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1、不同頻率的電刺激蟾蜍離體坐骨神經(jīng)對(duì)腓腸肌收縮的影響周曉泉09臨床1班，20091090128【摘要】目的觀察在刺激時(shí)間、強(qiáng)度變化頻率恒定的條件下，不同頻率的電刺激對(duì)肌肉收縮的影響。學(xué)習(xí)微機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)和換能器的使用。方法對(duì)以解剖好的蟾蜍骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本進(jìn)行不同頻率的電刺激，觀察腓腸肌的收縮及張力的變化和屏幕上的圖像變化。結(jié)果在刺激強(qiáng)度變化率恒定的條件下，在2Hz的刺激下表現(xiàn)為單收縮，在10Hz的刺激下表現(xiàn)為不完全強(qiáng)直收縮；在20Hz刺激下表現(xiàn)為強(qiáng)直收縮；在大于21Hz刺激下，肌肉已經(jīng)出現(xiàn)疲勞從而表現(xiàn)為收縮強(qiáng)
2、度減少。結(jié)論當(dāng)刺激頻率較小，刺激的間隔大于一次肌肉收縮舒張的持續(xù)時(shí)間，則肌肉收縮表現(xiàn)為一連串的單收縮；增大頻率刺激，使刺激的頻率大于一次肌肉收縮的時(shí)間、小于一次肌肉收縮舒張的持續(xù)時(shí)間，則肌肉產(chǎn)生不完全強(qiáng)直收縮；繼續(xù)增加刺激頻率，使刺激的時(shí)間小于一次肌肉收縮時(shí)間，則肌肉出產(chǎn)生完全強(qiáng)直收縮?！娟P(guān)鍵詞】頻率腓腸肌強(qiáng)直收縮2+骨骼肌收縮機(jī)制是肌絲滑行學(xué)說,當(dāng)肌纖維興奮時(shí)，終池內(nèi)的Ca2+2+進(jìn)入肌漿，致使肌漿中Ca濃度升高，Ca與肌鈣蛋白結(jié)合，引起肌鈣蛋白構(gòu)型發(fā)生改變，牽拉原肌球蛋白移位，將肌動(dòng)蛋白上與橫橋結(jié)合的位點(diǎn)暴露出來
3、，引發(fā)橫橋與肌動(dòng)蛋白結(jié)合。橫橋一旦與肌動(dòng)蛋白結(jié)合，便激活橫橋上的ATP酶，使ATP分解釋放能量，使橫橋發(fā)生扭動(dòng)，牽拉細(xì)肌絲向M線肌節(jié)中心方向滑行，結(jié)果是肌節(jié)縮短，肌纖維收縮。1【材料與方法】1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物蟾蜍體重適宜，雌雄不限，浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供1.2實(shí)驗(yàn)藥品任氏液1.3實(shí)驗(yàn)器材鋅銅弓微調(diào)固定器張力換能器微機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)1.4實(shí)驗(yàn)方法1.4.1破壞腦和脊髓取蟾蜍一只，左手握住蟾蜍，用食指按壓其頭部前端使其盡量前俯，右手持探針于枕骨大孔處垂直刺入，然后向前通過枕骨大孔刺入顱腔，左右攪動(dòng)充分搗毀腦組織
4、。然后將探針抽回至進(jìn)針處，再向后刺入脊椎管，反復(fù)提插搗毀脊髓。此時(shí)如蟾蜍四肢松軟，呼吸消失，表明腦和脊髓已完全破壞，否則應(yīng)按上法反復(fù)進(jìn)行。1.4.2剪除軀干上部及內(nèi)臟在骶骼關(guān)節(jié)水平以上1～2cm處剪斷脊柱，左手握住蟾蜍后肢，用拇指壓住骶骨，使蟾蜍頭與內(nèi)臟自然下垂，右手持普通剪刀，沿脊柱兩側(cè)剪除一切內(nèi)臟及頭胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及緊貼于脊柱兩側(cè)的坐骨神經(jīng)。剪除過程中注意勿損傷坐骨神經(jīng)。1.4.3剝皮左手握緊脊柱斷端（注意不要握住或壓迫神經(jīng)），右手握住其上的皮膚邊緣，用力向下剝掉全部后肢的皮膚。把標(biāo)本放在盛有任氏液
