男性不育患者抗精子抗體檢測及臨床應(yīng)用

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1、男性不育患者抗精子抗體檢測及臨床應(yīng)用男性不育患者抗精子抗體檢測及臨床應(yīng)用世界衛(wèi)生組織（WHO）在不育夫婦標(biāo)準檢查與診斷手冊中，將免疫學(xué)病因列為男性不育診斷分類之一，男性不育患者抗精子抗體（AsAb）臨床檢測陽性率10%?30%。2009年對183例精液分析顯示有精子凝集、精子不活動或精子畸形率高的不育患者，進行抗精子抗體檢測，結(jié)果報告如下。資料與方法2010年門診收治183例不育患者，精液分析顯示精子凝集、精子不活動或精子畸形率＞30%,年齡23?35歲，病史2~7年。方法：①手淫法采集被檢者全份精液標(biāo)本，置37°C水浴箱完全

2、液化，500Xg離心10分鐘,備用。②蒸憾水按20:1的比例將濃縮洗滌液稀釋備用，同時配制含5%小牛血清的樣品稀釋液。③按待檢標(biāo)本取相應(yīng)的抗原包被微孔板，同時取3個微孔板分別作為空白對照、陰性對照、陽性對照。除陰、陽性對照孔外,每孔加樣品稀釋液50ul,待檢精漿50ulo陰、陽性對照孔分別加陰、陽性對照液100ul混勻。用封膜覆蓋反應(yīng)板，置37°C溫育40分鐘。④用配好的洗滌液洗板4次，每次300u1/孔，每次3分鐘，拍干。⑤每孔加酶結(jié)合物2滴，充分混勻后，用封膜覆蓋，置37°C溫育30分鐘。⑥甩凈孔內(nèi)液體加洗滌液洗板，洗滌方

3、法同步驟4。⑦每孔加顯色劑A、B各50ul,混勻后室溫下避光反應(yīng)10分鐘。⑧每孔加終止液50u1,終止反應(yīng)。⑨結(jié)果判定：以空白對照孔調(diào)零，測450nm吸光度值。P/N（待測樣本0D值/陰性對照0D值）22.1為陽性。統(tǒng)計學(xué)處理：將所得實驗數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。組間比較采用t檢驗，方差不齊時采用t檢驗。結(jié)果以PV0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果183例檢測樣本中，AsAb陽性77例，陽性率42.1%。近年報道^[1?3],不育患者AsAb陽性率10.2%?32.6%,檢測結(jié)果高于報道，

4、其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)o討論精子作為…種獨特的抗原與機體免疫系統(tǒng)接觸后，可引起自身或同種免疫反應(yīng)而產(chǎn)生抗精子抗體，人類精子抗原分固有抗原和附著抗原，固有抗原為精子發(fā)生過程中產(chǎn)生的，而附著抗原為精子進入附睪或精漿吋，一些蛋口質(zhì)吸附在精子膜上形成的，這兩類抗原都能誘發(fā)機體產(chǎn)生抗精了抗體。正常情況下，由于血睪屏障的存在，機體免疫系統(tǒng)并不會對精子產(chǎn)生免疫反應(yīng)，但如果生殖系統(tǒng)有炎癥、外傷、手術(shù)等損傷了這一屏障，可導(dǎo)致精了或其可溶性抗原漏出并被局部吞噬細胞吞噬，進而致敏淋巴細胞發(fā)&免疫反應(yīng)，從而產(chǎn)&抗精了抗體。對于育齡期婦夫而

5、言，一旦抗精子抗體在體內(nèi)出現(xiàn)，就可能引起不育?？咕涌贵w影響生育的主要途徑有以下兒個方面：①抗精了抗體，尤其是IgM抗體可以與精子結(jié)合，導(dǎo)致精子的凝集，凝集的精子活動受到影響，不能與卵子結(jié)合；②抗精子抗體可以與精子的尾部發(fā)生反應(yīng)，影響精子的運動；③抗精子抗體的Fc段與宮頸黏液糖蛋口結(jié)合，干擾精子穿過排卵期宮頸黏液；④在多核中性粒細胞和巨噬細胞的表面存在抗精子抗體的Fc段受體，它們結(jié)合后可以激活補體系統(tǒng)，從而破壞精子的膜結(jié)構(gòu)和導(dǎo)致精子的活動喪失：⑤抗精子抗體與精了頭部結(jié)合后可以干擾精卵結(jié)合，阻止精了穿透卵細胞。臨床上如何判斷患者

6、是否需要進行抗精子抗體檢測，戴繼燦對體檢測的指征總結(jié)如下^[4]：①精液分析顯示精了出現(xiàn)凝集現(xiàn)象、精了不活動或者精了形態(tài)異常增加；②懷疑梗阻引起精子計數(shù)下降或無精子時，抗精子抗體檢測有助于診斷;③不明原因的不育;④性交后6~12小吋內(nèi)宮頸黏液中出現(xiàn)不動或搖擺運動的精了；⑤輸精管結(jié)扎后復(fù)通的患者；⑥配偶因為生育問題打算進行侵入性檢查;⑦準備進行體外授精選擇治療方案前。我屮心正是選擇性的進行抗精了抗體檢測，因而陽性率較高。對于抗精了抗體陽性患者，治療可選擇類固醇激素約物，如強的松或甲基強的松，其機理為抑制新的抗

7、體產(chǎn)生和促進已經(jīng)產(chǎn)牛的抗體退變，治療的成功率存在個體差異，主要與抗體降解速度和類固醇激素的代謝速度有關(guān)。一般而言，類I古I醇激素使用2周后，抗體可降低到最低水平，但也有研究者認為類固醇激素可以降低頂體酶的活性,影響精卵結(jié)合能力，這些潛在的不良反應(yīng)也為藥物治療帶來隱患。除藥物治療外，還可以選擇輔助牛殖技術(shù)進行治療：①宮腔內(nèi)人工授精(IUI):通過IUI進行治療，可以使更多的精子避開宮頸黏液對運動的干擾到達子宮，治療的成功率與抗精子抗體的滴度有關(guān)；②體外授精(IVF)、IVF可以使精子完全避開女性生殖道內(nèi)免疫因素的干擾,在體外直接

8、與精了結(jié)合，IVF治療成功率高于IUI,它適合女方血清或?qū)m頸黏液中存在抗精子抗體，或精子與抗精子抗體結(jié)合比例〈50%的患者；③卵胞漿內(nèi)單精了注射(ICSI),ICSI是解決抗精子抗體導(dǎo)致不育問題最有效的方法，ICSI可以解決各種環(huán)境中抗精了抗體的不良影響。盡管抗精了抗體影響生