烏賊墨汁多糖的提取工藝研究【文獻綜述】

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1、畢業(yè)論文文獻綜述食品科學與工程烏賊墨汁多糖的提取工藝研究摘要：本文對動物多糖的提取，分離純化進行了簡單的描述以及簡單介紹了多糖分級純化方法——超濾法和柱層析法，同時對多糖的分析鑒定方面做了一定描述。關鍵詞：多糖；提?。环蛛x純化；分析鑒定多糖又稱為多聚糖，是一大類天然產物，由10個以上單糖通過糖苷鍵連接而成的聚糖，是構成生命的四大基本物質之一，廣泛存在于植物、微生物、動物[1]等有機體中。多糖類物質包括：糖原(glycogen)，甲殼素(chitin)，肝素(heparin)，硫酸軟骨素(chondroitinsulfate)，透明質酸(hyaluronicacid)，硫酸角質素(ke

2、ratansulfate)，酸性粘多糖(acidmucopolysaccharide)或糖胺聚糖(glycosam-inoglycan)。其中肝素、硫酸軟骨素、透明質酸、硫酸角質素都屬糖胺聚糖[2]。由于多糖在臨床上、食品工業(yè)、發(fā)酵工業(yè)及石油工業(yè)有著廣泛的應用[3]，使多糖生物資源的開發(fā)利用和研究日益活躍，成為天然藥物、生物化學、生命科學的研究熱點，到目前為止，已有300多種多糖類化合物從天然產物中被分離出來[4]。本文對多糖的提取、分離和純化、分析量和純度等和方面的研究進展進行概括和綜述。1多糖的提取根據多糖的存在形式及提取部位的不同，在提取之前確定是否需要進行預處理。動物多糖的提

3、液，通常首先要去除表面脂肪，一般將原料經粉碎后加入丙酮等脫脂，脫脂后過濾得到的殘渣再用水作溶劑進行提取。如萬淑瑩等[5]將蠶蛹干粉經丙酮脫脂，沸水提取，乙醇沉淀分離制備多糖。多糖的提取目前常用堿解法、熱水浸提法、酶解法或堿解與酶解相結合的方法、微波輔助提取法、超聲波輔助提取法。如劉興杰等[6]堿提取法從綠疣海葵等4種海洋無脊椎動物中提取酸性粘多糖。陳菊嫡等[7]用堿解法提取分離花刺參酸性粘多糖；張紅巖等[8]用木瓜酶消化方法提取分離鹿茸中酸性多糖C.Maes等[9]用堿性過氧化氫提取小麥麩皮中的非淀粉多糖。唐孝禮等[10]用堿解與酶解相結合的方法提取分離黑海參酸性粘多糖。鄧永智[11

4、]等利用微波輔助提取法從海水小球藻中提取多糖。鐘丹等[12]采用超聲波提取牛蒡菊糖。Mysore[13]用熱水浸提法提取高粱中的多糖。得到的多糖提取液大多較粘稠，可進行吸濾，也可用離心法將不溶性雜質除去，將濾液或上層清液合并(若為堿溶性多糖則需中和)。合并的多糖提取液經濃縮后，醇沉，也可加入費林氏溶液或硫酸銨或溴化十六烷基三甲基銨等，使與多糖物質結合生成不溶性絡合物或鹽類沉淀。然后依次用乙醇、丙酮、乙醚等洗滌，將吸干后疏松的多糖迅速轉入裝有五氧化二磷或氫氧化鈉的真空干燥器中或于真空干燥箱中減壓干燥。若沉淀的多糖為膠狀或具粘著性時可直接冷凍干燥。2多糖的分離純化提取的粗多糖中常含有色素

5、、多肽、蛋白質等雜質及無機鹽類成分，因此需將其進行分離純化。2.1去除蛋白幾乎所有動物多糖都與蛋白質相連，因此動物多糖的提取首要問題是在多糖不被顯著降解的條件下去除結合的蛋白質。多糖與蛋白質的結合不是物理或離子結合，而是共價結合。經堿提取及蛋白酶水解的組織消化液，是組分及性質相近的多糖混合物，它們的多羥基及強電解性使其處于可溶狀態(tài)，除去殘留蛋白質和各種小分子將為多糖的進一步分級分離創(chuàng)造條件。除蛋白常用的有Sevage法、三氟三氯乙烷法、三氯醋酸法等電點沉淀法等。如佘志剛等[14]用Sevage法除蛋白制備鮑魚多糖，吳梧桐等[15]用三氯乙酸法除蛋白制備豬胎盤脂多糖，吳紅棉等[16]用

6、等電點沉淀法除蛋白制備珠母貝糖胺聚糖。利用各種多糖的溶解度不同及電荷密度的差異進行分離，由于各種多糖結構和活性的不均一性和分子量的高分散性，分離得到單一多糖后，還可按其理化性質及生物活性進一步分離[17]。2.2脫色多糖中常含有一些色素，可以根據其不同性質采取不同的方法進行脫色。常用的脫色方法有：離子交換法、氧化法、吸附法(纖維素、硅藻土、活性炭等)等。如柴向華等[18]在制備鯊魚軟骨多糖時用活性炭、白陶土進行脫色。另外，DEAE-纖維素是目前最常用的脫色劑，通過離子交換柱不僅可以達到脫色的目的，而且還可以分離多糖。2.3分級純化方法2.3.1超濾法超濾現是一種種重要的分離純化實驗技

7、術，廣泛用于含有小分子溶質的各種生物大分子如蛋白質、多糖、酶、核酸等的濃縮、分離和純化。溶質或懸浮物料按大小不同而分離，比膜孔小的物質和溶劑一起透過膜，而較大的物質則被截留。在操作過程中不會改變產品的性能和活性，對不穩(wěn)定產品是安全的，因而對于動物多糖這樣的高分子生物活性物質來說是最適合的。Lignot等經比較證實超濾技術用于濃縮純化硫酸軟骨素的可行性，并證明孔徑為0.1μm時超濾膜分離效果最佳。鈕明洋[19]用超濾法代替透析法去除海洋真菌多糖提取液中的單糖