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《新生兒臍血HBV隱匿型感染的檢測及其臨床意義》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、新生兒臍血HBV血清標(biāo)志物檢測的意義【摘要】目的：了解慢性HBV攜帶母親所生嬰兒HBV隱匿型感染的存在情況。方法：用ELISA法檢測HBV攜帶母親所牛新牛兒臍血中HBV標(biāo)志物，篩選出118例HBsAg陰性/抗HBc陽性臍血，用熒光定量PCR(FQ-PCR)和微粒了酶免技術(shù)(MEIA)對這些臍血作HBVDNA和HBsAg定量分析，并對這些高危新生兒進(jìn)行隨訪檢測。結(jié)果：118例HBsAg陰性/抗?HBc陽性新生兒臍血中，有36例HBVDNA含量N5.0X102拷貝/ml,占30.5%(36/118),其中102-104拷貝/ml低滴度者25例，占21,2%(25/118),104?1O'拷貝
2、/ml111等滴度者11例，占9.3%(11/118)；同時(shí)有47例臍血HBsAg定量超過檢測下限(S/N值32.00),占39.8%(47/118),其中濃度在0.5ng/ml以下者27例，占22.9%(27/118),濃度在0.5ng/ml?5.0ng/ml者20例，占16.9%(20/118)。隨訪檢測結(jié)果：出生時(shí)臍血HBVDNA陽性或/和HBsAg濃度M2.00(S/N,MEIA法)者,至6月齡和12月齡吋血清HBVDNA和HBsAg(ELISA法)陽性率分別為84.8%(28/33)、18.2%(8/44)和78.1%(25/32)>14.6%(6/41)。結(jié)論：母親為HBV攜
3、帶者的高危新生兒用常規(guī)手段檢測臍血HBsAg陰也不能除外HBV宮內(nèi)感染，而可能侑部分存在HBV隱匿型感染，臨床應(yīng)采用更靈敏更可靠的檢測技術(shù)并加強(qiáng)隨訪監(jiān)測?！娟P(guān)鍵詞】肝炎病毒，乙型；子宮內(nèi)傳播；隱匿型感染；熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)；微粒子酶免技術(shù)應(yīng)用乙型川?炎高效免疫球蛋口(HBIG)對HBsAg陽性孕婦實(shí)行被動(dòng)免疫，可有效阻斷HBV宮內(nèi)母嬰傳播，成功率可達(dá)70%~90%5叫阻斷失敗的血清學(xué)指標(biāo)，通常包括嬰兒出生時(shí)至6月齡(或12月齡)時(shí)血清HBsAg持續(xù)陽性(ELISA法)，而那些HBsAg陰性/抗?HBc陽性的嬰兒往往被忽視，實(shí)際上在這些嬰兒中存在著部分HBsAg陰性的HBV感染，即所謂H
4、BV隱匿型感染(occultinfectionofHBV)3。木課題采用熒光定量聚合酶聯(lián)反應(yīng)(FQ—PCR)并結(jié)合微粒子臨免技術(shù)(MEIA),對118例HBsAg陰性/抗-HBc陽性的新生兒臍血進(jìn)行HBVDNA及HBsAg定量檢測，以了解這些高危新生兒中HBV隱匿型感染的存在情況。材料與方法%1.研究對彖2002年1月?2003年2月在我院產(chǎn)科出生的新生兒118例，其母親均為在我院婦?？菩性衅跈z查、HBsAg陽性、川:功能正常、無慢性乙型川:炎臨床癥狀的HBV攜帶者。孕婦于孕28周起每隔4周給予肌內(nèi)注射HBIG200IU,連續(xù)3次至臨產(chǎn)前。新生兒按常規(guī)給予HBIG肌內(nèi)注射及乙型肝炎疫苗(
5、HBVac)全程免疫接種。臍血標(biāo)本采集及HBV血清標(biāo)志物檢測：于出生時(shí)即刻(注射HBIG和HBVac前)斷臍留取臍血5ml,操作時(shí)謹(jǐn)防母血污染，待血清析出，用ELISA法檢測HBV標(biāo)志物，剩余血清-70°C冰凍保存?zhèn)溆?。入選木課題研究的新生兒臍血均為HBsAg陰性/抗-HBc陽性或HBsAg陰性/抗-HBe陽性+抗-HBc陽性。20份HBV標(biāo)志物6項(xiàng)(HBsAg.抗-HBs、HBeAg、抗?HBe、抗-HBc、抗-HBclgM)全陰性、肝功能正常的臍血(其母親靜脈血清HBV標(biāo)志物6項(xiàng)也全陰性)作為止常對照。%1.檢測方法、試劑、儀器(1)血清HBV標(biāo)志物檢測采用ELISA法，試劑盒由上海
6、華泰生物工程有限公司、上海實(shí)業(yè)科華牛?物技術(shù)有限公4、丿夏門新創(chuàng)科技有限公訶提供，酶標(biāo)儀為美國MolecularDevicesEmax型，結(jié)果判斷：S/N值M2」者為HBsAg陽也S/N值W0.2者為抗?HBc、抗?HBe陽性(S為待測樣本OD值，N為陰性對照OD值。)，三種試劑檢測結(jié)果一致者入選。(2)HBVDNA檢測采用FQ-PCR,商品試劑盒由深圳匹基生物工程有限公司提供，儀器：RocheLightCycler熒光PCR檢測儀(木實(shí)驗(yàn)家經(jīng)國家衛(wèi)牛部臨床檢驗(yàn)中心有關(guān)專家考核認(rèn)證)，檢測靈敏度為5.0X102拷貝/ml,定量檢測線性范圍為1.0X10??5.0XI()7拷貝/ml。(3
7、)HBsAg定雖檢測采用MEIA法⑷，IMX全口動(dòng)免疫熒光分析儀、HBsAg確定試劑盒均為美國ABBOTT公司產(chǎn)品，檢測靈敏度為0.23ng/mlo0.5ng/mlxlng/ml>2ng/ml>5ng/mlHBsAg定值參比血清市衛(wèi)生部臨檢中心捉供。HBsAg以樣本熒光速率值與陰性對照熒光速率值之比(S/N)22.00為陽性。%1.隨訪對入選新生兒在出生時(shí)作臍血冇關(guān)項(xiàng)目檢測后，分別于6刀齡和12刀齡時(shí)行頸靜脈抽血5ml,分離血清檢測
