植物成分分析復(fù)習(xí)

植物成分分析復(fù)習(xí)

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1、植物成分分析的內(nèi)容O植物成分的提取、分離、鑒定和分析。植物化學(xué)成分的提取方法O1、傳統(tǒng)溶劑提取法O2、水蒸氣蒸懈法O3、超臨界流體提取法O4、固相提収法?5、超聲波提取法O6、微波提取法微波提取法原理:栢物樣品在微波場中吸收大雖的能雖,細(xì)胞內(nèi)部含水雖及其他物質(zhì)的存在,對(duì)微波能吸收較多,而周圍的非極性萃取劑則吸收少,從而在細(xì)胞內(nèi)部產(chǎn)生熱應(yīng)力,被萃物料的細(xì)胞結(jié)構(gòu)因細(xì)胞內(nèi)部產(chǎn)生的熱應(yīng)力而破裂,使細(xì)胞內(nèi)部的物質(zhì)直接與相對(duì)冷的萃取劑接觸,因而加速了目標(biāo)產(chǎn)物由細(xì)胞內(nèi)部轉(zhuǎn)移到萃取劑中,從而強(qiáng)化了捉取過程。經(jīng)典

2、分離法O1)溶劑法O2)分館法?3)沉淀法勒4)膜分離法e5)升華法弊6)結(jié)品法結(jié)晶操作順序:(1)準(zhǔn)備飽和溶液:把要純化的混合物溶于熱的適當(dāng)溶劑屮;(2)將熱溶液趁熱過濾,除去不溶性物質(zhì);(3)形成過飽和溶液:止濾液緩慢冷卻,加入結(jié)品液,析出結(jié)品;(4)濾出晶體、干燥并檢驗(yàn)晶體的純度。離心分離法:利用離心機(jī)旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的離心力,將懸浮液屮的懸浮微粒快速沉降,從而達(dá)到分離、濃縮目的的方法。應(yīng)用于生物大分子,如蛋白質(zhì)、酶、核糖體等的分離important離心分離法時(shí)注意事項(xiàng)a離心管中的溶液離管口3

3、cm以上。b離心管在離心套屮兩兩配平,并對(duì)稱置于離心機(jī)屮。c速度從低檔緩慢調(diào)到高檔,并低于離心機(jī)最高設(shè)定速度。d有界常響動(dòng),應(yīng)停止離心。溶劑法利用了物質(zhì)的相似相溶特性,來提取和分離植物成分。極性化合物易溶于極性溶劑,同類分子或官能團(tuán)相似的彼此互溶。常用溶劑的極性強(qiáng)弱順序?yàn)?水.甲醇.乙醇.丙酮■乙酸乙酯.乙卷氯仿.二氯甲烷?苯■二氯乙烷?四氯化碳?石油醛色譜系統(tǒng)由固定相(固體、液體)和流動(dòng)相(水、有機(jī)溶劑、氣體)組成。分為柱層析和薄層層析。柱層析吸附層析分配層析離子交換層析凝膠層析開口柱層析法分

4、離物質(zhì)的過程:確定固定相一選柱一填充固定相一加入樣品一洗脫一TLC法鑒定組分一分批收集一濃縮薄層層析的顯色方法:蒸汽顯色噴霧顯色浸漬顯色加熱顯色波譜法是植物化學(xué)成分鑒定的主要方法,主要包括核磁共振(NMR)薄層層析的顯色方法:1.蒸汽顯色2.噴霧顯色3.浸漬顯色4.加熱顯色質(zhì)譜(MS)紅外光譜(IR)紫外光譜(UV)O液?質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(LC/HPLC?MS)和氣?質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(GC/HPGC-MS)是集植物成分分離、鑒定和定量分析為一體的現(xiàn)代分析技術(shù)。丄極性:在化學(xué)中,極性指一個(gè)共價(jià)鍵或一個(gè)共價(jià)分子

5、中電荷分布的不均勻性。如果電荷分布得不均勻,則該鍵或分子為極性,反之,則為非極性。丄沉降系數(shù):物質(zhì)在單位離心場下的沉降速度,是物質(zhì)特有的物理常數(shù)。單位為秒。丄丄比移值R尸分離物移動(dòng)的距離/展開劑移動(dòng)的距離丄丄吸附層析:指用吸附劑作固定相,利用被分析組分對(duì)吸附劑表面吸附能力的差異和在流動(dòng)相中溶解度的差異來進(jìn)行分析分離的方法。硅膠(silicagel)是最常用的吸附劑,廣泛用于酸性和中性物質(zhì)的分離,如酚類、生物堿、氨基酸、粘類。吸附層析:指用吸附劑作固定相,利用被分析組分對(duì)吸附劑表面吸附能力的差異和

6、在流動(dòng)相中溶解度的差異來進(jìn)行分析分離的方法。吸附劑特點(diǎn):表面微孔多,吸附性強(qiáng),分離效果好;活性與含水量有關(guān)。不能重復(fù)使用。吸附劑種類:硅膠、氧化鋁、活性炭和聚酰胺硅膠(silicagel)是最常用的吸附劑,廣泛用于酸性和中性物質(zhì)的分離,如酚類、生物堿、氨基砧類。反相層析(RPC):固定相極性小于流動(dòng)相極性的色譜方法,流動(dòng)相多為水、乙惰、甲醇等強(qiáng)極性溶劑。特點(diǎn):使用方便,壽命較長,溶劑成本低;柱平衡所需時(shí)間較短;允許樣品有較大極性和分子量范圍;可分離離子型化合物。分離原理:“雙保留原理〃分配系數(shù):

7、指化合物在固定相與移動(dòng)相中的濃度之比,通常用來描述化合物在互不相溶的兩個(gè)相中的分配狀況。柱層析支持物填料:常用烷基二甲基氯甲硅烷。ODS硅膠,十八烷基主鏈(C18H37)硅膠,又稱C18geL薄層層析:紙層析分光光度技術(shù):利用物質(zhì)的特征吸收光譜來對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的一項(xiàng)光譜技術(shù)。主要種類:可見分光光度法、紫外分光光度法、原子吸收分光光度法和熒光分光光度法。原理:光吸收定律A二kCLA:吸光度K:e摩爾消光系數(shù)?HPLC:以柱色譜法為基礎(chǔ),選用具有高效能固定相的耐高壓色譜柱,在加壓的條件

8、下進(jìn)行分離,并自動(dòng)檢測(cè)分離結(jié)果的機(jī)器分析技術(shù)。HPLC特點(diǎn):高壓、高效、高速、高靈敏度HPLC儀器組成:高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜柱和檢測(cè)器HPLC檢測(cè)器:紫外?可見光檢測(cè)器熒光檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器光電二級(jí)管陣列紫外檢測(cè)器important獲取色譜圖中信息丄1根據(jù)色譜峰的個(gè)數(shù),判斷樣品中組份的最少個(gè)數(shù);丄2根據(jù)色譜峰的保留值(或位置),進(jìn)行定性分析;丄3根據(jù)色譜峰下的面積或峰高,進(jìn)行定量分析;丄4根據(jù)色譜峰的保留值及其峰寬,評(píng)價(jià)色譜柱分離效能;丄5根據(jù)色譜峰兩峰間的距離,評(píng)價(jià)固定相(和流動(dòng)相)

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