不同頻率電刺激對蟾蜍腓腸肌收縮的影響

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1、不同頻率電刺激對蟾蜍腓腸肌收縮的影響（浙江中醫(yī)藥大學(xué)）【摘要】：目的：本實(shí)驗(yàn)在刺激時(shí)間和刺激強(qiáng)度恒定的條件下，研究不同頻率的刺激對腓腸肌收縮的影響。方法：將裝置與蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌相連，采用自動頻率方法，強(qiáng)度為2V，相隔時(shí)間為10s。起始頻率為1HZ，按1HZ,11HZ,21HZ,31HZ......逐漸增加,根據(jù)曲線圖,觀察不同頻率時(shí)肌肉收縮形態(tài)和張力變化。結(jié)果：隨著刺激頻率的增加，曲線上增波幅度由大變小，出現(xiàn)單收縮、不完全強(qiáng)直收縮、完全強(qiáng)直收縮的情況。結(jié)論在有效刺激強(qiáng)度條件下，某較小頻率使腓腸肌發(fā)生單收縮。當(dāng)頻率增大，單收縮變?yōu)椴?/p>

2、完全強(qiáng)直收縮，頻率繼續(xù)增大，不完全強(qiáng)直收縮變?yōu)橥耆珡?qiáng)直收縮?！娟P(guān)鍵詞】刺激；頻率；腓腸肌肌肉、神經(jīng)和腺體組織稱為可興奮組織，它們有較大的興奮性。不同組織、細(xì)胞的興奮表現(xiàn)各不相同，神經(jīng)組織的興奮表現(xiàn)為動作電位，肌肉組織的興奮主要表現(xiàn)為收縮活動。因此，觀察肌肉是否收縮可以判斷它是否產(chǎn)生了興奮。一個(gè)刺激是否能使組織發(fā)生興奮，不僅與刺激形式有關(guān)，還與刺激時(shí)間、刺激強(qiáng)度、強(qiáng)度-時(shí)間變化率三要素有關(guān)。[1]此實(shí)驗(yàn)通過觀察在刺激時(shí)間和強(qiáng)度恒定的條件下，所用電刺激頻率與腓腸肌收縮曲線的關(guān)系進(jìn)而分析不同刺激頻率對骨骼肌收縮形式的影響?！緦?shí)驗(yàn)材料】：（1

3、）實(shí)驗(yàn)對象：蟾蜍（2）實(shí)驗(yàn)試劑：任氏液（3）實(shí)驗(yàn)工具：蛙板、鋅銅弓，探針，粗剪刀、尖鑷子、玻璃分針、瓷碗、培養(yǎng)皿（4）實(shí)驗(yàn)儀器：鐵支架、微調(diào)固定器、刺激輸出線、肌動槽、張力換能器、RM6240微機(jī)生物信號采集系統(tǒng)?！緦?shí)驗(yàn)方法】：1、實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)連接和參數(shù)設(shè)置：點(diǎn)擊“實(shí)驗(yàn)”菜單，選擇“刺激頻率對骨骼肌收縮的影響”項(xiàng)。參數(shù)：通道模式為張力，掃描速度為2.5s/div，靈敏度為1.5g，時(shí)間常數(shù)為直流，在“選擇”下拉菜單中選擇“頻率”項(xiàng)，顯示刺激參數(shù)。2、離體蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備2、1毀腦脊髓取蟾蜍一只，用左手握住，以食指壓住其前頭部前端

4、使其盡量前俯，右手持探針自枕骨打孔處垂直刺入，到達(dá)椎管，即將探針改變方向刺入顱腔，向各側(cè)不斷攪動，徹底搗毀腦組織；再將探針原路退回，刺向尾側(cè)，捻動探針使逐漸刺入整個(gè)椎管內(nèi)，搗毀脊髓。此時(shí)蟾蜍下頜呼吸運(yùn)動消失，四肢松軟。2、2剪除軀干上部及內(nèi)臟用粗剪刀在顱骨后方剪斷脊柱。左手握住蟾蜍脊柱，右手將剪刀沿兩側(cè)（避開坐骨神經(jīng)）剪開腹壁。此時(shí)軀干上部及內(nèi)臟即全部下垂。剪除全部軀干上部及內(nèi)臟組織，棄于瓷碗內(nèi)，2、3剝皮避開神經(jīng)，用右手拇指和食指夾住脊柱，左手捏住皮膚邊緣，逐步向下牽拉剝離皮膚。將全部皮膚剝除后，將標(biāo)本置于盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。2、

