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1、（20屆）畢業(yè)論文高性能淀粉酶菌株的篩選III摘要:淀粉酶是重要的工業(yè)用酶之一，高活性淀粉酶的生產(chǎn)是產(chǎn)業(yè)界的熱點。利用選擇性培養(yǎng)方式獲得淀粉酶高產(chǎn)菌株，并通過對其發(fā)酵條件及酶學(xué)性質(zhì)研究，比較其生產(chǎn)性能。從不同來源的曲中分離篩選到一株較高活性的淀粉酶生產(chǎn)菌株，根據(jù)該菌株的培養(yǎng)特征、形態(tài)學(xué)特征初步鑒定為黑曲霉。該菌株命名為CH1，在培養(yǎng)基優(yōu)化后，淀粉酶活性達到101.686u/mL。其最適反應(yīng)溫度為60℃，最適反應(yīng)pH為6.0。該酶在70℃及以下溫度內(nèi)處理30min，酶活損失不大，具有一定的耐熱性，該
2、酶在pH值為5.0～7.0范圍內(nèi)處理30min，仍保持高酶活，具有一定的耐酸性。關(guān)鍵詞:淀粉酶；分離篩選；發(fā)酵條件；酶學(xué)性質(zhì)IIIScreeningofStrainsfortheproductionofhigh-performanceamylaseAbstract:ThisstudyaimstoobtainamylaseproductionstrainswithhighactivityandwiderrangesoftemperaturesandpHvalue.ThestrainCH1produc
3、ingamylasewasisolatedfromdaqu,whichcomefromdifferentresource.Thestrainhadhighabilitytoproduceamylase．Accordingtoanalysisoftheculturecharacteristicsandmorphology,thestraincouldbeidentifiedasAspergillusnigerCH1．Inoptimizedcondition,amylaseactivityreache
4、d101.686u/mL.Theoptimalreactiontemperature60℃,theoptimumreactionpH6.0.Theenzymeintemperaturerangefrom20℃to70℃processwithin30minutes,amylaseactiitybasicallyunchanged,therefore,hascertainheat-resistant,theenzymeinpHrangefrom5.0to7.0processingwithin30min
5、utes,remainhighamylaseactivity,therefore,hascertainacidoresistant.Keywords:amylase;separationandscreening;fermentation;enzymologyproperty.III目錄摘要:IAbstract:II1緒論31.1淀粉酶簡介31.2淀粉酶來源31.3淀粉酶的應(yīng)用41.4淀粉酶的研究進展51.5論文目標(biāo)72實驗部分92.1實驗流程92.2分析方法92.3實驗材料92.3.1樣品來源92
6、.3.2實驗試劑92.3.3培養(yǎng)基配方102.3.4主要試劑配制102.3.5主要儀器102.4實驗方法112.4.1培養(yǎng)基的制備112.4.2產(chǎn)淀粉酶菌株篩選112.4.3菌種的保藏122.4.3菌種形態(tài)的初步觀察及初步鑒定122.4.4菌種發(fā)酵122.4.5淀粉酶活力測定132.4.6發(fā)酵過程中不同時間產(chǎn)酶量的測定142.4.7不同碳源、氮源對發(fā)酵產(chǎn)酶的影響142.4.8培養(yǎng)基優(yōu)化142.4.9淀粉酶酶學(xué)性質(zhì)的研究16403.1淀粉梯度標(biāo)準(zhǔn)曲線測定173.2菌種篩選結(jié)果183.3菌種顯微觀察結(jié)
7、果183.4發(fā)酵過程不同時間產(chǎn)酶量的測定結(jié)果193.5培養(yǎng)基優(yōu)化193.5.1碳源對產(chǎn)淀粉酶活力的影響193.5.2氮源對產(chǎn)淀粉酶活力的影響203.5.3正交法優(yōu)化培養(yǎng)基203.6酶學(xué)性質(zhì)研究223.6.1溫度對淀粉酶的影響223.6.2pH對淀粉酶的影響234結(jié)論25參考文獻26致謝27401緒論1.1淀粉酶簡介淀粉酶是催化淀粉、糖原轉(zhuǎn)化成葡萄糖、麥芽糖及其它低聚糖的一類酶的總稱，廣泛應(yīng)用于淀粉工業(yè)、食品工業(yè)、醫(yī)藥、紡織、洗滌劑、青貯飼料、微生態(tài)制劑以及釀酒等行業(yè)[1]。淀粉酶是最早用于工業(yè)化生
8、產(chǎn)的酶，迄今為止仍是用途最廣、產(chǎn)量最大的酶制劑產(chǎn)品之一[2]。不同種類的淀粉酶水解淀粉會生成不同的產(chǎn)物。常見的淀粉酶可以分為以下幾種：α-淀粉酶（EC3.2.l.1），也叫液化酶；β-淀粉酶（EC3.2.1.2）；葡萄糖淀粉酶（EC3.2.1.3），也叫γ-淀粉酶，簡稱糖化酶（縮寫GA或G）；異淀粉酶（EC3.2.1.68）等[3]。α-淀粉酶能隨機地作用于淀粉的非還原端，生成麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖，所得產(chǎn)物的還原性末端葡萄糖單位碳原子為α構(gòu)型，同時該酶能使淀粉漿的粘度下降