5、的培養(yǎng)皿中。1.4.4分離兩腿用鑷子夾住脊柱將標(biāo)本提起，背面朝上，剪去向上突起的尾骨（注意勿損傷坐骨神經(jīng)）。然后沿正中線用剪刀將脊柱和恥骨聯(lián)合中央劈開兩側(cè)大腿，并完全分離，注意保護(hù)脊柱兩側(cè)2灰白色的神經(jīng)。將兩條腿浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。1.4.5制作坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本取一條腿放置于蛙板上或置于蛙板上的小塊玻璃板上。（1）游離坐骨神經(jīng)將腿標(biāo)本腹面朝上放置。用玻璃分針沿脊柱旁游離坐骨神經(jīng)，并于近脊柱處穿線結(jié)扎神經(jīng)。再將標(biāo)本背面朝上放置，把梨狀肌及其附近的結(jié)締組織剪去。循坐骨神經(jīng)溝（股二頭肌與半膜肌之間的裂縫處），找出坐
6、骨神經(jīng)的大腿段。用玻璃分針仔細(xì)剝離，手執(zhí)結(jié)扎神經(jīng)的線將神經(jīng)輕輕提起，剪斷坐骨神經(jīng)的所有分支，并將神經(jīng)一直游離至腘窩。（2）完成坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本將游離干凈的坐骨神經(jīng)搭于腓腸肌上，在膝關(guān)節(jié)周圍剪掉全部大腿肌肉，并用普通剪刀將股骨刮干凈。然后從股骨中部剪去上段股骨，保留的部分就是坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本。（3）完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本將上述坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本在跟腱處穿線結(jié)扎后，于結(jié)扎處遠(yuǎn)端剪斷跟腱。游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)處，然后從膝關(guān)節(jié)處將小腿其余部分剪掉，這樣就制得一個(gè)具有附著在股骨上的腓腸肌并帶有支配腓腸肌的坐骨神經(jīng)的標(biāo)本。1.4.6
7、檢查標(biāo)本興奮性用經(jīng)任氏液濕潤的鋅銅弓輕輕接觸一下坐骨神經(jīng)，如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮，則表明標(biāo)本的興奮性良好，即可將標(biāo)本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中，以備實(shí)驗(yàn)用。1.4.7實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)連接和參數(shù)設(shè)置張力換能器的輸出端與生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)的出入通道相連。啟動(dòng)RM6240系統(tǒng)軟件，在“選擇”下拉菜單中選擇“強(qiáng)度∕頻率”項(xiàng)，顯示刺激參數(shù)。1.4.8將腓腸肌跟腱的扎線固定在張力換能器的懸梁上,不宜太緊,此線應(yīng)與桌面垂直,調(diào)節(jié)微距調(diào)節(jié)器.31.4.9把穿好線的坐骨神經(jīng)輕輕提起,放在刺激電極上,應(yīng)保證神經(jīng)與刺激電極接觸良好。1.4.
8、10實(shí)驗(yàn)觀察（1）刺激方式：最大刺激強(qiáng)度，波寬：0.1ms。RM6240系統(tǒng)采用連續(xù)單刺激（或頻率遞增）。采用自動(dòng)頻率方式，起始頻率1Hz，結(jié)束頻率30Hz，步長1Hz，組間延時(shí)（串間隔）大于5s。（2）刺激頻率按1Hz、2Hz、3Hz、3Hz、4Hz、5Hz、…、30Hz逐漸增加（或刺激間隔逐漸減?。B續(xù)記錄不同頻率時(shí)的肌肉收縮曲線，觀察不
