱潮。目前國內(nèi)外銷售的金標(biāo)免疫
6、快速試驗的成品多達(dá)幾十種，主要應(yīng)用在臨床檢驗中的過敏癥標(biāo)志物、心臟病標(biāo)志物、藥物濫用、激素檢測、傳染性疾病的標(biāo)記物、免疫性疾病、腫瘤標(biāo)記物、毒物檢測、性傳播疾病和其他生化指標(biāo)的檢測
7、=
8、（血紅蛋白、血脂等）等領(lǐng)域；在其他領(lǐng)域如農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、食品衛(wèi)生和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域也有應(yīng)用。近年來，農(nóng)獸藥殘留的膠體金免疫層析技術(shù)發(fā)展很快。R.Verheijen等研制了采用間接競爭免疫法的SMZ膠體金快速檢測試紙條。檢測SMZ標(biāo)準(zhǔn)液和牛尿樣本，檢測限為10ng/mL;檢測稀釋后的新鮮牛奶，檢測限為20ng/mLo張明等研制出磺胺甲□瞠快速檢測試紙條，檢測
9、稀釋后的牛奶，檢測限為100ng/mL[4]0五、免疫膠體金層析技術(shù)發(fā)展趨勢同國外相比，目前國內(nèi)這一領(lǐng)域的研究仍處于起步階段，國內(nèi)還沒有國產(chǎn)材料制成的成型產(chǎn)品。而市售的20余種免疫層析產(chǎn)品均系進(jìn)口國外散件國內(nèi)組裝或直接代銷的國外產(chǎn)品。由于免疫層析產(chǎn)品市場巨大，在國內(nèi)開展這一領(lǐng)域的研究，盡快研制出多品種、高質(zhì)量的免疫層析產(chǎn)品，不僅可避免國內(nèi)資金的大量外流，并且對提高我國國民健康水平,將起到不容忽視的作用。進(jìn)一步提高免疫膠體金層析技術(shù)的靈敏度、實現(xiàn)多元檢測、實現(xiàn)定量或半定量檢測是將來金標(biāo)免疫快速試驗發(fā)展的方向。1?提高靈敏度:金標(biāo)免疫
10、快速檢測試紙條敏感度許多都可達(dá)到1ng/mL或更低水平，但是有些檢測方法則不能達(dá)到很高的靈敏度，通過生物素親和素系統(tǒng)和免疫金銀染色法進(jìn)行銀加強(qiáng)試驗或?qū)δみM(jìn)行化學(xué)修飾都能在一定程度上提高試驗的敏感度和特異性。2?實現(xiàn)定量或半定量檢測：金標(biāo)免疫快速試驗