5、4洗凈雙手和用過的全部手術(shù)器械，再進(jìn)行下列步驟。2、5分離雙腿避開坐骨神經(jīng)，用粗剪刀從背側(cè)剪去骶骨，然后沿中線將脊柱剪成左右兩半，再從恥骨聯(lián)合中央剪開。將已分離的標(biāo)本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。2、6游離坐骨神經(jīng)取腿一條，先用玻璃分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)腹腔部，然后用大頭針將標(biāo)本背位固定于干凈蛙板上。用玻璃分針循股二頭肌和半肌膜之間的坐骨神經(jīng)溝，縱向分離暴露坐骨神經(jīng)之大腿部分，直至分離至腘窩脛神經(jīng)分叉處。然后剪斷股二頭肌腱、半肌腱、半膜肌肌腱，并繞至前方剪斷股四頭肌腱。自上而下剪斷所有坐骨神經(jīng)分支。將連著3~4節(jié)椎骨的坐骨神經(jīng)分離出來。

6、2、7完成坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本將已經(jīng)游離的坐骨神經(jīng)搭在腓腸肌上。用粗剪刀自膝關(guān)節(jié)周圍向上剪除并刮凈所有大腿肌肉，在距膝關(guān)節(jié)約約1cm處剪斷股骨。棄去上段股骨，保留部分即為坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本。2、8完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本用尖頭鑷子在上述坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的跟腱下方穿孔，穿線結(jié)扎之。提起結(jié)扎線，在結(jié)扎線下方剪斷跟腱，并逐步游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)處，左手握住標(biāo)本的股骨部分，使已游離的坐骨神經(jīng)和腓腸肌下垂，右手持粗剪刀水平方向伸進(jìn)腓腸肌與小腿之間，在膝關(guān)節(jié)處剪斷，與小腿其余部分分離。左手保留部分即為附著于股骨之上的、具有坐骨神經(jīng)支配的腓腸肌標(biāo)本。將標(biāo)本

7、浸入盛有新鮮任氏液之培養(yǎng)皿中待用。2、9將腓腸肌跟腱的扎線固定在張力換能器臂梁上，不宜太緊，此連線應(yīng)與桌面垂直，調(diào)節(jié)微距調(diào)節(jié)器，將前負(fù)荷調(diào)至2~5g。2、9、1把穿好線的坐骨神經(jīng)輕輕提起，放在刺激電極上，應(yīng)保證神經(jīng)與刺激電極接觸良好。3、實(shí)驗(yàn)菜單中選擇“刺激頻率對骨骼肌收縮的影響”4、選擇菜單中選擇“強(qiáng)度/頻率顯示刺激參數(shù)”_5、實(shí)驗(yàn)觀察：刺激頻率按1HZ，11HZ，21HZ，31HZ，逐漸增加，連續(xù)記錄不同頻率時(shí)的肌肉收縮曲線，觀察肌肉收縮形態(tài)和張力的改變【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】：使刺激強(qiáng)度不變，調(diào)節(jié)刺激頻率，觀察到刺激頻率對骨骼肌收縮的影響，

8、如圖一。圖一不同頻率電刺激對蟾蜍腓腸肌收縮的影響由圖一可以得出當(dāng)刺激頻率較小，刺激的間隔大于第一次肌肉收縮舒張的持續(xù)時(shí)間，則如第一、第二個(gè)曲線為單收縮。增大刺激頻率，使刺激的間隔大于一次肌肉收縮的收縮時(shí)間、小于一次肌肉收