分離羊肚菌菌種方法

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1、分離羊肚菌菌種方法本技術(shù)的目的在于提供一種不用消毒劑，既容易萌發(fā)，同時(shí)也能降低污染，并能較順利的分離到羊肚菌菌種的分離羊肚菌菌種方法。?為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本技術(shù)方案采用了一種分離羊肚菌菌種的方法，包括以下步驟:將膠帶封閉的羊肚菌用75%消毒酒精均勻擦拭后，用燒灼的刀具從菌柄頂端在火焰上方切割掉子實(shí)體頭部，露出的新鮮菌柄橫切面，在火焰上輕快過2-4下，用刀具在新鮮菌柄內(nèi)側(cè)環(huán)割菌柄新鮮菌肉組織并送入抗生素平板培養(yǎng)荃上，于20-30℃的溫度下培養(yǎng)，待萌發(fā)出菌絲后，及時(shí)轉(zhuǎn)接。?所述的刀具為手術(shù)刀片。?羊肚菌子實(shí)體在切割前要基部菌柄完整，用透明膠把羊肚菌整個(gè)纏繞密封，中間不留

2、空隙。?所述的抗生素平板培養(yǎng)基為:馬鈴薯400g,草炭l00g,葡萄糖20g，磷酸二氫鉀lg,硫酸鎂0.5g,酵母膏50g，瓊脂20g、水1000mL,鏈霉素30U/mL，青霉素30U/mL,pH6.5?所述抗生素平板培養(yǎng)基的制作方法為:土豆削皮切薄皮加3000m1.水煮30min，過濾取2000mL，加入草炭，小火浸煮20min，過濾取濾液1000mL，在此濾液中加入葡萄糖、酵母膏、瓊脂、磷酸二氫鉀、硫酸鎂，小火煮至瓊脂溶解，定容至1000mL，分裝于三角瓶，在高溫121℃-126'C,高壓0.1-0.14MPa滅菌30min。待冷卻至50℃左右加入青霉素鈉、硫酸

3、鏈霉素復(fù)合抗生素母液，使抗生素終濃度在30U/ml.左右，將配好的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中或直接冷卻成固體培養(yǎng)基。??本技術(shù)的分離方法，先是對(duì)羊肚菌進(jìn)行封閉式消毒，防止消毒酒精浸入菌組織，有利分離成功。另外，割掉子實(shí)體頭部后，露出的菌柄內(nèi)側(cè)為無菌組織，環(huán)割取內(nèi)側(cè)菌肉組織防雜效果較好。采用抗生素培養(yǎng)基也有利于防止雜菌污染，培養(yǎng)基的組分營養(yǎng)非常全面，特別是加入草炭和酵母膏，為羊肚菌菌絲生長(zhǎng)提供了保證。本發(fā)明的整個(gè)操作過程不用消毒液，全用火焰消毒，萌發(fā)率較高，既保證了容易萌發(fā)，同時(shí)也能降低污染，并能較順利的分離到羊肚菌菌種。